中国农业科学院兰州兽医研究所农业部畜禽病毒学重点开放实验室
- 作品数：85 被引量：382H指数：12
- 相关作者：魏旭文孙士琪李冬吴旭刚更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学动物科技学院甘肃农业大学动物医学院石河子大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划国家社会公益研究专项计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 口蹄疫病毒感染细胞的研究进展被引量：11
- 2005年
- 口蹄疫是引起偶蹄动物的急性发热性水泡性疾病,具有高度接触传染性,对发病国家和地区经济有破坏性作用和不良的政治影响。口蹄疫病原体为小RNA病毒科的口蹄疫病毒,是一类单股正链RNA病毒,该病毒有多种血清型及其亚型,相互之间无交叉保护力或保护力极其有限。目前,口蹄疫病毒感染的分子机理还不是很清楚。口蹄疫病毒感染细胞的过程主要包括病毒与细胞的吸附、病毒穿透细胞壁进入细胞、病毒粒子的脱衣壳、病毒RNA的翻译转录、病毒基因组的复制以及病毒粒子的成熟过程,最后是成熟的病毒粒子衣壳包装成为完整病毒。文章就口蹄疫病毒感染细胞的过程做一概述。
- 沈小燕常惠芸丛国正刘永生王建华谢庆阁
- 关键词：口蹄疫病毒基因复制口蹄疫
- 口蹄疫多基因杆状病毒转移载体的构建
- 2004年
- 采用分步 PCR扩增连接的方法将口蹄疫病毒结构蛋白基因 P1 ,非结构蛋白基因 2 A、2 B、3 C蛋白酶和 3 D聚合酶按正确的读码框依次连接克隆入 p GEM-T载体。然后 ,将切取的目的基因亚克隆入杆状病毒转移载体 p Mel Bac B。构建成功的重组 p Mel Bac B/P1 2 X3 C3 D转移载体经测序鉴定 ,含有完整的目的基因表达盒 ,转移载体可与杆状病毒骨架载体进行昆虫 sf9细胞内同源重组 。
- 云涛冷青文郭慧琛刘在新张居农谢庆阁
- 关键词：口蹄疫基因工程疫苗
- 猪瘟病毒E2基因在Pichia pastoris中的表达及其免疫活性的初步研究被引量：12
- 2002年
- 将猪瘟病毒的E2基因克隆入酵母分泌型表达载体pPIC9K中 ,酶切线性化后电穿孔导入Pichiapastoris进行整合 ,经G418筛选得到高拷贝转化子 ,甲醇诱导表达。SDS PAGE和Westernblot结果证实了酵母培养上清液中含有E2蛋白。免疫活性研究证明P .
- 韩雪清刘湘涛张涌谢庆阁田波
- 关键词：猪瘟病毒E2基因毕赤酵母免疫活性
- 重组牛IFN-α对亚洲Ⅰ型口蹄疫亚单位疫苗免疫小鼠的影响被引量：1
- 2006年
- 在大肠杆菌BL21(DE3)中分别表达了牛IFN-α基因、亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒(FMDV)VP1和VP1 C末端基因,并纯化了所表达的蛋白。用透析的方法进行蛋白复性后制成油乳剂疫苗,经皮下多点注射免疫小鼠,以MTT法检测小鼠脾淋巴细胞经植物血凝素(PHA)刺激后的增殖反应活性;以液相阻断ELISA检测血清FMDV特异抗体的变化。结果表明,重组VP1(rVP1)和rVP1 C末端蛋白能单独诱发小鼠的体液免疫反应和微量的细胞免疫反应,而与重组牛IFN-α(rBoIFN-α)共同接种的小鼠,体液免疫反应和细胞免疫反应更为明显。
- 王光华独军政薛慧文李冬刘萍易华山常惠芸
- 关键词：口蹄疫病毒VP1基因佐剂
- A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达·纯化及活性检测(英文)被引量：4
- 2010年
- [目的]表达口蹄疫病毒结构蛋白VP1,并对其进行纯化和相关活性的检测。[方法]以A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1重组质粒pGEM-VP1为模板,用特异性表达引物扩增其编码区,经酶切后与pGEX-4T-1、pPROExHTb等原核表达载体相连,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS表达菌株,经IPTG诱导表达,以实现VP1蛋白的表达,SDS-PAGE鉴定融合蛋白的表达并对2种载体重组菌进行超声裂解,取上清和沉淀电泳,用金属螯合亲合层析法对His-VP1进行纯化。[结果]SDS-PAGE电泳分析显示pPRO-VP1诱导后目的条带为33Ku,与预期结果相符;目的蛋白纯化后,在电泳图片上显示较为清晰的单一条带;His-VP1可与A型口蹄疫病毒豚鼠灭活阳性血清发生特异性的反应。[结论]表达及纯化了具有高特异性的A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1,为深入研究结构蛋白VP1在口蹄疫病毒致病机制中的作用奠定了基础。
- 李菁林彤高闪电丛国正独军政邵军军常惠芸
