锦州医科大学生命科学研究院
- 作品数：51 被引量：76H指数：5
- 相关机构：昆明理工大学生命科学与技术学院南京农业大学动物医学院赤峰学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金国家级大学生创新创业训练计划更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学农业科学更多>>
- 蜜蜂残翼病毒VP2基因密码子优化、原核表达及免疫原性分析被引量：1
- 2019年
- 蜜蜂残翼病毒(Deformed wing virus,DWV)是引发世界各地大范围蜂群损失的主要嫌疑对象,间接给农业生产带来了巨大的经济损失。为了探究DWV结构蛋白VP2的免疫原性,深入研究该蛋白的功能和为制备DWV单克隆抗体提供可靠的免疫原,本研究从DWV分离株(GenBank登录号:MF770715)扩增得到VP2基因,同时根据大肠杆菌密码子的偏嗜性对VP2基因进行优化并合成,分别将优化前和优化后的VP2基因克隆到pET-28a载体上,获得重组质粒pET-28a-VP2和pET-28a-opti-VP2,分别转化至宿主菌BL21(DE3)中诱导表达,经SDS-PAGE和Western Blot检测,显示仅优化后的opti-VP2基因高效表达,然后对最佳表达条件进行摸索。在此基础上,对重组蛋白纯化后分3次免疫6周龄的雌性BALB/c小鼠,同时设置纯化病毒组和空白对照组,对免疫小鼠的抗体水平和淋巴细胞增殖指数(SI)以及干扰素(IFN-γ)、白介素IL-2和IL-4水平进行检测。结果表明,重组VP2蛋白能够诱导产生特异性抗体,促进淋巴细胞增殖,提高IFN-γ、IL-2和IL-4水平,具有良好的免疫原性,为深入研究DWV VP2蛋白功能和开发防治DWV的生物制剂提供了帮助。
- 郭亚茜王灏琦费东亮马跃宇樊琼黄思超王琛马鸣潇
- 关键词：VP2基因原核表达免疫原性
- OCT4和P27^kip1蛋白在肺癌含量及其相关性研究被引量：1
- 2020年
- 目的研究OCT4和P27^kip1蛋白在肺癌中的表达及其相关性,并探讨与肺癌临床病理参数的关系。方法采用免疫组织化学SP法对30例肺癌标本OCT4和P27^kip1的表达进行检测。结果肺癌标本OCT4和P27^kip1蛋白阳性表达分别为66.7%和73.7%,且OCT4和P27^kip1的表达水平与患者年龄、性别无明显关联,而与肿瘤转移有关。OCT4和P27^kip1在肺癌中的表达存在负相关(rs=-0.426,P<0.05)。结论OCT4和P27^kip1呈负相关性,可能在肺癌的发生发展过程中起关键作用,为肺癌诊治的研究提供了新的思路。
- 李福智侯阳
- 关键词：肺癌OCT4P27^KIP1免疫组织化学
- Sp1促进A549细胞增殖、EMT、侵袭和血管生成的研究被引量：2
- 2022年
- 研究Sp1转录调控原癌基因c-Met促进肺癌A549细胞增殖、EMT转化、侵袭和血管生成,抑制A549细胞凋亡的分子机制.首先采用双荧光素酶报告基因和染色质免疫共沉淀(ChIP)法检测Sp1与c-Met基因启动子结合情况.之后,在A549细胞中过表达和沉默表达Sp1,Western-blotting法和免疫荧光法研究Sp1转录调控c-Met,促进A549细胞增殖、EMT转化、血管生成,侵袭并抑制A549细胞凋亡的分子机制.与癌旁组织和正常组织相比,在肺癌组织样本中,Sp1和c-Met均呈现高表达;Sp1能够与c-Met基因启动子结合;Sp1转录调控c-Met通过激活c-Met-ERK通路,促进A549细胞增殖、抑制A549细胞凋亡;Sp1转录调控c-Met亦能促进A549细胞EMT转化,侵袭和血管生成.Sp1转录调控c-Met能够促进A549细胞增殖、EMT转化,侵袭和血管形成,抑制A549细胞凋亡.在肺癌发生发展进程中,Sp1转录调控c-Met发挥重要作用.
