北京三元基因工程有限公司
- 作品数:158 被引量:186H指数:6
- 相关作者:周敏毅程永庆徐晨牛晓霞牛春更多>>
- 相关机构:中国药科大学北京毕艾欧科技发展有限责任公司中国科学院研究生院更多>>
- 发文基金:北京市科技计划项目“重大新药创制”科技重大专项北京市科委基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学经济管理更多>>
- 干扰素α与地塞米松磷酸钠的雾化吸入剂
- 本发明属于抗病毒药物的组合物领域,涉及干扰素α与地塞米松磷酸钠的雾化吸入剂。所述的雾化吸入剂含有治疗有效量的干扰素α、地塞米松磷酸钠与适宜量的可药用辅料;优选单次给药剂量中含有2.5-30μg的干扰素α,1-4mg的地塞...
- 周敏毅刘金毅徐晨宋文进李洁程永庆
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- 干扰素α突变体及其聚乙二醇衍生物
- 通过将现有的IFN-α分子的第85或86位的Tyr替换成Cys获得了IFN-α突变体。也提供了它们的聚乙二醇衍生物,这些衍生物具有高的体外抗病毒活性和延长的体内半衰期,其中聚乙二醇分子共价结合于IFN-α突变体的游离Cy...
- 刘金毅牛晓霞周敏毅杨轶孙俭波程永庆
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- 一种表达苯丙氨酸解氨酶的乳酸乳球菌制品的制备方法
- 本发明属于生物医药领域,涉及表达苯丙氨酸解氨酶的乳酸乳球菌制品的制备方法,按顺序包括如下步骤:1)获得表达苯丙氨酸解氨酶的基因;2)将表达苯丙氨酸解氨酶的基因与适于转化乳酸乳球菌的表达载体相连接形成重组表达载体;3)将重...
- 牛春周敏毅刘金毅程永庆
- 一种重组人淋巴毒素α的构建与生产工艺
- 本发明的rhLT-α与天然分子相比,其N端缺失了27个氨基酸残基,本表明利用反转录PCR获得了目的基因序列,然后构建了高效重组表达载体,转化大肠杆菌获得高表达工程菌株,并建立了工程菌发酵、包涵体洗涤和复性、以及利用多种层...
- 刘永全牛晓霞刘金毅孙俭波程永庆
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- 干扰素α-2bHis^89/His^159的分子获得及性能分析被引量:1
- 2008年
- 目的:通过结构分析和定点突变,构建干扰素α-2bHis89/His159(IFNα-2bHis89/His159),以期获得高性能干扰素突变体。方法:采用PCR体外定点突变技术,使干扰素α-2b基因的第89位密码子由编码酪氨酸的TAC突变为编码组氨酸的CAC,第159位密码子由编码谷氨酸的GAA突变为编码组氨酸的CAC。将扩增片段克隆入pET23b表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)。表达的IFNα-2bHis89/His159经包涵体变性、复性、DEAE层析和CM层析纯化后,用WISH-VSV系统进行生物活性测定。以SD大鼠进行初步药代动力学研究。结果:IFNα-2bHis89/His159主要以包涵体形式表达,表达量占菌体总蛋白的40%以上。纯化后,IFNα-2bHis89/His159的纯度大于95%,比活性大于2.8×108IU/mg。相对于IFNα-2b较短的消除半衰期,IFNα-2bHis89/His159的消除半衰期得到延长,为2.34±0.27h。结论:构建了IFNα-2bHis89/His159的重组表达载体,并成功地在大肠杆菌中实现了高效表达,建立了IFNα-2bHis89/His159的纯化工艺,获得了体外活性增高并且体内稳定性得到改善的新型干扰素α-2b突变体。
- 王秀刘金毅牛晓霞孙玉军金颖彭秀娟王艳
- 关键词:干扰素突变体蛋白质纯化药物代谢动力学
- 干扰素α突变体及其聚乙二醇衍生物
- 本发明属于生物医药领域,涉及复合干扰素半胱氨酸突变体、其聚乙二醇衍生物,后者的制备方法、药物组合物和两者在制备治疗病毒性疾病的药物中的用途。所述的复合干扰素半胱氨酸突变体是将复合干扰素氨基酸序列中从N端计的第77位的氨基...
- 周敏毅刘金毅程永庆
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- 干扰素α与硫酸特布他林的雾化吸入剂
- 本发明属于抗病毒药物的组合物领域,涉及干扰素α与硫酸特布他林的雾化吸入剂。所述的雾化吸入剂含有治疗有效量的干扰素α、硫酸特布他林与适宜量的可药用辅料;优选单次给药剂量中含有2.5-30μg的干扰素α,0.5-2mg的硫酸...
- 周敏毅刘金毅徐晨宋文进李洁程永庆
- 蛋白质复性技术研究进展
- 2022年
- 在实验室和工业领域中,快速而廉价地制备目的蛋白的方法对于促进蛋白质科学和工程的研究至关重要。使用基于包涵体的蛋白质表达系统是一种经典的方法,在上游过程中可以获得高产量,但是在下游过程中未正确折叠的蛋白质复性过程通常会导致产量显著降低。最具挑战性的是,蛋白质的复性条件因构象不同各有差异,需要个体化的针对性研究进行反复试验来提高蛋白质终产量。因此,为了将这种麻烦的折叠过程转变为常规的折叠过程,基于新技术和新材料的各种方法应运而生。文章首先简略地概述蛋白质折叠,总结包涵体变性的不同方式,重点对在复性过程中的三种思路进行了综述,并就蛋白质复性方面已报道的热点描述了方法发展背后的概念,以期提供一种通用的复性研究思路。
- 邹一飞高向东林福玉刘金毅
- 关键词:蛋白质折叠包涵体复性
- 干扰素α与硫酸庆大霉素的雾化吸入剂
- 本发明属于抗病毒药物的组合物领域,涉及干扰素α与硫酸庆大霉素的雾化吸入剂。所述的雾化吸入剂含有治疗有效量的干扰素α、硫酸庆大霉素,以及适宜量的可药用辅料;优选单次给药剂量中含有1-30μg的干扰素α,0.5-15mg的硫...
- 周敏毅牛春刘金毅程永庆
- 文献传递
- 一种重组人可溶性凋亡素2配体的构建与纯化工艺
- 本发明涉及一种重组人可溶性凋亡素2配体(rhsApo-2L)的制备方法。rhsApo-2L与hsApo-2L相比,其分子N端多了12个氨基酸,其中包括6个组氨酸,以方便利用镍离子柱进行纯化。本发明利用RT-PCR技术,扩...
- 刘永全刘红燕牛晓霞
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