- 关键词：A型口蹄疫病毒
- 偶蹄动物朊蛋白基因变异性和其系统发生关系分析被引量：2
- 2006年
- 目的为明了偶蹄动物PrP基因的结构特征及其变异与结构、功能和朊粒病传染种间屏障的关系以及系统发生关系;方法利用DNAstar和Clustalx程序及treev32软件进行了22种偶蹄动物的43个完整PrP基因序列的同源性分析、多重排比和进化树构建;结果不同种属偶蹄动物的PrP基因完整ORF大小有所差异,范围为768～795bp,可编码255～264个氨基酸的朊蛋白。核苷酸和氨基酸序列的同源性,偶蹄动物间≥88.6%和≥93.3%,反刍动物间≥95.4%和≥96.5%。共发现40个点突变和2个突变区。在N-端柔韧无序“尾”区(25～135)以八肽重复缺失为主,球形结构域区(136～241)以点突变为主,点突变主要簇聚在S1β-折叠前的柔韧无规卷曲区的C-端部分和HCα-螺旋内。氨基酸104～135区和球形结构域区存在有8个高突变位点。已知PrP肽基元和功能位点如芳烃回文序列基元、2个N-连接糖基化位点、2个苏氨酸磷酸化位点、1个酪氨酸硫化位点、形成二硫键的2个半胱氨酸以及GPI锚锚着点丝氨酸为偶蹄动物所共有,各种间变异体的各结构模式非常一致。进化关系分析,可将偶蹄动物PrP基因区分为3大类,反刍动物PrP基因分为3小类。令人意外的是,2个双峰驼PrP基因的进化关系与牛属动物基因同源。结论偶蹄动物的PrP基因是一个保守基因,氨基酸104～135区和球形结构域区内的8个高突变位点可能是影响分子间相互作用、形成朊粒病传染种间屏障的主要位点,物种间各氨基酸变异并不影响PrP的主要结构和功能。
- 吴润陈怀涛谢庆阁
- 关键词：偶蹄动物朊蛋白基因结构特征分子进化
- 羊传染病四季发病特点及其防制被引量：1
- 2012年
- 1四季羊发生传染病特点春暖花开的春季,"冬眠"的微生物开始复苏,圈养了整个冬天的羊离开羊舍出去活动,加上初春季节羊的膘情不理想,抵抗力相对较低,给羊传染病的发生和流行创造了极为便利的条件。尤其是冬季出生的羔羊,在春季断奶时,羔羊本身抵抗力弱加上断奶应激易发生传染病。因此春季必须高度重视羊传染病,做好免疫接种、药物预防和定期消毒等工作。夏季湿热的环境为羊传染病尤其是细菌性传染病的发生、传播和流行提供了有利条件。
- 张克山尚佑军逯忠新刘湘涛
- 关键词：断奶应激羊肠毒血症羊快疫羊口疮李氏杆菌病
- 中草药红茶菌的制备及其体内抗口蹄疫病毒活性被引量：8
- 2014年
- [目的]研究中草药红茶菌在动物体内对口蹄疫病毒复制的抑制作用。[方法]选取健康猪20头,喷雾和口服中草药红茶菌3 d后,进行O型口蹄疫毒株(猪O型O/China/99株鼠毒)攻毒试验;攻毒后,继续对猪群进行喷雾和口服给药,观察中草药红茶菌对攻毒猪的保护作用及体内抗口蹄疫病毒的作用。[结果]攻毒结果显示,低剂量给药猪3/5保护,中剂量给药猪1/5保护,高剂量给药猪0/5保护;在低剂量给药条件下,攻毒保护效果优于中剂量和高剂量;从攻毒后的第1天到第7天,陆续从试验猪全血中检测到口蹄疫病毒,其中中草药红茶菌高浓度预防组猪的口蹄疫病毒的复制水平最高,中剂量组较低,低剂量组复制水平最低。[结论]给药合适剂量的中草药红茶菌对猪体内的口蹄疫病毒具有一定的抑制作用。
- 符乃方吴俊才符启俊吕律何继军李开绵叶剑秋蒋盛军蒋小强邱红辉高李泽何萍谢峥嵘陈吉雄
- 关键词：口蹄疫病毒
- 猪囊尾蚴RNA聚合酶亚基基因的筛选及结构初探被引量：2
- 2004年
- 的 从构建的剪切引导序列 (SL)cDNA文库中筛选猪囊尾蚴相关基因。 方法 提取猪囊尾蚴总RNA ,利用SL特异序列和带有噬菌体M13M4的olig(dT)为引物 ,反转录成cDNA ,构建猪囊尾蚴SLcDNA文库。随机筛选并通过酶切、PCR鉴定阳性克隆 ,分析其同源性。 结果 鉴定出一 3 3 2bp的插入片段 ,含有 2 0 4bp的开放阅读框(ORF)和 3′端 2 0bp的polyA尾巴 ,经核苷酸和氨基酸序列分析 ,所克隆的基因的氨基酸序列与其他真核生物如人、秀丽隐杆线虫、果蝇及拟南芥等的RNA聚合酶亚基基因同源性均高达 71.6%以上。 结论 筛选鉴定的基因推测为猪囊尾蚴RNA聚合酶亚基基因 ,而且在不同物种间很保守。
- 骆学农郑亚东窦永喜侯俊琳景志忠才学鹏
- 关键词：囊尾蚴RNA聚合酶亚基基因噬菌体基因文库
- 猪囊尾蚴病病原入侵与免疫机理以及免疫预防研究进展被引量：3
- 2005年
- 猪囊尾蚴病是危害严重的人畜共患寄生虫病,其病原是复杂的真核生物,有猪带绦虫成虫、六钩蚴、囊尾蚴等多个发育阶段,在人猪之间循环感染寄生发育。目前国内外已在病原和宿主个体、细胞和分子水平上对猪囊尾蚴入侵与免疫、免疫与免疫逃避以及免疫预防等方面进行了大量的研究,初步明确了虫体的组成成分与结构形态以及发育形式,与病原入侵和免疫的关系,为免疫预防控制,特别是分子免疫预防奠定了坚实的基础。但要完全控制和消灭该病,要走的路还很长。
- 景志忠才学鹏
- 关键词：猪囊尾蚴病阶段发育免疫机理免疫预防
