华南农业大学食品学院广东省高等学校食品质量安全重点实验室
- 作品数：132 被引量：777H指数：16
- 相关作者：罗林黄少文褚玥杨婕朱帆更多>>
- 相关机构：南方医科大学公共卫生与热带医学学院福建农林大学食品科学学院南方医科大学药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程医药卫生理学农业科学更多>>
- 基于CRISPR/Cas系统的纸基分析在快速检测食源性致病菌中的应用
- 2024年
- 由食源性致病菌引起的食品安全事件严重影响人类健康,开发针对食源性致病菌的快速检测技术十分必要。成簇间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)及相关蛋白(CRISPR-associated protein,Cas)是原核生物的适应性免疫系统,具有特异性识别并切割核酸序列的功能。纸基分析方法作为一种简便性好、成本低廉的分析检测工具,在快速检测领域展现出良好的前景。因此,将CRISPR/Cas系统的高效识别能力和纸基分析方法的简便性相结合可实现对食源性致病菌的快速灵敏检测。本文简要介绍了CRISPR/Cas系统用于核酸检测的概况,对第二类单Cas效应蛋白系统的特点及原理进行概述,重点综述基于CRISPR/Cas系统的试纸分析、侧向流动分析和纸基微流控装置在检测食源性致病菌方面的应用,并讨论了CRISPR/Cas系统结合纸基分析建立检测方法的优势、当前的挑战及未来的发展前景。
- 李鹏儒沈兴孟静南罗林王涓徐振林
- 关键词：食源性致病菌
- 呋喃唑酮代谢物单克隆抗体制备及酶联免疫吸附分析方法被引量：14
- 2012年
- 本研究针对呋喃唑酮代谢物(AOZ),设计合成了系列半抗原,进一步通过偶联牛血清白蛋白(BSA)免疫Balb/c小鼠、细胞融合、筛选和亚克隆等过程成功获得了源于新颖半抗原H3的具有高亲和力(亲和力常数6.68×1010 L/mol)和高特异性(与其它功能类似物交叉反应小于0.1%)抗AOZ单克隆抗体。同时,基于设计合成的系列同/异源半抗原/包被抗原,考察了不同结构包被原对ELISA方法灵敏度的影响。另外,采用最佳的特征结构异源包被原H5-OVA,建立了以对硝基苯甲醛(p-NP)为衍生剂的AOZ间接竞争ELISA(icELISA)和直接竞争ELISA(dcELISA)检测方法。结果表明:icELISA模式的AOZ检测IC50为0.503μg/L,定量检测线性范围(IC20～IC80)为0.06～14.0μg/L,检出限(IC10)达0.017μg/L;dcELISA模式的AOZ检测IC50为1.19μg/L,定量检测线性范围为0.14～23.6μg/L,检出限为0.056μg/L。两种方法对AOZ的检测灵敏度和定量线性范围均达到相关检测限量要求,可满足不同需求的实际样品检测。
- 任海涛沈玉栋徐振林杨金易雷红涛肖治理王弘孙远明
- 关键词：呋喃唑酮单克隆抗体酶联免疫法
- 畜禽肉及饲料中氟苯尼考残留免疫分析方法研究被引量：4
- 2021年
- 针对动物源性食品及饲料中氟苯尼考的残留问题,通过抗原制备、动物免疫和细胞融合筛选,成功得到可高特异性识别氟苯尼考的单克隆抗体,并建立了氟苯尼考的间接竞争酶联免疫分析(icELISA)方法。经单因素实验优化策略,确定最佳反应条件为:包被抗原质量浓度0.05μg/mL,抗体质量浓度为0.1μg/mL,最佳药物、抗体和二抗稀释液均为磷酸缓冲液(PBST),抗体稀释液吐温-20含量0.05%,竞争反应时间30 min,二抗质量浓度为0.167μg/mL,二抗反应时间30 min。在该条件下,建立了氟苯尼考的icELISA检测方法,其IC_(50)为9.48 ng/mL,线性检测范围为1.75~51.36 ng/mL,检出限(LOD)达0.64 ng/mL,且与氯霉素等结构及功能类似物均无明显交叉反应,特异性良好。实际样品的加标回收率为88.1%~107%,相对标准偏差(RSD)<15%。将所建立的方法用于畜禽肉及饲料样品的检测,结果与HPLC-MS/MS判定结果一致,说明该方法适用于畜禽产品及饲料中氟苯尼考的残留检测。
