河北省生物研究所
- 作品数：190 被引量：770H指数：15
- 相关作者：籍宝霞李春生程华石万龙陈瑞勤更多>>
- 相关机构：河北工业大学河北师范大学河北农业大学更多>>
- 发文基金：河北省科技攻关计划河北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 巴斯德毕赤酵母表达系统的研究进展和前景展望被引量：21
- 2010年
- 巴斯德毕赤酵母经过近二十来年的发展,已经成为表达外源基因的优秀表达系统之一,成功地表达了许多重组异源蛋白。从表达菌株,表达载体等方面详细综述了毕赤酵母表达系统的优点,如:营养要求低、可高密度发酵、遗传稳定性高等;分析了可能影响巴斯德毕赤酵母表达系统的相关因素,这些因素包括外源基因的特性、基因拷贝数、产物稳定性及发酵策略等,结合这些因素和具体实践经验,就如何提高外源基因在巴斯德毕赤酵母中表达量进行了阐述;讨论了该表达系统存在的不足之处并且展望了其发展前景。
- 娄瑞娟罗利龙张霞张瑞刚宋水山
- 关键词：巴斯德毕赤酵母外源基因
- 大镰刀藓提取物对立枯丝核菌的抑菌性及理化性质研究被引量：2
- 2007年
- 以立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）为供试病原真菌，对大镰刀藓（Drepanocladus exannulatus）醇提液进行抑菌活性研究，结果表明，提取液抑菌活性在-20～80℃可以稳定存在，中性或弱碱性条件下最强，持效期随时间延长呈下降趋势；低温（4℃）与室温条件下保存，3个月内活性稳定。经定性分析，大镰刀藓提取液的主要有效成分为黄酮类化合物。
- 程辉彩赵建成
- 关键词：醇提液立枯丝核菌抑菌性
- 与纳豆激酶有亲和吸附特性的大豆蛋白性质研究
- 2012年
- 采用偶联纳豆激酶的Sepharose-4B作为吸附介质,用亲和层析技术从大豆蛋白中得到了与纳豆激酶具有亲和吸附作用的目的蛋白,采用变性电泳技术测得其分子量分别约为30.0和26.0 kDa;采用表面等离子共振技术测定了目的蛋白与纳豆激酶的亲和吸附,检测出此蛋白中含有与纳豆激酶偶联的结构,并且推测得出2种目的蛋白是11S(大豆球蛋白)的2个亚基对。
- 李希生史延茂田智斌董超
- 关键词：纳豆激酶大豆蛋白
- 生物信息学在抗原表位分析中的应用
- 闫静辉韩宪生程华吴萌徐绍珍韩放王鹏程煜成彬陈英珠张小兵李春生李亚璞籍保霞
- 一、任务来源：河北省科技支撑计划项目，名称：生物信息学在抗原表位分析中的应用研究，项目编号：072135165二、研究内容和结果根据合同要求，我们研制了一套“蛋白类抗原的B细胞表位预测软件”。1 软件组成该软件主要有4个...
- 关键词：
- 关键词：生物信息学抗原表位位点
- 甜菜夜蛾羧酸酯酶基因cDNA的克隆、表达及序列分析被引量：7
- 2008年
- 羧酸酯酶是昆虫体内重要的解毒酶系之一,与昆虫抗药性产生相关。利用粉纹夜蛾Trichoplusia ni(Hübner)肠粘蛋白多克隆抗体免疫筛选甜菜夜蛾Spodoptera exigua(Hübner)中肠cDNA表达文库,得到编码羧酸酯酶的全长cDNA克隆。该cDNA克隆全长1812bp(GenBank登录号EF580101),开放阅读框长1605bp,编码535个氨基酸。该蛋白活性中心包括3个氨基酸残基(催化三联体):Ser186,Glu319和His443,3个N-联糖基化位点,具备羧酸酯酶的结构特征,属羧酸酯酶家族(EC:3.1.1.-)。将该基因与pQE30载体重组,经IPTG诱导,spot-blot鉴定,蛋白获得了表达;以α-醋酸萘酯为底物,检测表达的羧酸酯酶活性为1.3nmol/100μL酶液。
- 张霞郭巍李国勋宋水山
- 关键词：甜菜夜蛾CDNA表达文库羧酸酯酶
- 甜菜夜蛾肠粘蛋白cDNA基因的分子克隆与序列分析被引量：14
- 2008年
