暨南大学生物医药基地
- 作品数：10 被引量：18H指数：3
- 相关作者：刘忠罗林波金琳更多>>
- 相关机构：中山大学药学院中国科学院南海海洋研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学化学工程更多>>
- 新型rhNDPK-A工程菌的构建及表达产物纯化研究被引量：1
- 2004年
- 目的 :为简化纯化过程 ,获得有临床研究价值的rhNDPK -A蛋白 ,构建新型rhNDPK -A基因的表达质粒 ,利用 6×His标签以Ni+ -NTA亲和层析柱纯化蛋白。方法 :将抑癌基因nm2 3-H1从质粒PBVNMH1中亚克隆于带有纯化标签的表达载体pQE4 0中。IPTG诱导表达目的蛋白。通过镍离子螯合层析柱一步纯化法纯化目的蛋白。结果 :pQE - 4 0中亚克隆的nm2 3-H1序列完全正确 ;目的蛋白在大肠杆菌M15中的表达量可达 4 9.6 % ;Ni+ -NTA亲和层析柱一步纯化后蛋白纯度为 93%。结论 :构建了带有 6×His纯化标签的新型rhNDPK -A基因表达质粒pQE -nm2 3H1,所构建质粒能高效表达目的蛋白 ,利用Ni+ -NTA亲和层析柱简便高效地纯化了表达产物。
- 冉延超王一飞熊盛张美英黄文韬罗林波刘秋英
- 关键词：核苷二磷酸激酶基因表达蛋白纯化
- C5和YL762抗HSV-1分子机制研究
- ＜正＞引言:单纯疱疹病毒属于α疱疹病毒亚科,分为 HSV-1、HSV-2两型。HSV-1主要感染口、眼、唇的皮肤和粘膜;HSV-2一般与外生殖器和口腔感染有关。约90%以上的人曾感染过 HSV,病毒在体内维持数年以至终生...
- 裴赢王一飞
- 文献传递
- RNAi技术的医疗应用潜力被引量：1
- 2003年
- RNA干扰是指双链RNA在细胞内特异性地诱导同源互补的mRNA降解 ,从而阻断相应基因表达的现象。RNAi发展成为一种新型的基因治疗方式的进程取决于哺乳动物RNAi的研究进展。在大多数哺乳动物细胞中 ,直接导入长dsRNA引发的非特异性基因沉默掩盖了RNAi效应 ,而多种有效的双链RNA导入方式在一定程度上解决了这一问题。初步的实验结果表明 ,用RNAi治疗癌症。
- 袁茵王一飞
- 关键词：RNAI技术基因治疗SIRNARNA干扰
- 高效液相色谱-串联质谱法对家兔血浆中奥司他韦浓度的测定被引量：3
- 2010年
- 建立了家免血浆中奥司他韦的高效液相色谱-串联质谱测定方法。以ZORBAXXDB—C18柱为色谱柱，乙腈-0．4％甲酸水溶液为流动相，梯度洗脱；流速300μL·min-1；柱温：20℃。质谱条件为气动辅助电喷雾离子源（ESI），检测方式为正离子多离子反应监测（MRM），以m／z313／166、313／208为定性离子对，m／z313／166为定量离子；生物样品采用固相萃取方法处理。奥司他韦的线性范围为0．05—500μg·L-1，定量下限达0．05μg·L-1，日内、日间相对标准偏差均小于6％，回收率为91％～93％，结果表明该法准确、灵敏、特异，适用于生物样品中奥司他韦的测定。该文还进一步探讨了奥司他韦主要质谱碎片的产生机理。
- 洪爱华李满妹刘忠梁志红
- 关键词：高效液相色谱-串联质谱奥司他韦血浆
- 若干海洋微生物来源抗感染活性化合物的研究
- 漆淑华梁潇马宣任哲
- 重组人抑癌相关蛋白核苷二磷酸激酶A的原核表达被引量：3
- 2004年
- 目的 :为提高表达量 ,简化纯化工艺 ,获得可用于临床研究的重组人NDPK -A蛋白 ,构建带有 6×His纯化标签的原核表达载体 ,优化表达条件获得产物高表达并鉴定产物活性。方法 :将抑癌基因nm2 3-H1从质粒pBVNMH1中亚克隆于带有纯化标签的表达载体pQE4 0中 ;梯度变化表达条件获得产物高表达 ;镍离子螯合层析柱纯化目的蛋白 ;Westernblot鉴定产物的免疫原性 ;HPLC测定产物的激酶活性 ;鸡胚尿囊膜试验鉴定产物抑制血管新生的生物活性。结果 :pQE - 4 0中亚克隆的nm2 3-H1序列无误 ;目的蛋白最高表达量可达 4 9 6 % ;纯化的表达产物能与天然NDPK -A的多克隆抗体特异结合 ;酶比活为 4 72U/mg ;具有抑制鸡胚尿囊膜血管新生的活性。结论 :表达质粒pQE -nm2 3H1能高效表达重组人NDPK -A ,纯化工艺简便 ,产物活性与天然NDPK -A无异。
