广西动物疫病预防控制中心
- 作品数：323 被引量：1,123H指数：15
- 相关作者：郑敏施开创熊毅韦显凯屈素洁更多>>
- 相关机构：广西大学温州大学军事医学科学院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区科技攻关计划广西省自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生经济管理更多>>
- 口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病三种疫苗同步两点免疫在规模猪场的应用试验
- 为探索和评估口蹄疫(FMD)、猪瘟(CSF)、高致病性猪蓝耳病(HP-PRRS)的合理免疫程序,选择6个规模猪场,其中3个场采用“332法”免疫程序(即先用FMD和CSF疫苗同时在颈部两侧注射,间隔14天后再用HP-PR...
- 覃勇黄文炳黄金山赵聪唐云姣班雪花施开创
- 关键词：口蹄疫猪瘟高致病性猪蓝耳病免疫程序田间试验
- PEDV、TGEV、PDCoV、PRoV多重RT-PCR检测方法的建立
- 针对猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪Delta冠状病毒(PDCoV)和猪轮状病毒(PRoV)基因序列，分别设计特异性引物，扩增PEDVN基因(750bp)、TGEVM基因(544 bp)、...
- 王睿敏施开创黎宗强尹彦文谢守玉莫胜兰陆文俊屈素洁
- 关键词：猪流行性腹泻病毒猪传染性胃肠炎病毒猪轮状病毒多重RT-PCR
- 2株鹅细小病毒的主要结构蛋白VP2基因的克隆和序列分析被引量：4
- 2008年
- 将鹅细小病毒PJ分离株和XJ分离株接种于13日龄非免疫鸭胚,收集接毒后24～72h死亡的鸭胚尿囊液。根据Genbank已发表的鹅细小病毒B株基因组核苷酸序列设计1对引物,对2株鹅细小病毒毒株主要结构蛋白VP2基因进行PCR扩增,将扩增产物与pMD18-T载体连接并测序。结果表明:PJ株和XJ株VP2的核苷酸序列全长分别为2 044bp和2 050bp,PJ株与B株、XJ株、台湾株的同源性均为93.5%～96.7%,与YG株、哈尔滨株、广东株的同源性为88.7%左右,与匈牙利株的同源性仅为80.7%,而与番鸭细小病毒的同源性为74.8%～80.7%。XJ株与匈牙利株的同源性为83.5%,与番鸭细小病毒的同源性为76.8%～80.0%,与其他毒株的同源性为91.6%～98.3%。
- 胡晓静潘杰陈进喜付薇徐贤坤何丹刘棋熊毅
- 关键词：鹅细小病毒VP2基因克隆
- 应用RT-PCR技术净化携带猪瘟病毒猪的效果
- 2009年
- 应用反转录-聚合酶链反应RT-PCR检测猪扁桃体猪瘟病毒,以清除健康猪的猪瘟隐性带毒,对规模猪场的猪瘟危害进行控制。2007年,用RT-PCR对广西某存栏350头种猪场全群活体采集扁桃体连续进行2次猪瘟病毒检测,检出并清除带毒猪,使猪群中猪瘟病毒的带毒猪比例明显下降。结果表明,RT-PCR检测猪扁桃体可应用于猪场猪瘟的控制与净化。
- 陆文俊胡杰郑敏苏凯
- 关键词：猪瘟病毒反转录-聚合酶链反应
- 犬圆环病毒全基因组克隆与序列分析被引量：12
- 2016年
- 犬圆环病毒(Dog circovirus,DogCV)是近年来新发现的一种哺乳动物圆环病毒。为研究DogCV中国流行毒株基因组特性和遗传进化,以犬血清样品提取的DNA为模板,采用重叠PCR技术首次获得DogCV中国流行毒株的全基因组序列,命名为JZ98/2014。序列分析表明JZ98/2014全基因组长度为2063nt,编码3个主要开放阅读框:ORF V1(Rep蛋白,303个氨基酸)、ORF C1(Cap蛋白,270个氨基酸)和ORF C2(106个氨基酸)。同源性比较显示JZ98/2014与美国、欧洲流行毒株的全基因组序列同源性为82.1%-89.5%,而Rep和Cap基因同源性分别为82.1%-89.5%和84.6%-89.1%。遗传进化树分析显示,目前世界流行的DogCV存在多个分支,而JZ98/2014与美国、欧洲流行毒株处于不同分支。
