汕头大学医学院分子生物学中心
- 作品数：63 被引量：271H指数：10
- 相关作者：刘静文李飚陈强锋冯国英朴英姬更多>>
- 相关机构：南京医科大学附属常州第二人民医院重庆医科大学检验医学院检验系重庆医科大学检验医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学政治法律自动化与计算机技术更多>>
- 潮汕地区汉族人群15个STR基因座的遗传多态性被引量：5
- 2004年
- 胡盛平刘静文蔡可莉卢锡芝
- 关键词：汉族人群遗传多态性STR基因座群体遗传学基因频率分布亲权鉴定
- 潮汕地区汉族人群12个Y短串联重复序列基因座遗传多态性分析被引量：1
- 2006年
- 目的调查潮汕地区汉族人群12个Y染色体短串联重复序列基因座的遗传多态性。方法应用PowerPlexTMY荧光标记复合扩增系统,对潮汕地区121名无关男性个体血样进行12个Y染色体短串联重复序列基因座的复合扩增,用ABIPRISM3100遗传分析仪对扩增产物进行检测分析。结果DYS19、DYS437、DYS389I、DYS389II、DYS438、DYS439、DYS393、DYS391、DYS390、DYS392基因座检出4～7个基因型,DYS385检出35个等位基因组,各基因座遗传多样性(genediversity,GD值)分布在0.4445～0.9525之间,DYS385基因座最高。结论上述12个Y染色体短串联重复序列基因座构成的单倍型在潮汕人群中具有较高的遗传多态性,适用于法医个体识别和亲权鉴定、遗传学及人类学的相关研究。
- 刘静文胡盛平李飚
- 关键词：Y染色体短串联重复序列遗传多态性单倍型
- 全反式维甲酸对高血压大鼠心肌eNOS磷酸化水平的影响
- 目的：全反式维甲酸（all2trans retinoic acid,atRA）是维生素 A 类衍生物,初步研究显示,它可以抑制 VSMC 增殖,促进内皮细胞增殖。本文旨在探讨 atRA 对高血压体内内皮源型一氧化氮（NO...
- 钟久昌余细勇黄东阳林秋雄单志新李晓红黄晓忠杨敏
- 关键词：全反式维甲酸一氧化氮
- 文献传递
- 宫颈癌细胞中辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶及其选择性剪接亚型真核表达载体的构建和表达被引量：2
- 2008年
- 目的:构建宫颈癌细胞中辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶(NRDR)及选择性剪接亚型NRDRB1真核表达载体,并转染HeLa细胞表达融合蛋白和native蛋白。方法:分别以pDONR-NRDR、pDONR-NRDRB1载体为模板,用PCR方法扩增两端带有酶切位点的NRDR及NRDRB1编码区序列,酶切后连接到pCDNA3、pCMV-Myc真核表达载体上,经酶切、测序鉴定后,转染HeLa细胞16 h,Western blot检测蛋白表达情况,蛋白质谱分析鉴定表达蛋白。结果:成功构建NRDR、NRDRB1真核表达载体,转染HeLa细胞后,可表达带有Myc标签的蛋白和不带标签的native蛋白;质谱分析结果进一步证实所表达的蛋白为NRDR和NRDRB1。结论:获得了在真核细胞中表达的NRDR、NRDRB1蛋白,为进一步研究其功能提供了实验材料。
- 宋旭红李蕊刘戈飞梁斌谢建平黄东阳
- 关键词：选择性剪接宫颈癌真核表达
- 全反式维甲酸对高血压大鼠体内ACE2表达与一氧化氮信号的影响被引量：6
- 2006年
- 目的:探讨全反式维甲酸(atRA)对高血压大鼠体内血管紧张素转换酶2(ACE 2)基因表达及一氧化氮(NO)信号的影响。方法:采用自发性高血压大鼠(SHR)及其同源对照W KY大鼠,经腹腔注射atRA,为期1月。分别用实时荧光定量PCR,N orthern印迹及免疫印迹技术测定atRA治疗后SHR体内ACE 2、血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1)的表达情况,以硝酸还原酶法检测血清NO水平。结果:与W KY对照组相比,SHR心脏ACE 2的mRNA和蛋白表达下调[mRNA拷贝数比值:(0.06±0.02)vs.1;蛋白吸光度比值:(0.73±0.05)vs.1,P均<0.01],atRA(低、高剂量atRA组)治疗后SHR心脏ACE 2表达上调[mRNA:(0.23±0.08),(0.53±0.18)vs.(0.06±0.02);蛋白水平上升:(0.9±0.07),(0.92±0.08)vs.(0.73±0.05),P均<0.05],同时出现AT1表达降低、血清NO水平增高以及血压下降(P均<0.05)。结论:长期atRA治疗促进SHR大鼠心脏ACE 2的表达增加,导致体内NO增加,血压下降,提示转录调节剂atRA很可能对人类高血压病防治具有一定的价值。
- 钟久昌余细勇黄东阳刘戈飞林曙光
- 关键词：一氧化氮维甲酸高血压
- 全反式维甲酸对高血压大鼠心脏氧化应激水平的影响被引量：5
- 2007年