- 秦书华彭俊高创创桂浩鑫邵钰婷郝倩向诚徐天瑞刘莹
- 关键词：细胞增殖原癌基因C-MET血管生成
- 索拉非尼联合二甲双胍对胃癌HGC-27细胞增殖的协同抑制作用被引量：2
- 2020年
- 目的研究索拉非尼单药、二甲双胍单药及联合用药对胃癌HGC-27细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法MTT法及集落形成实验检查索拉非尼单药、二甲双胍单药及两者联合用药后胃癌HGC-27细胞的增殖情况;流式细胞术检查细胞凋亡率;Western blot检查相关蛋白表达水平。结果索拉非尼单药、二甲双胍单药及两者联合用药对胃癌HGC-27细胞增殖均有抑制作用,而联合给药后两药具有协同效果。给药后胃癌HGC-27细胞形态均发生改变,呈碎片状,联合用药后细胞破碎程度增加。经以上3种药物治疗后细胞总凋亡率均升高,联合用药效果更加显著。经索拉非尼单药、二甲双胍单药及二者联合治疗处理的胃癌HGC-27细胞p-ERK表达降低,而单药作用后ERK无明显变化,联合用药ERK表达降低;索拉非尼单药和联合二甲双胍用药后Bax表达均增加;而Bcl-2在单独及联合用药情况下表达均降低。结论索拉非尼联合二甲双胍抑制肺癌细胞增殖作用加强,两者具有协同增效的作用,其机制可能与抑制ERK活化,促进细胞凋亡,抑制细胞增殖有关。
- 钱越刘佳李智周磊戴红良
- 关键词：索拉非尼二甲双胍ERK胃癌
- 葡萄糖调节蛋白78对顺铂治疗舌鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
- 2023年
- 目的探讨葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein78,GRP78)对舌鳞癌顺铂治疗后生长和转移的影响及机制。方法MTT实验检测舌鳞癌CAL27及舌鳞癌顺铂耐药CAL27DR细胞的增殖情况;应用RNA干扰技术敲减CAL27DR细胞GRP78表达;应用0、2.5、5.0、10.0μmol/L DDP处理CAL27DR及siGRP78细胞;EdU实验检测敲减GRP78表达对细胞增殖能力的影响;Transwell实验检测敲减GRP78表达对细胞侵袭能力的影响;划痕实验检测敲减GRP78表达对细胞迁移能力的影响;免疫荧光实验检测敲减GRP78表达对Cortactin蛋白表达的影响;Western blot实验检测敲减GRP78表达对细胞ERK、p-ERK、AKT、p-AKT、FAK、p-FAK、N-cad和E-cad蛋白表达的影响。结果与CAL27细胞相比,CAL27DR细胞增殖能力显著升高;与对照组细胞相比,siGRP78细胞增殖能力及侵袭转移能力显著降低(P<0.05),Cortactin蛋白表达水平降低,ERK、AKT和FAK磷酸化水平显著降低(P<0.05),N-cad蛋白表达水平降低(P<0.05),E-cad蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论GRP78通过ERK、AKT信号通路上调细胞的增殖能力,导致舌鳞癌细胞对DDP的敏感性降低;GRP78介导舌鳞癌细胞EMT的发生并通过活化FAK激酶促进细胞侵袭转移能力升高。
- 邱波王冠楠谷艳娇黄克强苏荣健胡静
- 关键词：GRP78舌鳞癌顺铂
- 周期性牵张力介导BMP9通过PI3K/AKT信号通路调控人牙周膜成纤维细胞成骨分化被引量：2
- 2019年
- 目的研究在周期性牵张力介导下,骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic proteins 9,BMP9)能否激活PI3K/AKT信号通路调控人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblasts,hPDLFs)成骨分化。方法利用FlexCell系统对体外培养的hPDLFs加载正弦波、形变率10%、频率0.5Hz的周期性牵张力,免疫荧光法检测细胞骨架蛋白的表达及分布,qPCR检测RUNX2、OCN、OPN、OSX mRNA的表达情况,免疫印迹法检测成骨标志蛋白OCN、OPN的表达,加入PI3K信号抑制剂LY294002后AKT、P-AKT以及OCN、OPN的变化。结果与对照组比较,6 h、12 h组的细胞骨架蛋白表达增多且呈受力方向分布,OCN、OPN表达上调,差异有统计学意义(P<0.05),qPCR检测mRNA的表达趋势与蛋白检测结果一致。结论周期性牵张力介导BMP9可以通过PI3K/AKT信号通路调控hPDLFs成骨分化。
- 张超胡静张君怡魏克元孙海豹黄克强
- 关键词：人牙周膜成纤维细胞PI3K/AKT