- 谢美婵杨金易李然肖治理王弘徐振林孙远明沈玉栋
- 关键词：氟苯尼考单克隆抗体免疫分析
- 酱油与白酒中邻苯二甲酸二甲酯的化学发光酶免疫分析方法研究被引量：6
- 2015年
- 本研究以邻苯二甲酸二甲酯（ DMP）为研究目标,以4-氨基邻苯二甲酸二甲酯为半抗原,通过重氮化法偶联载体蛋白并免疫动物,制备针对DMP的特异性兔多克隆抗体。通过棋盘滴定法和单因素实验确定最佳的实验参数,即包被原浓度为50μg/L,一抗浓度为92.5μg/L,二抗浓度为1μg/mL,药物稀释液为pH 6.0的纯水,竞争反应时间为40 min,基于此建立了间接竞争化学发光酶联免疫分析法检测DMP。本方法对DMP的检出限为0.29μg/L,线性检测范围为0.74-30.32μg/L,与13种结构和功能类似物的交叉反应率均〈5%,通过倍比稀释降低白酒、酱油样品基质干扰,对样品的平均回收率在80.2%-116.0%之间,平均相对标准偏差〈3.6%,结果与GC-MS法的测定结果相符。本方法适用于食品样品中DMP的快速检测。
- 朱彬朱帆徐振林杨金易柳春红孙远明王弘雷红涛沈玉栋
- 关键词：邻苯二甲酸二甲酯白酒酱油
- 化学发光酶免疫分析测定鱼肉中呋喃它酮代谢物方法研究被引量：16
- 2015年
- 建立了呋喃它酮代谢物5-吗啉甲基-3-氨基-2-唑烷基酮（AMOZ）间接竞争化学发光酶免疫分析（ic CLEIA）检测方法,通过单因素实验优化了包被原浓度、抗体稀释倍数、反应缓冲体系及浓度、竞争反应时间等参数,结果表明ic CLEIA最佳反应条件为：包被抗原浓度为10 ng/m L,抗体稀释60000倍,最佳竞争时间为50 min,体系缓冲液0.01 mol/L PBS（p H 7.4）。在优化的条件下,本方法的线性检测范围为0.026~3.52μg/L,IC50为0.29μg/L,检出限（LOD,IC10）为0.012μg/L。对鱼肉样品的平均添加回收率在101.4%~115.5%之间。建立的ic CLEIA方法可用于实际样品中AMOZ残留检测。
- 戴尽波徐振林刘凤银杨金易孙远明王弘雷红涛沈玉栋
- 关键词：多克隆抗体鱼肉
- 中链脂肪酸生酮饮食对大鼠神经行为和脂代谢的影响
- 2023年
- 热量限制饮食(CR)、含或不含中链脂肪酸(MCFAs)的生酮饮食(KD)喂养大鼠,测定大鼠体质量和脏器系数,以高架十字迷宫试验评价大鼠神经行为,以血清高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、甘油三酯(TG)、瘦素和内脂素评价大鼠脂代谢,研究不同饮食方式对大鼠的神经行为和脂代谢的影响。结果表明:中链脂肪酸生酮饮食可有效改善大鼠焦虑和抑郁相关行为;2种国产生酮粉显著下调大鼠血清LDL-C水平,中链脂肪酸生酮饮食与经典KD相比,显著上调大鼠血清HDL-C水平;不同的饮食方案均对瘦素水平均无显著影响,中链脂肪酸生酮饮食可显著下调内脂素水平。结果表明中链脂肪酸生酮饮食可改善大鼠神经行为并调节脂代谢。
- 肖雪蔓黄经纬刘焕胡婉明黎峰柳春红
- 关键词：生酮饮食热量限制神经行为脂代谢
- 消旋氧氟沙星抗体制备及其手性识别特性研究被引量：2
- 2011年