- 目的:探讨全反式维甲酸(atRA)对高血压心脏还原型辅酶I氧化酶P22亚单位(p22phox)表达以及氧化应激水平的影响。方法:采用12周龄雄性自发性高血压大鼠(SHR)及其同源对照WKY大鼠,经腹腔注射at-RA,为期1月。分别采用免疫印迹、硫代巴比妥酸比色以及透射电镜技术测定atRA治疗后SHR心脏p22phox的表达、丙二醛(MDA)含量以及心肌超微结构情况。结果:与WKY对照组相比,SHR心脏组织中p22phox蛋白表达与MDA含量明显升高(P均<0.01)。而atRA治疗后SHR(低、高剂量atRA组)大鼠心脏组织中p22phox蛋白表达与MDA水平出现下调(P均<0.05),同时伴有心肌损伤减轻。结论:长期atRA治疗可降低SHR大鼠心脏组织中p22phox表达与MDA水平,提示atRA在高血压病中具有一定的抗氧化效应。
- 钟久昌黄东阳金海燕余细勇李晓红谢建平林秋雄符永恒
- 关键词：氧化性应激维甲酸高血压
- 宫颈鳞癌组织中NRDR选择性剪接新亚型的鉴定及意义被引量：10
- 2006年
- 目的:探讨NRDR选择性剪接新亚型NRDRB1 mRNA和蛋白在宫颈鳞癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用RT-PCR、免疫荧光、免疫沉淀、免疫印迹、MALDI-TOF质谱分析等技术,检测正常宫颈上皮及宫颈鳞癌组织中NRDRB1mRNA及蛋白表达。结果:NRDRB1亚型全长1 171 bp,其蛋白保留了SDR家族的N末端辅酶结合模序、C末端底物结合模序以及过氧化物酶体定位信号。因第3外显子的缺失,导致SDR家族典型的“LVSNAA”折叠的丢失,使NRDRB1蛋白空间构象发生改变,从而影响该蛋白的细胞内定位和功能,NRDRB1蛋白的亚细胞定位明显不同于NRDR,酶活性亦明显低于NRDR。NRDRB1 mRNA及蛋白在宫颈鳞癌组织中表达(15/27,55.6%),明显高于正常宫颈上皮组织(P<0.05),正常宫颈上皮除NRDR外,未检测到NRDRB1 mRNA及其蛋白。结论:NRDR选择性剪接的异常,以及新的剪接亚型NRDRB1细胞内定位及蛋白酶活性的改变可能与宫颈鳞癌的发生发展密切相关。
- 宋旭红梁斌刘戈飞李蕊谢建平黄东阳
- 关键词：HELA细胞
- 小鼠TIM1,TIM2和TIM3基因的克隆与序列分析被引量：1
- 2007年
- 目的:克隆小鼠TIM1、TIM2及TIM3基因全长编码区cDNA,同时对其进行序列分析。方法:采用RT-PCR方法,从小鼠活化淋巴细胞中获取TIM1、TIM2及TIM3基因cDNA全长,克隆至pMD18-T载体,选择阳性克隆进行序列测定。结果:扩增得到小鼠TIM1、TIM2及TIM3基因编码区cDNA全长分别是918bp、918bp和846bp,分别编码306、306和282个氨基酸残基,与GeneBank中发表的序列完全一致。结论:获得小鼠TIM1、TIM2及TIM3基因的全长克隆,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。
- 文世宏马玲娣张彦何於娟蒋纪恺
- 关键词：基因CDNA克隆小鼠
- 苦参碱联合伊马替尼对K562细胞红系分化的影响被引量：4
- 2008年
- 目的探讨苦参碱联合伊马替尼对K562细胞红系分化的影响。方法分别用0.2 g/L苦参碱与0.2μmol/L伊马替尼单独或联合作用K562细胞48 h,观察联苯胺染色阳性细胞数,并利用RT-PCR检测转录因子GFi-1B表达。结果苦参碱可降低伊马替尼单独作用K562细胞的联苯胺染色阳性细胞数以及转录因子GFi-1B的表达。结论苦参碱联合伊马替尼作用K562细胞后对红系分化有一定抑制作用。
- 刘小珊蒋纪恺
- 关键词：苦参碱伊马替尼白血病细胞分化
- 一种人神经母细胞瘤辅酶II-依赖性视黄醇脱氢酶cDNA的克隆及特征分析被引量：11
- 2005年
- 背景与目的:检测神经母细胞瘤中新的辅酶II_依赖性视黄醇脱氢/还原酶[NADP(H)_dependen tretinold ehydrogenase/reductase,NRDR]选择性剪接亚型。材料与方法:我们用NRDR特异引物,从人神经母细胞瘤细胞系SK_N_SH和SK_SY_5YcDNA中分别经PCR扩增出635bp和429bpDNA片段,测序证实635bp片段是NRDR,而429bp片段是选择性剪接新亚型。再用快速cDNA末端扩增(Rapidamplification of cDN Aends,RACE)方法得到429bp片段cDNA全长序列。用绿色荧光蛋白与新亚型的融合蛋白做亚细胞定位。结果:得到新亚型全长并命名为humanNRDRA2(hum NRDRA2)(AY616182)。已知NRDR有8个外显子,而新亚型hum NRDRA2由选择性剪接造成了第4和第6外显子丢失,从第5外显子开始读码框架前移1bp,导致随后的编码区框码漂移(frameshift),同时蛋白翻译终止信号提前出现,产生仅有188个氨基酸的蛋白,其中第137氨基酸以后的序列相对于NRDR完全发生改变,同时C_末端的过氧化物酶体定位信号_SRL丢失,却在160～176氨基酸处出现了一个细胞核定位信号。我们在ESTs库中未找到与其相同的剪接形式,提示它可能是神经母细胞瘤特有的一种NRDR剪接亚型。用GFP_NRDRA2融合蛋白做该蛋白的亚细胞定位,发现发绿色荧光的细胞均已悬浮,但悬浮状态不佳,而作为对照的NRDR另一亚型则能定位成功,提示NRDRA2蛋白可能具有一定的细胞毒性。结论:人神经母细胞瘤NRDRA2选择性剪接亚型羧基端框移突变并有核定位序列;该蛋白可能是一种细胞毒性蛋白。
- 李一凡刘戈飞宋旭红杜昆黄东阳
- 关键词：选择性剪接