- 孙文超曹慧慧郑敏徐素萍张红云韦显凯苏姣秀何杰勇
- 关键词：基因进化分析
- A型塞尼卡病毒与O型、A型、亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒多重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：3
- 2022年
- 为建立鉴别检测A型塞尼卡病毒(SVA)与O型、A型、亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒(FMDV)的方法,针对SVA 3D基因与O型、A型、亚洲Ⅰ型FMDV VP1基因,分别设计特异性引物和TaqMan探针,经优化反应条件,建立了同时检测SVA与O型、A型、亚洲Ⅰ型FMDV的TaqMan荧光定量RT-PCR方法。所建立的方法能特异性扩增SVA及O型、A型、亚洲Ⅰ型FMDV,与其他主要猪源病毒无交叉反应;对SVA与O型、A型、亚洲Ⅰ型FMDV质粒标准品的检出下限分别为2.50×10^(1)、2.50×10^(2)、2.50×10^(2)、2.50×10^(2)copies/μL;组内与组间重复性试验的变异系数均小于2%。应用所建立方法检测2019年来自广西的30份临床疑似样品,SVA和O型FMDV的检出阳性率分别为20%和70%,而未能检出A型和亚洲Ⅰ型FMDV。结果表明,本研究所建立的多重荧光定量RT-PCR方法为SVA与O型、A型、亚洲Ⅰ型FMDV的临床检测和流行病学调查提供了特异、敏感、高效的技术手段。
- 施开创谢守玉赵晶莫胜兰刘惠心尹彦文司红彬屈素洁陆文俊冯淑萍粟艳琼
- 关键词：口蹄疫病毒荧光定量RT-PCR
- 小鼠TLR3基因双敲除打靶载体构建及巨噬细胞RAW264.7^(TLR3-/-)细胞系的建立被引量：1
- 2018年
- 【目的】建立Toll样受体3(TLR3)基因缺失的小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞系,为探索狂犬病毒感染机体过程中TLR3在固有免疫反应中的作用机制提供理论依据。【方法】采用Golden Gate Kit试剂盒组装转录激活样效应因子核酸酶(TALEN)打靶载体p TALEN-TLR3,经酶切和测序验证其连接正确后,通过脂质体瞬时转染RAW264.7细胞,转染后提取细胞DNA,用T7核酸内切酶酶切验证TALEN质粒剪切活性。【结果】TALENs左右臂分两部分连接,首先完成A、B部分的各自连接,然后分别将T1LA与T1LB、T1RA与T1RB、T2LA与T2LB、T2RA与T2RB连接,TALEN模块经过两次连接后的PCR鉴定结果显示,T1L、T1R和T2L的4个克隆均呈阳性,T2R有3个克隆呈阳性。T2L和T2R质粒共转染RAW264.7细胞后提取DNA为模板,经PCR扩增后用T7核酸内切酶进行酶切,酶切后的DNA电泳结果显示TALEN2剪切活性较强,共获得3条条带(931、555和376 bp)。TALEN打靶载体p TALEN-TLR3转染RAW264.7细胞24 h后用胰酶进行消化,并加入800μg/m L G418进行筛选,7 d后获得细胞单克隆;挑选阳性细胞克隆进行T7核酸内切酶酶切鉴定及测序,结果发现4-1和4-40号细胞克隆为双敲细胞系,均缺失7 bp的核苷酸碱基,为非3整数倍碱基缺失,可造成后续基因移码突变,使细胞基因功能失活。【结论】通过TALEN技术可成功构建TLR3基因双敲除的小鼠巨噬细胞RAW264.7TLR3-/-细胞系,且可用于狂犬病毒感染细胞后细胞因子和TLR3间的关系研究。
