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油莎草(Cyperus esculentus)MADS-box转录因子家族鉴定及表达分析: 2024年; MADS-box基因家族与植物生长和发育调控密切相关。为揭示油莎草MADS-box家族成员组织表达模式,本研究根据油莎草茎块RNA-Seq结果,利用HMM搜索鉴定了26个家族成员,系统发育分析及保守结构域分析表明油莎草MADS-box成员主要属于MIKC型,具有典型的MEF2类MADS结构域,在不同茎块发育时期具有7种表达模式,其中CeMADSXAL1基因在茎块发育初期高表达,推测CeMADSXAL1基因对油莎草茎块发育过程具有重要调控作用。此外,研究对CeMADSXAL1基因进行克隆,获得长度为747 bp的开放阅读框,编码249个氨基酸;亚细胞定位分析结果显示,Ce MADSXAL1蛋白主要在细胞核内表达,结果为进一步阐明油莎草MADS-box基因功能提供了理论基础。; 王一非门婧婕张笑笑荆美玲李佳王艺瑾王丽艳董园园; 关键词：油莎草亚细胞定位

大豆磷脂酶C基因GmPLC10调节植物耐旱机制的研究: <正>干旱地区约占陆地面积的30%,而且干旱对植物不论早熟还是晚熟的品种都会造成根系生长受阻,根系活力降低,叶绿素含量降低,使得植株生产能力降低,进而导致籽粒产量大幅度下降。近几年,越来越多的学者研究PLC的功能,其中植...; 孙大千徐赫韩周永刚刘伟灿王法微李海燕; 文献传递

非生物胁迫下植物中CBL-CIPK信号通路研究进展被引量：4: 2018年; 植物在外界胁迫环境中能够生存得益于它们对胁迫的快速应答和体内复杂的调控机制。钙调磷酸酶B样蛋白(CBL)和CBL相互作用蛋白激酶(CIPK)信号通路是一类灵敏的Ca^(2+)信号传导网络。在众多植物中都已经鉴定出了编码CBL和CIPK的基因。本文将围绕CBL/CIPK基因的表达模式和功能,非生物胁迫下植物CBL和CIPK调控网络上最新的研究发现进行综述,以期为抗逆育种提供新思路。; 李洋李晓薇徐赫韩肖红庆孙大千王南李海燕; 关键词：非生物胁迫信号通路

二穗短柄草BdGPX4基因的克隆及酶学性质被引量：1: 2018年; 为解析模式植物二穗短柄草中谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GPX)在抗氧化过程中的作用机制,对二穗短柄草BdGPX4基因进行克隆,获得681bp的cDNA序列,该基因编码226个氨基酸残基的蛋白质,预测相对分子量是24.49ku。通过亚细胞定位预测,BdGPX4蛋白位于叶绿体和线粒体中。生物信息学分析发现BdGPX4基因启动子具有植物激素、光信号、干旱以及冷胁迫响应元件。结合二穗短柄草基因芯片数据和RT-PCR表达检测结果,发现BdGPX4基因在根、茎、叶、叶鞘、苗芽、穗状花序和种子等部位均表达,在光合组织和生长旺盛部位的表达显著高于非光合和衰老部位,并在根部受到SA诱导表达上调。成功构建BdGPX4基因的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并纯化BdGPX4蛋白,检测到对H_2O_2和COOH具有较高活性,但对底物tBOOH活性较低,与直系同源蛋白OsGPX4相比功能发生分化。基因表达模式及酶学活性的特点预示着二穗短柄草BdGPX4基因在光合器官和胁迫条件下具有重要的抗氧化作用。; 杨雪武志海李艳丽杨美英; 关键词：二穗短柄草谷胱甘肽过氧化物酶酶学活性

布鲁氏菌P39基因的克隆、原核表达及其糖基化修饰被引量：1: 2018年; 为探究糖基化修饰对布鲁氏菌P39蛋白免疫原性的影响,本试验对布鲁氏菌P39蛋白进行了表达和纯化,并对表达的蛋白进行了甘露六糖修饰。参照GenBank公布的布鲁氏菌P39基因序列设计引物,从布鲁氏菌16M基因组中克隆P39基因片段并连接至pMD19-T载体,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,提取阳性菌株质粒进行酶切等鉴定,鉴定正确后构建重组质粒pGEX-6P-1-P39,对重组蛋白进行诱异表达与条件优化。利用SDSPAGE和Western blotting对诱导表达的目的蛋白进行分析,将鉴定正确的蛋白经GST亲和层析柱纯化。通过EDC/NHS法对纯化的P39蛋白进行甘露六糖修饰,研究甘露六糖修饰后目的蛋白对巨噬细胞吞噬的影响。结果显示,本试验成功克隆了片段大小为1 206bp的目的基因,构建了pGEX-6P-1-P39原核表达载体,在大肠杆菌中成功表达了P39蛋白,该蛋白主要以可溶性形式存在。Western blotting结果显示,在约65ku处有特异性条带。纯化后获得目的蛋白大小为43ku,成功对目的蛋白P39进行了糖基化修饰,得到修饰产物与蛋白的摩尔比为2.3∶1。此外,糖基化修饰可显著提前蛋白激活小鼠巨噬细胞的吞噬作用时间。本试验结果可为研究甘露六糖修饰影响P39蛋白免疫原性的机制提供参考。; 胡祥坤卢天成刘思阳付玉芹王茗宇郑晗旭王岩王秀然; 关键词：布鲁氏菌 P 原核表达纯化

