任改新
- 作品数:38 被引量:136H指数:6
- 供职机构:南开大学生命科学学院微生物学系更多>>
- 发文基金:天津市自然科学基金国家科技攻关计划“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学化学工程医药卫生更多>>
- B.t.c. cry1C全长基因的克隆及其在增产菌中的表达被引量:2
- 2004年
- 设计的一对引物 ,对苏云金芽孢杆菌科默尔亚种 (Bacillusthuringiensissubsp .colmeri)1 5A3菌株中的cry1C基因进行PCR扩增 ,得到包括结构基因 ,调节基因在内的全长为4 0kb的PCR产物。经两步克隆 ,将此基因连接至穿梭表达载体pHT31 5上 ,得到重组质粒pHT 1C。通过电转化将其导入一株增产菌蜡状芽孢杆菌 (Bacilluscereus) 95 0 9菌株 ,SDS PAGE检测到 1条 60kD左右的蛋白带 ,镜检观察到菱形晶体 ,生测结果表明 ,cry1C基因的导入使Bc95 0 9菌株获得了对甜菜夜蛾的杀虫活性。
- 陈月华李红秀王津红蔡峻任改新
- 关键词:增产菌杀虫活性
- 球形芽孢杆菌 TS-1灭蚊毒蛋白的酶联免疫吸附测定被引量:1
- 1990年
- 通过Sephadex G-200柱层析纯化得到球形芽孢杆菌Ts-1毒蛋白,其中主要是42kDa和43kDa两种毒蛋白。用此毒蛋白免疫家兔获得抗血清。利用 ELISA 双抗体夹心法比较测定了三种灭蚊球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)高毒株和两种无毒株,证明 ELISA 具有很强的特异性。ELISA 测定球形芽孢杆菌 Ts-1纯化毒蛋白,最低可检值为1.56×10-5mg/ml。球形芽孢杆菌 Ts-1发酵液的最低可检度为1:16000倍稀释。ELISA 测定12和24小时发酵培养的 Ts-1样品处理液中毒蛋白的含量,分别为0.049mg/ml 和o.22mg/ml,毒蛋白含量相差4.59倍。而相应的生物测定 LC50值分别为0.71 ppm 和0.154 ppm,毒力相差4.61倍。ELISA 与生物测定方法结果吻合。
- 王健任改新尚克进
- 关键词:球形芽孢杆菌毒蛋白ELISA
- 球形芽孢杆菌对七种蚊虫的毒力测定
- 任改新
- 关键词:毒力测定
- 中国苏云金芽孢杆菌的分布与cry基因的多样性被引量:23
- 2001年
- 采集全中国 2 7个省、自治区及 4个直辖市昆虫孳生地粉尘、土壤等样品 1 0 80份 ,在其中的40 6份中分离到苏云金芽孢杆菌 965株。镜检可观察到大菱形、小菱形、方形、长方形、圆形、椭圆形、镶嵌形和不规则形等 8种主要形态的伴孢晶体 ;采用cryⅠ、cryⅡ、cryⅢ、cryⅣ和cryⅤ基因的通用引物对 2 2 1株Bt分离株进行的PCR检测结果表明 :各类基因的含量依次为cryⅠ >cryⅡ >cryⅤ>cryⅢ基因 ,分别占被检菌株的 75 6%、 67 9%、 58 4%和 1 4 5% ,没有检测到cryⅣ基因 ,共得到1 0种基因组合类型。对其中含有cryⅠ基因的菌株分别以cryIAc、cryIC和cryIE基因的特异性引物进行PCR检测 ,得到 2 0株同时含有cryIAc、cryIC、cryⅡ和cryⅤ优良基因组合的Bt分离株 ,其中菌株Bt 1 5A3对棉铃虫、甜菜夜蛾及小菜蛾均表现出高毒力 ,具有生产开发潜力。
- 王津红吴卫辉陈月华任改新
- 关键词:苏云金芽孢杆菌PCRCRY基因多样性
- 苏芸金芽孢杆菌的肠毒素及其编码基因的研究被引量:3
- 1998年
- 目的对苏芸金芽孢杆菌(简称Bt)种群不同亚种存在的蜡状芽孢杆菌肠毒素基因及溶血素BL进行检测,以便评估Bt对人类及高等动物潜在的致病性。方法采用多重引物PCR技术,在同一PCR体系同时加两对引物,hblA及bceT基因的扩增片段分别为1017bp及427bp,与预期的完全一致;应用HBL羊血平板,产溶血素BL的菌株可产生非连续型溶血环。结果45株Bt标准株中,29株含有hblA基因,占64.4%;15个生产用菌株及野生株中,含hblA基因的菌株为10株,占66.66%;含bceT基因的标准株29株,占64.4%,含bceT的Bt生产用菌株及野生株为13株,占86.6%。HBL羊血平板检测结果表明:28.8%的Bt标准株及33.3%的Bt生产用菌株及野生株含溶血素BL。结论hblA及bceT基因在苏芸金芽孢杆菌中是普遍存在的,建议在遴选Bt生产菌株时。
- 张文成任改新
- 关键词:聚合酶链反应苏芸金芽孢杆菌肠毒素基因
- 具优良基因组合的高效Bt15A3菌株、分离及应用
- 本发明是具有优良基因组合的苏云金芽孢杆菌科默尔亚种15A3株及分离筛选方法;其独特的cry基因的组合,这些基因分别是:cry1Aa,cry1Ac,cry1C,cry1D,cryII和cryV,利用多种cry基因特异引物的...
- 陈月华任改新王津红刘春勇冯书亮吴卫辉王飞李红秀
- 文献传递
- 应用苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis Berliaer)防治马尾松毛虫(Dendrolimus punctatus Walk)试验
- 从1960年起到1961年止在湖南及福建地区进行了应用苏云金杆菌防治属尾松毛虫的试验,试验得出了以下的结论。试验的方法与一般药剂试验同,将喷射菌液或菌粉的幼虫和针叶放入铁纱笼中,挂于林周喷菌的松树上,或有时放于试验室内(...
- 孙錫麟任改新李运帷王志賢
- 文献传递
- 韭蛆病原菌Bt TN-189cyt基因的克隆及工程菌株的构建
- 以Genebank中收录的来自Bacillus thuringensis subsp.israelensis(Bti)的cytA基因序列为依据,设计了特异性的引物:cytA1和cytA2,对从四川成都分离的韭蛆病原菌Bt...
- 李毓冰刘春勇陈月华任改新
- 关键词:克隆工程菌株
- 文献传递
- 苏云金杆菌肯尼亚变种防治枣尺蠖研究初报被引量:3
- 1996年
- 1992~1995年,我们开展了苏云金杆菌肯尼亚变种防治枣尺蠖研究,通过室内药效测定、田间药效试验和大面示范,结果表明,使用苏云金杆菌肯尼亚变种乳剂300倍或其粉剂500倍,药效分别为90~100%和95~100%。
- 苗春生潘河山任改新梁风来赵刚
- 关键词:苏云金杆菌枣尺蠖微生物农药杀虫剂枣树
- 苏芸金杆菌防除粘虫的研究增效途径及血细胞的病态变化
- 近年来,各国对苏芸金杆菌的研究,已证实其对鳞翅目幼虫一般地具有较高的杀伤力,但通过资料的综合和试验结果的分析,也看出对某些鳞翅目幼虫的毒效不够理想,以国内大害虫之一的粘虫论,只有在使用相当高的浓度时方能奏效。根据加入辅助...
- 刘崇乐任改新傅貽玲
- 文献传递