中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业部新兽药工程重点开放实验室
- 作品数：766 被引量：2,991H指数：22
- 相关作者：夏文江孟聚诚周宗田张新国宋秉生更多>>
- 相关机构：甘肃农业大学动物医学院甘肃农业大学生命科学技术学院西北师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家科技支撑计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学化学工程更多>>
- 蕨麻多糖对小鼠淋巴细胞花生四烯酸代谢的影响被引量：1
- 2006年
- 目的:探讨蕨麻多糖(PAP)对小鼠脾淋巴细胞内花生四烯酸(AA)代谢产物的影响。方法:用放射免疫方法检测了血栓素B2(TXB2)和6-酮-前列腺素F1α(6-K-PGF1α)在细胞内的含量。结果:不同蕨麻多糖浓度组,6-K-PGF1α含量达到高峰的时间段各不相同;与对照组相比较,100μg/mlPAP组TXB2的含量明显偏低,而其它各组在同一时间段TXB2含量与多糖浓度呈剂量依赖关系;并且PGF1α/TXB2比值也随PAP浓度递增而升高。结论:PAP能调节小鼠脾淋巴细胞AA代谢水平和机体PGF1α/TXB2平衡状态,影响机体免疫机能。
- 程富胜胡庭俊张霞陈炅然孟聚诚高芳郑荣梁
- 关键词：TXB2
- 牛巴贝斯虫DXS基因的克隆和真核表达被引量：1
- 2014年
- 【目的】顶质体是存在于包括疟原虫和巴贝斯虫在内的顶复门寄生虫的一种细胞器,在病原体中,它主要承载类异戊二烯前体和脂肪酸合成途径,异戊二烯五碳结构是有机体合成多种化合物的结构基础,对有机体生命活动至关重要,例如,在哺乳动物中成为胆固醇和类固醇激素的基本结构,在植物中参与合成类胡萝卜素。且存在于顶质体的类异戊二烯前体合成途径对于病原体的生命活动至关重要且不存在于人类和哺乳动物机体,这使其成为近年来人们研究抗原虫药物的焦点。有学者发现利用特异性阻断类异戊二烯代谢途径的药物可治疗疟疾。1-脱氧-5-磷酸D-木酮糖合成酶(DXS)为该途径中的第一个限速酶。因此,针对牛巴贝斯虫的1-脱氧-5-磷酸D-木酮糖合成酶dxs基因进行克隆和序列分析,并对其进行真核表达和活性检测,以期获得具有活性的1-脱氧-5-磷酸D-木酮糖合成酶,为进行针对该酶的特异性抑制剂的筛选奠定基础。【方法】首先采用反转录PCR技术从牛巴贝斯虫陕县株总RNA中扩增出DXS基因的全长cDNA,并对其进行克隆测序,对测序结果进行序列分析,将阳性克隆亚克隆至带荧光标签的真核表达载体,利用脂质体转染法将重组真核表达质粒转染至Hela细胞,利用倒置荧光显微镜观察转染细胞的表达情况,消化收集转染细胞,通过超声破碎后采用Western blot技术对DXS蛋白的表达情况进行检测,结合G418压力筛选以及有限稀释的方法对转染阳性细胞进行筛选,获得阳性单克隆细胞。在体外建立DXS酶反应体系,并利用液相质谱联用技术对表达产物的体外活性进行检测。【结果】扩增得到的DXS基因全长共2 061 bp,共编码686个氨基酸,与GenBank上T2Bo株相应基因相似性达到98.0%。利用生物信息学方法对该蛋白质的二级结构进行分析发现,该酶具有3个结构域,分别是焦磷酸硫胺素结合区域;�
- 王婧李冰刘翠翠夏吉鹏张继瑜
- 关键词：真核表达
- 奶牛乳腺炎细胞模型的建立及中药治疗作用机制研究进展被引量：1
- 2021年
- 奶牛乳腺炎是奶牛最常见的疾病之一,可造成奶产量和质量下降,给奶牛养殖业造成巨大的经济损失。目前,对奶牛乳腺炎的治疗以抗生素为主,但由于抗生素的滥用,造成病原菌耐药及药物残留,给奶牛乳腺炎防控及公共卫生安全造成威胁。由于中药具有低毒、低残留、细菌不易产生耐药性及治疗效果明确等特点,近年来成为众多国内外学者研究的方向,尤其是以牛乳腺上皮细胞(bMEC)为模型开展的中药作用机制及作用靶点的研究已成为热点。文章对牛乳腺上皮细胞培养特性、乳腺炎炎症模型的建立、中药在干预细胞模型及作用靶点方面的最新进展、未来研究前景等方面进行了综述,以期为进一步深入研究中药治疗奶牛乳腺炎作用机制及筛选优良的中药方剂提供参考。
- 申纪饶武小虎张惠婷李新圃丁学智严作廷李宏胜
- 关键词：奶牛乳腺炎细胞模型中药干预
- 奶牛乳房炎传统疫苗的研究进展
- 奶牛乳房炎是奶牛最常发生疾病之一,它能引起牛奶质量和产量的降低,从而影响整个牛奶产业的经济利益.疫苗免疫被认为是预防奶牛乳房炎最为安全有效的方法,然而现存的奶牛乳房炎疫苗还存在很多问题.该文主要总结近期奶牛乳房炎疫苗及其...