- 【目的】围食膜(peritrophic membrane,PM)是衬托于昆虫中肠内的一种无脊椎动物特有的几丁质—蛋白复合结构,它能够促进食物消化,保护消化道免受微生物入侵。昆虫肠粘蛋白(ⅡM)是其重要组分之一。因此,作为中肠防御系统的PM已成为害虫生物防治的新靶标。分离和鉴定甜菜夜蛾肠粘蛋白基因cDNA。【方法】以甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)中肠为材料,依据stratagene公司试剂盒方法,构建甜菜夜蛾中肠cDNA表达文库。依据现代免疫学原理,利用粉纹夜蛾肠粘蛋白特异性多克隆抗体(anti-ⅡMantiserum)筛选该文库。【结果】cDNA表达文库滴度为8.51×106pfu/ml,重组率为99.97%。筛选文库得到一个编码甜菜夜蛾肠粘蛋白的cDNA克隆SeⅡM-8。核酸序列分析显示,该cDNA长为2234bp,在polyA末端上游24bp处有一个多聚腺苷酸信号序列AAATTA。最长读码框(ORF)编码714个氨基酸,与粘虫肠粘蛋白(Mamestra configurata intestinal mucin)序列相似性为42%。结构域分析表明,它具有5个几丁质结合功能域;一个富含苏氨酸类粘蛋白结构域,重复序列为TTTQAPTTT,高度O-联糖基化;一个天冬氨酸富集区,序列DDDKPGCNGNCPE重复达12次,该区域在已知的昆虫肠粘蛋白中属首次发现。与已知肠粘蛋白比较,推测其5′端还应包括信号肽序列和几丁质结合功能域的未知序列。SeⅡM-8基因在GenBank登录号为EU047712。【结论】从本研究构建的高质量甜菜夜蛾中肠cDNA表达文库中筛选得到一个新的围食膜蛋白基因SeⅡM-8。
- 张霞李国勋郭巍
- 关键词：甜菜夜蛾中肠CDNA表达文库
- 哈茨木霉突变体T-DNA插入位点侧翼序列的克隆及其插入序列分析被引量：2
- 2010年
- 利用分子生物学技术扩增T-DNA插入突变体中T-DNA侧翼未知序列是克隆突变相关基因、研究T-DNA整合方式的基础,TAIL-PCR是扩增已知序列侧翼未知序列的有效方法,本研究根据哈茨木霉的基因组特点,引用和设计了12条随机AD引物,用这些引物分别与3条右边界嵌套特异引物进行组合对哈茨木霉突变子的T-DNA侧翼未知序列进行扩增,发现不同的随机引物的扩增效率差异很大,以AD5的扩增效率最高,能扩增出80%的T-DNA插入位点的侧翼序列。随机挑取哈茨木霉T-DNA插入突变子52个,选用引物AD5对T-DNA插入位点的侧翼序列进行TAIL-PCR扩增并分析扩增序列发现,在获得的42条侧翼序列中7条只含有质粒序列、33条对应着单一的侧翼序列T-DNA、另外2条序列相同。34条T-DNA侧翼边界序列中13条保存着完整的右边界序列,21条T-DNA边界序列存在一定程度的缺失现象,说明农杆菌转化哈茨木霉的过程中T-DNA右边界存在一定程度的剪切。该研究的进行对明确农杆菌介导的木霉遗传转化过程中T-DNA的整合方式具有一定意义,为研究农杆菌转化木霉的机理奠定了实验基础。研究也精细确定了33个不同突变株的T-DNA插入位置,为后续的基因功能研究奠定基础。
- 黄亚丽蒋细良田云龙朱昌雄
- 关键词：木霉T-DNA插入突变体TAIL-PCR
- 限制性酶介导整合技术在盘基网柄菌的应用
- 2007年
- 1前言
突变分析技术在许多功能基因的分离和表达中起着关键的作用，前人已经利用电离辐射、紫外诱变、PCR和转座子等技术对许多模式生物进行了随机突变研究。分离具有特殊细胞分化功能的基因需要建立大群体的随机突变体库．但是用传统方法产生的随机突变体的鉴定与突变表型相关基因的分离过程非常复杂，涉及基因杂交、染色体定位、cDNA文库的筛选等．
- 黄亚丽霍炜洁朱昌雄
- 关键词：整合技术盘基网柄菌介导随机突变CDNA文库功能基因
- 普通生酮基古龙酸菌S_2基因文库的构建和筛选
- 2008年
- 在Vc生产的第2步发酵中,普通生酮基古龙酸菌S2能利用醇醛脱氢酶,将L-山梨糖转化为Vc的前体2-酮基-L-古龙酸(2-KLG).对普通生酮基古龙酸菌S2基因组DNA进行部分酶切,与黏粒载体pKC505连接后,用包装蛋白进行包装,转染大肠杆菌DH5α,构建成普通生酮基古龙酸菌S2基因组文库,得到12 000余个转化子.再利用纯化的醇醛脱氢酶免疫家兔制备出合格抗血清,应用免疫酶斑点技术(Dot-ELISA)对文库进行筛选,获得1个阳性克隆K719#.通过检测此基因工程菌的活性,表明在添加辅酶PQQ后,K719#具有使L-山梨糖转化为2-KLG的功能,从而使醇醛脱氢酶在大肠杆菌中得到了表达,这为简化Vc的生产工艺奠定了基础.
- 谢莉窦燕峰张铎张丽萍赵宝华
- 关键词：文库筛选
- 肝癌标志物抗体制备及其特异性分析
- 闫静辉吴萌程华陈英珠贾英新张小兵等
- 该项目通过对人血清的检测结果综合判断，能够准确的诊断是否得肿瘤及肿瘤的类型。恶性肿瘤的确诊及预后工作将对提高肿瘤患者的生存质量及总体治疗效果评价具有重大意义。盐析与疏水电荷诱导层析相结合快速纯化抗AFP、GPC3单克隆抗...
- 关键词：
- 关键词：肝癌恶性肿瘤诊断
