武汉大学基础医学院病毒学国家重点实验室
- 作品数：29 被引量：51H指数：4
- 相关作者：郭淑芳梁科刘文惠周润宏高靖更多>>
- 相关机构：华中科技大学同济医学院南京医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系南京医科大学公共卫生学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 一种从血清标本中快速提取HBV DNA方法的建立被引量：15
- 2005年
- 目的:建立一种快速提取血清标本中HBVDNA的方法,即裂解液煮沸法。方法:以碱裂解法和经典的苯酚法为对照,比较3种方法提取的HBVDNA纯度和半巢式PCR后的阳性率。结果:用裂解液煮沸法提取的HBVDNA进行半巢式PCR的阳性率最高,与两种对照方法之间的差异有极显著意义(P<0.01)。结论:裂解液煮沸法是一种快速、简单、高效的提取血清中HBVDNA的方法。
- 郭龙华董长垣高婧郭淑芳陈晓刘文惠
- 关键词：乙型肝炎病毒DNA提取半巢式PCR
- 同时携带人血管内皮生长因子和血管生成素基因的内皮祖细胞血管再生研究
- 2007年
- 目的用腺相关病毒（adeno-associated virus,AAV）载体将人血管内皮生长因子165 （vascular endothelial growth factors,VEGF165）和血管生成素-1（angiopoietin-1,Angl）基因同时转入骨髓源性内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）中,观察外源基因的表达并评价其促血管再生的能力。方法用同时携带人VEGF165和Angl基因的AAV载体AAV2-hAngl/VEGF165转染体外培养的兔骨髓源EPCs,用RT-PCR和细胞免疫化学法检测外源基因的表达。实验用新西兰大白兔24只,制作成右下肢缺血模型,随机分成3组：PBS、EPC和EPC/AV组。造模后第10天,向缺血肌组织中分别注射PBS、EPCs和AAV2-hAngl/VEGF165转染的EPCs,用免疫组织化学法评价其血管再生效应。结果EPCs可高效地被AAV2-hAngl/VEGF165转染而表达Angl和VEGF165。细胞移植4周后,EPC/AV组存活的EPCs密度（283±137）/mm^-2明显高于EPC组（191±88）/mm^-2;EPC/AV组的毛细血管密度（856±212）/mm^-2明显高于EPC组（564±177/mm^-2）和PBS组（308±112）/mm^-2;α-SMA阳性血管密度（6.9±3.0）/mm^-2明显高于PBS组（3.6±1.8）/mm^-2,P〈0.05。结论AAV载体可同时将人VEGF165和Angl基因转入EPCs中,转染后的EPCs具有更强的促血管再生能力。
- 陈锋谭最董长垣谢友利吴云陈晓郭淑芳
- 关键词：血管内皮生长因子类血管生成素1腺相关病毒内皮祖细胞
- 腺相关病毒介导的血管内皮生长因子基因与内皮祖细胞联合治疗肢体缺血被引量：3
- 2007年
- 目的探讨腺相关病毒（AAV）介导的人血管内皮生长因子165（hVEGF165）基因转染的兔骨髓内皮祖细胞（EPCs）自体移植对于移植细胞存活率和缺血肢体血管再生的影响。方法构建、制备携带hVEGF165基因或β-半乳糖苷酶（β-gal）基因的AAV载体AAV-hVEGF165和AAV-LacZ；用AAV-hVEGF165和AAV-LacZ分别转染体外培养的EPCs，得到AAV／VEGF-EPC和AAV／LacZ-EPC，用RT-PCR、免疫细胞化学、流式细胞术检测外源基因的表达。分别用AAV／VEGF-EPC、AAV／LacZ-EPC和PBS自体移植于兔右下肢缺血的肌组织，28d后行双侧肢体血流和免疫组织化学检测。结果AAV／VEGF-EPC和AAV／LacZ-EPC内可检测到外源基因的表达。AAV／VEGF-EPC、AAV／LacZ-EPC和PBS组患／健侧血流比值、毛细血管密度分别为0．73±0．21、0.64±0．13、0．45±0．10；（962±291）、（557±132）、（361±69）／mm^2。AAV／VEGF-EPC和AAV／LacZ-EPC组移植成活的EPCs密度分别为（330±81）／mm^2和（204±55）／mm^2。结论AAV能够高效将外源基因转入EPCs，对其进行基因修饰。自体移植从V-hVEGF165酤转染的EPCs可提高其移植存活率和增强其促进缺血肢体血管再生能力。
- 陈锋谭最董长垣陈晓郭淑芳
- 关键词：腺相关病毒内皮细胞血管内皮生长因子缺血
- 人肝癌细胞感染蓝舌病毒HbC_3株超微结构的动态观察
- 2006年
- 目的 探讨蓝舌病毒靶向抗肿瘤的细胞生物学机制。方法 利用透射电镜观察蓝舌病毒HbC3株感染人肝癌细胞Hety-3B的形态发生学以及该病毒引起的细胞的病理改变。结果 BTV-HbC3以受体介导的胞饮作用穿入细胞，溶酶体水解病毒外衣壳，使之成为亚病毒粒子，胞浆内有病毒包涵体及未装配成熟的亚病毒颗粒。随后亚病毒颗粒装配上外层蛋白结构，形成成熟的病毒粒子。病毒感染细胞12～18h时，细胞以挤出的方式释放病毒并达到高峰。18-48h时，病毒进入超感染期，大量细胞发生病变，出现细胞凋亡和溶解。结论 一旦蓝舌病毒感染Hep-3B肿瘤细胞即可在细胞内增殖并诱导该肿瘤细胞进入凋亡，死亡的肿瘤细胞释放出的病毒粒子并再次感染其他肿瘤细胞，直至将全部肿瘤细胞杀灭，其溶瘤方式为链式反应。
- 汪艳雷森林郭淑芳易有荣董长垣
- SARS病毒N抗原的四种候选疫苗研究
- 为了研究防治SARS病毒感染新途径,我们构建了四种携带SARS病毒N抗原基因的候选疫苗:(1)表达N抗原的真核质粒DNA疫苗,(2)携带表达N抗原真核质粒的减毒伤寒杆菌疫苗,(3)携带表达N抗原原核质粒的减毒伤寒杆菌疫苗...