- 冉延超王一飞熊盛张美英黄文韬罗林波刘秋英
- 关键词：核苷二磷酸激酶肿瘤抑制蛋白质类
- 靶向PCNA基因的小干扰RNA对鼻咽癌CNE2细胞周期的影响被引量：6
- 2009年
- 目的:研究小干扰RNA抑制PCNA基因表达后对鼻咽癌CNE2细胞株增殖及细胞周期的影响。方法:利用体外合成法合成针对PCNA基因的小干扰RNA(siRNA)序列,应用脂质体转染鼻咽癌CNE-2细胞,实时定量PCR(real-timePCR)和免疫组织化学法观察siRNA干扰后细胞中PCNA mRNA水平和PCNA蛋白表达,倒置相差显微镜观察转染前后CNE2细胞的生长变化,流式细胞仪检测siRNA干扰后的细胞周期。结果:在siR-NA转染CNE2细胞后,细胞增殖受到抑制,蛋白表达不同程度降低,对PCNA mRNA水平的抑制达98.5%,细胞周期在G0/G1停滞。结论:siRNA可在鼻咽癌中有效发挥RNA干扰效应,抑制PCNA mRNA及蛋白表达,降低PCNA活性,抑制鼻咽癌细胞增殖,为鼻咽癌基因治疗提供了新的方法。
- 练兵王继群金琳
- 关键词：鼻咽肿瘤增殖细胞核抗原CNE2细胞
- nm23-H1基因与人早幼粒白血病细胞HL-60增殖的相关性分析被引量：3
- 2004年
- 目的 :探讨nm2 3-H1基因的表达与白血病细胞HL - 6 0增殖之间的关系。方法 :以 2 5ng/mL阿糖胞苷处理HL - 6 0细胞 ,MTT法测定细胞生长抑制率 ,NBT还原比色法判断细胞分化状况 ,RT -PCR检测nm2 3-H1基因表达的变化 ;构建nm2 3-H1基因的真核表达质粒pEGFP -N1-nm2 3-H1,转染HL - 6 0细胞 ,通过细胞生长曲线和血清依赖性实验检测nm2 3-H1基因的过表达对HL - 6 0细胞生长的影响。结果 :小剂量Ara -C对HL - 6 0细胞的生长呈时间依赖性抑制 ,作用4d后细胞NBT还原能力增强且nm2 3-H1基因的表达下调 ;转染nm2 3-H1基因的HL - 6 0细胞生长加快、血清依赖性下降。结论 :Ara -C对HL - 6 0细胞增殖的抑制作用与下调nm2 3-H1基因的表达有一定关系 ;nm2 3-H1基因在HL - 6 0细胞中的过表达有促细胞增殖的作用 ,即增高了HL -6
- 袁茵王一飞张美英熊盛李久香胡红梅刘秋英吴志聪
- 关键词：NM23-H1基因HL-60细胞细胞增殖
- Hsp90抑制剂SNX-2112抑制肝癌细胞生长的作用机制
- 引言肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)为世界上第五大高发的恶性肿瘤,并且是第三大致死的恶性肿瘤。HCC早期发病症状不典型,临床上确诊时大多为晚期,已错过最佳的治疗机会,此时化疗是治疗的主...
- 王晓王绍祥王一飞
- nm23-H1基因对乳腺癌细胞MCF-7S增殖及移动特性的影响被引量：2
- 2003年
- 目的:探讨nm23-H1基因转染乳腺癌细胞后对其增殖和转移能力的影响。方法:用人nm23-H1基因与真核表达质粒pcDNA3.1(-)构建成重组表达质粒pcDNA3.1-NMH1,转染人乳腺癌细胞MCF-7S,经G418筛选4周后,筛选出稳定表达nm23-H1的细胞株,绘制其生长曲线,检测其增殖、移动能力,用SPSS统计软件处理实验数据,分析nm23-H1基因对乳腺癌细胞的作用。结果:与对照组相比,转染nm23-H1基因的MCF-7S细胞的对数生长期延长,细胞增殖速度减慢,移动距离缩短,克隆形成率降低。结论:nm23-H1基因在乳腺癌细胞的体外实验中有抑制癌细胞生长、增殖、转移能力的作用。
- 鲁欣王一飞张美英肖巧学熊盛李久香
- 关键词：NM23基因乳腺癌脂质体抑癌基因