- 韦显凯韦显凯祝健唐海波祝健李晓宁唐海波
- 关键词：狂犬病毒RAW264.7细胞
- 临床健康猪群猪链球菌2型带菌率流行情况调查被引量：5
- 2010年
- 为了解钦州市临床健康猪群中猪链球菌2型的流行情况,采用PCR方法对采集的病料进行检测分析。374份样品的PCR检测结果显示,链球菌、猪链球菌、猪链球菌2型的带菌率分别为81.8%、48.9%、2.9%,表明钦州市健康猪中猪链球菌带菌率高,但猪链球菌2型带菌率较低。
- 郑彦梓陈进喜翟成兵覃明强黄梅黄稳妃王中华覃芳芸熊毅彭定兵
- 关键词：猪链球菌2型流行病学调查扁桃体
- 广西地区猪圆环病毒2型和猪圆环病毒3型基因型监测及遗传进化分析被引量：7
- 2019年
- 为了明确猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV-2)和猪圆环病毒3型(Porcine circovirus type 3,PCV-3)在广西地区的分子流行病学情况,试验通过PCR方法对2017年来自广西不同地区的80份猪肺脏样品进行PCV-2和PCV-3核酸检测,并对PCV-2和PCV-3的阳性样品进行ORF2基因的扩增和测序,同时利用生物信息学软件DNAStar和MEGA 6.06对PCV-2和PCV-3的ORF2基因进行同源性分析和构建遗传进化树。结果表明:2017年广西地区PCV-2和PCV-3的总感染率分别为43.8%(35/80)和33.8%(27/80),PCV-2和PCV-3的共感染率为16.3%(13/80)。试验获得的19个PCV-2 ORF2基因序列之间的核苷酸同源性为93.6%～99.9%,对应氨基酸同源性为93.1%～100%;19个PCV-2 ORF2基因序列与国内外参考毒株ORF2基因序列的核苷酸同源性为82.8%～99.9%,对应氨基酸同源性为83.3%～99.6%。试验获得的2个PCV-3 ORF2基因序列之间的核苷酸同源性为99.8%,对应氨基酸同源性为100%;2个PCV-3 ORF2基因序列与国内外参考毒株ORF2基因序列的核苷酸同源性为97.7%～99.8%,对应氨基酸同源性为96.2%～100%。获得的19个PCV-2 ORF-2基因序列中,12个为PCV-2b亚型,7个为PCV-2d亚型;获得的2个PCV-3 ORF2基因序列为PCV-3a亚型,与丹麦和中国湖南分离得到的PCV-3亲缘关系较近。说明PCV-2和PCV-3在广西地区猪群中感染率很高,PCV-2感染主要以PCV-2b亚型为主,PCV-3之间高度保守,分布无地域性规律。
- 李金凤哈卓哈卓李卓昕张涵张涵郑敏郑敏鲁会军金宁一
- 关键词：猪圆环病毒2型ORF2基因遗传进化分析同源性分析分子流行病学
- 两种O型口蹄疫ELISA检测试剂盒的对比被引量：5
- 2016年
- 为比较哪种ELISA试剂盒能够更准确、简便、快捷地检测出口蹄疫病毒抗体,本研究使用液相阻断酶联免疫吸附试验(LB-ELISA)试剂盒和固相竞争酶联免疫吸附试验(SPC-ELISA)试剂盒,对2014年广西各市县动物疫病预防控制中心送检的已免疫过口蹄疫疫苗的猪、牛、羊血清共计1121份进行了检测,对比两种试剂盒的特异性、敏感性、阳性检出率及符合率。检测结果表明,两种口蹄疫ELISA试剂盒的阳性检出率不同,LB-ELISA的阳性检出率比SPC-ELISA高2.4%;LB-ELISA试剂盒对血清抗体滴度水平的要求相比SPC-ELISA试剂盒要低,因此LB-ELISA试剂盒更适合于口蹄疫病毒感染的检测。
- 吕晓丽姚晓韵何奇松冯淑萍马军覃雨阳李雪梅熊毅颜健华
- 关键词：O型口蹄疫抗体