- 冯勇罗风玲章小联吴建国
- 文献传递
- TNFRSF4和TNFSF4基因多态性与HCV感染关系被引量：2
- 2020年
- 目的探讨肿瘤坏死因子受体超家族4(TNFRSF4)rs17568和肿瘤坏死因子超家族4(TNFSF4)rs3850641位点单核苷酸多态性(SNP)与丙型肝炎病毒(HCV)感染的关系,为丙型肝炎的筛查、诊断和预防提供临床依据。方法采用病例对照研究方法抽取2011年10月—2015年5月在江苏省9家医院治疗的肾透析患者、20个自然村的既往有偿献血者和南京市公安局强制戒毒所的静脉吸毒人群共2 960人,将其中1 269例HCV抗体阳性者和1 691名HCV抗体阴性者分别作为病例组和对照组,每人抽取5 mL空腹静脉血,采用TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR方法进行基因分型,并应用单因素和多因素logistic回归模型分析TNFRSF4 rs17568和TNFSF4 rs3850641位点基因多态性与HCV感染的关系。结果病例组TNFRSF4 rs17568 AA、AG和GG型基因型携带者分别占46.69%、43.05%和10.26%,对照组分别占44.87%、44.44%和10.68%;病例组TNFSF4 rs3850641 AA、AG和GG型基因型携带者分别占66.09%、30.53%和3.37%,对照组分别占71.89%、26.01%和2.09%;在调整了性别、年龄、是否谷丙转氨酶(ALT)异常、是否谷草转氨酶(AST)异常和感染途径后,多因素非条件logistic回归分析结果显示,与携带TNFSF4 rs3850641 AA基因型的个体相比,携带TNFSF4 rs3850641 AG/GG基因型的个体更易感染HCV(共显性模型:OR=1.251,95%CI=1.052~1.488,P=0.011;显性模型:OR=1.275,95%CI=1.077~1.509,P=0.005);携带rs3850641 G等位基因的数量越多,HCV的感染风险越大(相加模型:OR=1.251,95%CI=1.078~1.450,P=0.003);未发现TNFRSF4 rs17568位点基因多态性与HCV感染有相关性(均P> 0.05)。结论 TNFSF4 rs3850641基因多态性与HCV感染有关。
- 符祖强葛志军黄鹏汪春晖侯炜王炎张云岳明
- 男性不育症患者X染色体雄激素受体基因外显子1、3、4状态筛选研究被引量：1
- 2007年
- 目的研究雄激素受体（androgen receptor,AR）基因与特发无精症之间的关系。方法运用分子生物学方法分别检测35名无精症患者和20名对照组正常男性雄激素受体基因的3个功能区的DNA片段,结果实验组患者和正常男性AR外显子1中（CAG）n重复数在11~27之间,两组无显著差别,35例无精症患者用PCR扩增出雄激素受体外显子3（exon3）片段35例（100%）和外显子4（exon4）片段34例（97.15%）,20名正常已生育男性扩增出AR外显子3（exon3）片段20例（100%）和外显子4（exon4）片段20例（100%）。结论（CAG）n基因多态性与男性精子生成障碍无相关性,exon4缺失通过影响靶细胞核的类固醇激素-受体结合物数量在精子发生中的作用需进一步探讨。
- 魏魏董长垣刘军苗聪秀
- 关键词：男性不育症雄激素受体基因
- 蓝舌病毒具有理想的靶向抗癌潜能
- 众所周知，癌症是一类严重威胁人类生命、健康和社会发展的基因病。面对癌症，人类几乎是束手无策，人类正期盼着靶向抗癌治疗手段迅即问世。能选择性地杀死肿瘤细胞，而不损伤人体正常组织细胞的溶癌病毒(Oncolytic virus...
- 董长垣
- 关键词：抗癌治疗
- 蓝舌病毒湖北株(BTV-HbC3)靶向性抗小鼠乳腺癌MA-782研究
- 本研究在体内、体外对蓝舌病毒湖北株(BTV-HbC3)靶向性抗小鼠乳腺癌的作用进行了系统的研究。首先,建立起了小鼠正常乳腺上皮细胞培养系统;进而,在体外, 分别用BTV-HbC3感染正常的小鼠乳腺上皮细胞和小鼠乳腺癌MA...
- 代明梁科刘军胡俊张蔚英董长垣
- 关键词：凋亡
- 文献传递
- 直接抗病毒药物在丙型肝炎病毒及合并艾滋病病毒感染中的应用进展被引量：12
- 2016年
- 在过去几年中,抗丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)治疗药物的研发取得了突破性进展。大量基础和临床研究证实,针对病毒蛋白的直接抗病毒药物(direct-acting antivirals,DAAs)能有效治疗HCV感染,获得高达90%以上的持续病毒应答(sustained viral response,SVR)。然而,由于诸多因素的影响,HCV合并人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染的患者尚未得到有效的抗HCV治疗。在此将重点简述了DAAs的分类、作用机制及其临床试验效果;此外,还介绍了宿主靶向药物(host-targeting agents,HTAs)的研发情况,以及DAAs在HCV合并HIV患者中的临床应用进展。
- 刘航桂希恩霍文哲
- 关键词：抗病毒药HIV