重叠延伸PCR技术在单碱基定点突变中的作用被引量：2: 2021年; 氨基酸通透酶(amino acid permease,AAPs)是一种跨膜转运蛋白,广泛参与植物体内氨基酸的吸收与转运。本试验通过重叠延伸PCR技术对氨基酸通透酶基因进行单碱基定点突变,以便为今后研究植物对外源氮的吸收与利用率奠定基础。本研究根据Tair数据库中拟南芥AtAAP1基因序列,利用Primer Premier 5.0软件设计含有1个突变位点的2对互补的定点突变引物和1对带有pCAMBIA3301-GFP载体的多克隆位点的接头引物,以野生型拟南芥叶片的cDNA为模板,进行3次PCR扩增,将获得的突变基因片段连接到pCAMBIA3301-GFP载体上,转化DH5α感受态细胞。将筛选的阳性菌株送至公司测序,测序结果表明拟南芥AtAAP1基因的第908位碱基A突变为T,实现了单碱基定点突变,这与预计结果相同,说明成功依靠重叠延伸PCR技术做到目的基因的定点突变。该技术能方便快速地获得定点突变序列,为进一步研究AtAAP1基因的功能奠定了基础。; 秦智陈彦伯李雨婷李慧颖周莹崔喜艳; 关键词：定点突变

分子对接技术在研究群体感应抑制剂中的进展: 2023年; 在大多数致病菌中都存在群体感应系统,而群体感应抑制剂就是以此系统作为靶点,在不影响细菌生长的情况下阻断细菌生物被膜形成或抑制毒力基因表达,不易导致耐药性的产生,是一种理想的抗菌增效剂。分子对接作为虚拟筛选技术之一,其目标具体、效率高、成本低,是药物研发的重要手段。本文重点介绍了分子对接的主要模块及其在研究群体感应抑制剂中的进展。; 周昱伽贾宇马文敏张昊马红霞; 关键词：分子对接

轮状病毒概况及其疫苗的研究进展: 2017年; 轮状病毒(Rotavirus,RV)是引起婴幼儿腹泻的主要病原体之一,严重时引发致命性胃肠炎,甚至会因为脱水而导致死亡。世界上几乎每个孩子都至少感染过一次轮状病毒,且无特效药治疗,严重威胁人类健康,造成严重的经济损失。每次感染后都会增强免疫力,因此接种疫苗成为预防轮状病毒的最好手段。世界卫生组织已将轮状病毒疫苗纳入计划免疫程序。文章就轮状病毒结构和分类,轮状病毒疫苗的发展及其应用现状,新型疫苗的研究进展和轮状病毒外壳蛋白在不同体系下的表达情况予以综述。; 解长睿郭晓威张敏孙丹徐赫韩李晓微孙天旭李海燕; 关键词：轮状病毒疫苗外壳蛋白

植物F-box基因家族的研究进展被引量：17: 2018年; F-box基因家族是植物中最大的基因家族之一,由于其数量巨多,根据其蛋白C末端结构域的不同被分为不同的亚家族。F-box基因编码的蛋白能够调节多种多样的生命活动,如延缓植物衰老、调控植物开花以及响应生物胁迫、干旱和盐等逆境胁迫。近年来,随着全基因组测序的不断完善,越来越多物种的F-box基因被分析鉴定出来。已经鉴定出功能的F-box基因编码的蛋白大多能够和结合蛋白Skp1、骨架蛋白Cullin 1及Rbx1形成SCF复合体,进而参与泛素-蛋白酶途径(UPP)而发挥作用;少部分F-box蛋白以非SCF复合体形式发挥作用。泛素-蛋白酶途径(UPP)是机体重要的调节机制之一,大多数细胞内蛋白都是经过这一途径降解。主要对其蛋白结构,作用途径以及生物学功能进行概述,探讨F-box基因参与的生命活动,旨为F-box的深入研究奠定基础。; 许克恒张云彤张莹王彬王法微李海燕; 关键词：逆境胁迫

水稻OsTPP3基因的克隆及生物信息学分析被引量：2: 2018年; 海藻糖-6-磷酸磷酸酶(TPP)是海藻糖合成的关键酶,通过合成具有渗透能力的海藻糖增加植物在逆境中的存活能力。本研究通过克隆得到水稻OsTPP3基因并构建原核表达载体进行体外表达,对基因启动子顺式作用元件组成、表达模式和模拟蛋白三维结构等生物信息学分析,揭示OsTPP3基因在水稻抵抗逆境胁迫中的作用。结果显示,OsTPP3基因编码366个氨基酸,预测分子量39.99 kD,成功构建原核表达载体并体外表达。OsTPP3蛋白具有三个保守的基序构成酶活性位点,蛋白两个结构域之间是底物结合位点。OsTPP3基因的基因芯片结果显示在正常生长条件下各器官均检测到表达信号,是组成型表达基因。但在花和种子各器官中表达量明显较高;7 d幼苗经干旱和盐胁迫处理后,OsTPP3基因在根和芽中表现出表达量明显增加的特点。OsTPP3基因启动子组成元件预测基因表达模式与基因芯片表达情况一致。通过对OsTPP3基因表达模式的研究,发现其在生长发育和渗透性胁迫中发挥重要功能,可作为转基因遗传育种的备选基因。; 杨雪崔喜艳李艳丽杨美英; 关键词：基因克隆

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吉林农业大学生命科学学院生物反应器与药物开发教育部工程研究中心

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