- 以科研促进教学的创新型医学人才培养模式的探究被引量：4
- 2022年
- 高等院校的建设与发展始终伴随着教学和科研两大永恒主题,科研是高等学校的活力源泉,高水平的科研成果能够促进学科知识更新,加快学科发展,从而有效地提升高校的教学质量;而高质量的教学效果可以激发学生的创新能力与创造思维,科研融入教学是促使两大主题相辅相成、相互促进的良性循环途径。文章以培养创新型医学人才为目标,从提升教学水平以及启发医学生创造性思维、培养医学生创新学习能力、提高医学生创新科研能力的角度分析培养以科研促进教学的创新型医学人才,并从教师转变教学理念、将科研融入教学过程、医学生尽早参加教师的科研工作等多个方面,提出以科研促进教学的主要措施来推进教学内容的改革,进一步提高医学生的学习能力,培养其创新能力。
- 朱弘焱刘超赵颂田鹤
- 关键词：教学医学生教学水平
- 抗体封闭细胞表面GRP78抑制厄洛替尼耐药性口腔舌鳞状细胞癌细胞的生长和转移
- 2019年
- 目的观察应用特异性抗体封闭细胞表面葡萄糖调节蛋白78(GRP78)对厄洛替尼耐药的口腔舌鳞状细胞癌(简称鳞癌)细胞生长的抑制作用。方法应用GRP78特异性抗体处理厄洛替尼耐药性舌鳞癌细胞(TCA-8113-ER),采用MTT方法和克隆形成实验检测抗体封闭对TCA-8113-ER细胞增殖情况及其对厄洛替尼反应性的影响,in-cell Western技术检测GRP78在TCA-8113-ER细胞表面的表达,流式细胞术检测TCA-8113-ER细胞凋亡情况,划痕法和Transwell法检测TCA-8113-ER细胞侵袭和转移情况,Western blotting检测c-MET、AKT和STAT3表达及磷酸化水平。结果GRP78特异性抗体可以抑制TCA-8113-ER细胞的生长,促进其凋亡,增强其对厄洛替尼的反应性,抑制其侵袭和转移,抑制c-MET、AKT和STAT3的磷酸化。结论抗体封闭细胞表面GRP78能够抑制厄洛替尼耐药性舌鳞癌细胞的生长、侵袭和转移,增加其对厄洛替尼的敏感性。
- 商家炜徐振华黄克强王月王志静苏荣健
- 关键词：舌鳞状细胞癌获得性耐药厄洛替尼
- 三种鸡胚绒膜尿囊膜移植瘤模型对比分析
- 2017年
- 目的通过比较三种不同癌细胞株在鸡胚绒毛尿囊膜(chick chorioallantoic membrane,CAM)上的生长情况,从中筛选最佳移植癌细胞株,建立移植瘤模型并观察生物学特性。方法分别将人肺癌A549株、舌鳞癌TCA8113株与人肝癌QGY7703株接种于7日龄鸡胚CAM上,对各自鸡胚成活率、瘤株成活、成瘤率和诱导血管生成情况等指标进行检测,并观察筛选移植瘤模型生长特性。结果与人肺癌A549株和肝癌QGY7703株接种组相比,舌鳞癌TCA8113株接种组成瘤率最高(P<0.05),为最佳移植癌细胞株,最佳接种癌细胞数量为8.0×106/个,接种后瘤体最佳生长周期为4~8 d,最佳实验时间为接种后第7天。结论筛选建立了舌鳞癌TCA-CAM移植瘤模型,为深入研究肿瘤生长生物学特性、血管生成机制、侵袭转移机制和筛选抗肿瘤药物提供了良好的实验动物模型。
- 费东亮胡影岳金金马鸣潇
- 关键词：鸡胚绒毛尿囊膜移植瘤A549细胞株TCA8113细胞株
- 鼓室内显微注射慢病毒转染小鼠耳蜗的技术改良被引量：1
- 2020年
- 目的改良经鼓室内显微注射慢病毒转染小鼠耳蜗的实验技术。方法将30只BALB/c小鼠随机分为3组:1μl/min组(12只)和20μl/min组(12只)小鼠经腹侧入路鼓室内分别以1μl/min和20μl/min的速度显微注射5μl的携带绿色荧光蛋白基因的慢病毒(LV3-GFP),人工外淋巴液组(6只)以1μl/min速度注入等量外淋巴液。于手术前、术后1、3、7天各组动物行听性脑干反应(ABR)测试后,进行耳蜗基底膜铺片荧光染色和耳蜗切片免疫荧光染色,并在激光共聚焦显微镜下观察慢病毒转染情况。结果各组小鼠术后1天ABR阈值均较术前明显升高(P<0.01),1μl/min组和人工外淋巴液组术后3天ABR阈值恢复正常,20μl/min组术后7天恢复正常。慢病毒转染后,1μl/min组术后1天在耳蜗毛细胞观察到慢病毒阳性表达,术后3天在耳蜗Corti器、螺旋神经节及血管纹处均可见阳性表达;术后1、3、7天耳蜗中回外毛细胞转染率平均为98.3%、98.1%和98.7%,而20μl/min组术后1天未见明显阳性表达,术后1、3、7天耳蜗中回外毛细胞的转染率分别为4.2%、20.2%和47.3%。结论鼓室内显微慢速注射法可将携带目的基因的慢病毒高效转染至耳蜗组织并表达。
- 赵若轩芦冬博梁瑞杨若函屈东昊林宇涵许涛刘双月王爱梅
- 关键词：慢病毒小鼠耳蜗显微注射