- 采用活泼酯法(A)和直接EDC(1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亚胺盐酸盐)法(D),合成两种包被抗原(OFL-A-OVA和OFL-D-OVA)和两种免疫抗原(OFL-A-BSA和OFL-D-BSA),然后分别用两种免疫抗原免疫小鼠获得与其对应的多克隆抗体,建立消旋氧氟沙星残留免疫检测方法。研究结果表明:紫外扫描图谱证明四种抗原均合成成功,OFL-A-BSA、OFL-D-BSA、OFL-A-OVA和OFL-D-OVA的偶联比分别为19.67、3.03、1.93和0.99。消旋氧氟沙星的间接竞争ELISA法的线性检测范围为16.35～444.10ng/mL,IC50为5.42ng/mL,最低检测限为6.23ng/mL。消旋氧氟沙星抗体与恩诺沙星、环丙沙星、加替沙星等其他同类药物的交叉反应率较低,表明消旋氧氟沙星抗体具有较高的特异性,且消旋氧氟沙星抗体对左旋氧氟沙星和右旋氧氟沙星的识别并非对等,对左旋的识别能力较大,左旋氧氟沙星对抗体的产生起主要作用。
- 王伟华雷红涛孙远明王利英王保玲
- 关键词：氧氟沙星人工抗原多克隆抗体手性识别
- 鱼用麻醉剂安全性研究进展被引量：46
- 2012年
- 鱼用麻醉剂能有效降低鱼类长途运输过程中的伤亡率,已在某些国家渔业生产中广泛应用,但其残留及安全性问题一直受到关注。目前有关鱼用麻醉剂的综述很少,为此本文对鱼用麻醉剂的类别、毒理学研究结果、麻醉剂在鱼体中积累与净化的影响因素等进行了综述,并对我国鱼用麻醉剂的使用和管理提出了部分建议。
- 吕书为雷红涛孙远明
- 关键词：毒理学
- 保健食品中添加地平类降压药急性毒性的3D-QSAR模型建立
- 2023年
- 该研究旨在通过建立三维定量构效关系(3-dimensional-quantitative structure-activity relationship,3D-QSAR)模型,探究1,4-二氢吡啶(1,4-dihydropyridines,1,4-DHPs)结构与急性毒性之间的构效关系以及引起急性毒性变化的可能机制。将11种1,4-DHPs三维结构和半数致死量(lethal dose,50%,LD_(50))值进行相应处理后,分别采用比较分子力场分析(comparative molecular field analysis,CoMFA)和比较分子相似性指数分析(comparative molecular similarity index analysis,CoMSIA)构建3D-QSAR模型;随后进行3D-QSAR模型内外部验证和应用域确定。结果显示:(1)CoMFA和CoMSIA模型的交叉验证系数(q^(2))分别为0.509和0.521,非交叉验证系数(R^(2))分别为0.988和0.989,对急性毒性的预测与试验相符合;(2)1,4-DHPs急性毒性变化主要受立体场、静电场、疏水场和氢键受体场影响,表现为在1,4-DHPs的吡啶3号位取代基上施加4种分子场,在吡啶5号位取代基上施加立体场和氢键受体场,在苯环取代基上施加立体场、静电场和疏水场均可影响1,4-DHPs的急性毒性变化。因此,该研究建立出具有较高预测能力的1,4-DHPs急性毒性3D-QSAR模型,不仅能为预测1,4-DHPs急性毒性提供技术支持,也可为新型1,4-DHPs类钙通道阻滞剂的设计提供思路。
- 黄卓权刘焕朱思俞韩文娜李中意柳春红
- 关键词：急性毒性三维定量构效关系
- 表面增强拉曼光谱技术在食品安全检测中的应用研究进展
- 表面增强拉曼光谱(SERS)是一种新型的快速检测技术,具有信息含量丰富、灵敏度高、操作简便、可无损检测等优点,在食品安全领域有很大的实际应用价值.该文介绍了表面增强拉曼光谱技术的发展历程、增强机理、基底的分类与应用以及检...
- 邹婷婷徐振林杨金易王弘孙远明沈玉栋
- 关键词：食品安全表面增强拉曼光谱