- 刘龙海李新圃杨峰罗金印王旭荣张哲李宏胜
- 关键词：奶牛乳房炎发病机制疫苗设计免疫应答
- 文献传递
- 两种定值方法测定阿司匹林丁香酚酯对照品的含量被引量：3
- 2016年
- 目的：采用质量平衡法与核磁共振法,测定阿司匹林丁香酚酯（aspirin eugenol ester,AEE）对照品含量。方法：采用高相液相色谱测定纯度,采用干燥失质量法测定水分和挥发性物质,炽灼残渣测定无机盐杂质,根据质量平衡法计算AEE对照品含量。建立核磁共振定量测定AEE含量的方法,仪器温度25℃,扫描次数（NS）16次,弛豫延迟时间（Dl）15 s。结果：质量平衡法测定的AEE对照品含量为99.82%;核磁共振定值结果为99.55%,AEE和内标物（1,4-二硝基苯）峰面积的比值与质量比在3-21 mg范围内呈良好线性关系（R2=0.999）,日内精密度的RSD值为0.04%（n=5）,重复性的RSD值为0.19%（n=5）,稳定性测定的RSD值为0.57%。结论：2种方法相互验证,测定结果基本一致。
- 杨青青刘希望杨亚军李剑勇查飞
- 关键词：核磁共振法对照品
- 阿司匹林丁香酚酯抗脐内静脉内皮细胞氧化损伤的作用
- [目的]阿司匹林丁香酚酯(AEE)是将阿司匹林与丁香酚通过分子拼接技术合成的一种新的化合物。它不仅具有阿司匹林与丁香酚的抗氧化、抗血栓、降血脂等药理活性，还在一定程度上克服了长期低剂量服用阿司匹林带来胃肠道出血的副作用及...
- 黄美州杨亚军刘希望孔晓军李剑勇
- 两种固相萃取柱在乙酰氨基阿维菌素药动学前处理中的比较被引量：2
- 2018年
- 为评价乙酰氨基阿维菌素(EPR)药动学前处理中两种固相萃取(SPE)柱的净化、萃取效果,首先在空白胎牛血清中加入一定量的EPR标准溶液,经色谱甲醇提取后,分别经Agilent和Waters公司的C_(18) SPE柱对其进行萃取,再经N-甲基咪唑和三氟乙酸酐衍生化,最后用超高效液相色谱-荧光检测器进行测定;同时,将等量的EPR标准溶液进行衍生化,用超高效液相色谱-荧光检测器进行测定,将其结果作为对照;以绝对回收率作为评价两种SPE柱净化、萃取EPR效果的标准。结果显示,含有EPR的胎牛血清分别经Agilent和Waters公司的C_(18) SPE柱萃取后,两者的EPR峰形均尖锐对称且无明显杂质峰,但绝对回收率有差异,分别为94.50%和85.79%。结果表明,Agilent公司的C_(18) SPE柱对EPR的萃取效果更理想。
- 张振东刘希望马宁申栋帅李剑勇
- 关键词：固相萃取
- 清宫液2号质量标准的研究被引量：1
- 2010年
- 为了建立清宫液2号的质量标准,试验采用薄层色谱法（TLC）对清宫液2号中丹参、红花进行定性鉴别;采用高效液相色谱法（HPLC）测定丹参中主要有效成分隐丹参酮和丹参酮ⅡA的含量。结果表明：供试品薄层色谱中,在与丹参、红花对照药材相应的位置上,分别显示相同颜色的斑点;隐丹参酮检测浓度在7.384-36.92μg/mL范围内与峰面积积分值线性关系良好（r=0.999 5）,丹参酮ⅡA检测浓度在39.32-196.6μg/mL范围内与峰面积积分值线性关系良好（r=0.999 1）。说明建立的方法简便、快速、准确,可以用于清宫液2号的质量控制。
- 郭文柱杨国林梁纪兰谢家声严作廷李世宏王东升
- 关键词：高效液相色谱法薄层色谱法隐丹参酮
- 喹烯酮在猪组织中的残留研究被引量：19
- 2004年
- 目的 :建立起定量测定猪肝脏、肾脏、肌肉、脂肪食用组织中喹烯酮的高效液相色谱检测方法 ,依据测定的结果制定最高残留限量 ,定出其休药期。方法 :猪 45头 ,公母各半 ,按正常饲料添加喹烯酮 50 mg/ kg饲喂 2 .5月后 ,分别于4h、1 d、2 d、3 d、4d、6d、8d、1 2 d、1 5d采样。检测采用 Prodigy5μ Phenyl-3色谱分析柱 (4.6mm× 2 50 mm5μm icron) ,Waters TM486可变波长紫外检测器 ,甲醇 -水 (70∶ 3 0 )为流动相。组织样品用乙酸乙酯、乙腈、正已烷、氯仿等试剂提取处理纯化后进样 ,在 3 1 2 nm波长处检测 ,流速为 1 .0 m L·min- 1。结果 :标准曲线的线性范围为 :脂肪、肝脏 ,0 .0 0 5～ 0 .80 0μg· g- 1;肾脏、肌肉 ,0 .0 0 8～ 0 .0 80μg· g- 1。它们的复相关系数均大于 0 .99。精密度考察喹烯酮的日内各组织各浓度的 RSD(相对标准差 )均小于1 2 % ,日间测得各组织各浓度的 RSD均小于1 8.5%。喹烯酮在肌肉、脂肪、肾脏中均无残留 ,而在肝脏中的残留量也很小 ,4d以后再无残留。结论 :本试验测定方法灵敏度高 ,重复性好。停药后 4h所有可食用猪组织中喹烯酮浓度均低于计算所得的安全组织浓度 ,故该药在猪使用上无休药期 ,即休药期为零天。
- 李剑勇李金善徐忠赞赵荣材苗小楼张继瑜鲁润华
- 关键词：喹烯酮药物残留高效液相色谱饲料添加剂
- 黄霉素在畜牧养殖业中的应用被引量：7
- 2003年
- 张继瑜王连娣
- 关键词：黄霉素畜牧养殖业饲料添加剂
