首都医科大学基础医学院神经科学研究所
- 作品数：370 被引量：1,204H指数：14
- 相关作者：王元身田竟生刘丙方余爽姜传涛更多>>
- 相关机构：清华大学材料科学与工程系中国人民解放军第一军医大学第二附属医院华北煤炭医学院基础医学部更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 植入PHPMA水凝胶对脑损伤后胶质瘢痕形成的抑制性影响被引量：4
- 2003年
- 人工合成 PHPMA水凝胶材料。利用此材料修补急性损伤的大鼠脑皮质缺损区 ,评价其对创伤后胶质瘢痕形成的影响以及在神经组织再生中的作用。合成的水凝胶材料经检测分析性状后植入预先造成的大脑皮质空腔内 ,4周以后灌注取脑 ,观察植入材料和周围组织整合结果以及星形胶质细胞在材料周围和内部的浸润状况 ,确定有无胶质瘢痕的形成 ,并进行超微结构分析。结果表明 ,植入材料可和周围组织良好整合 ,二者交界处细胞分布弥散 ,星形胶质细胞无过度聚集现象 ;植入材料内部有轴突样结构生长和血管发生。本研究结果提示 ,利用 PHPMA水凝胶填补脑损伤后的空洞可抑制胶质瘢痕的形成 ,有利于损伤部位神经组织的再生。
- 侯少平姬曼范昱玮孙晓红崔福斋徐群渊
- 关键词：胶质瘢痕神经再生脑损伤
- 小鼠Y染色体RNA探针的标记和应用被引量：5
- 2004年
- 目的 标记小鼠Y染色体RNA探针 ,检验该探针在检测外周血涂片和脑组织切片Y染色体阳性细胞的效率。 方法 以小鼠Y染色体重复序列pY35 3/BcDNA为模板标记RNA探针。以雌性小鼠为对照 ,用原位杂交法检测小鼠外周血涂片Y染色体阳性细胞 ;用荧光原位杂交法检测雄性小鼠脑组织切片Y染色体阳性细胞。 结果 Y染色体原位杂交法在外周血涂片Y染色体阳性的检测灵敏度和特异度均为 1 0 0 %,在脑切片检测Y染色体阳性细胞的灵敏度和特异度分别为 85 6 7%和 1 0 0 %。
- 邹西峰苏玉金鲁玲玲杨慧李铁林徐群渊
- 关键词：Y染色体原位杂交荧光原位杂交小鼠
- 脑衰蛋白反应调节蛋白-2参与低氧预适应减轻小鼠脑缺血损伤被引量：4
- 2009年
- 目的研究参与低氧预适应(HPC)的经典型蛋白激酶CβⅡ(cPKCβⅡ)相互作用的脑衰蛋白反应调节蛋白-2(CRMP-2)对缺血脑是否有保护作用。方法成年雄性BALB/c小鼠随机分为常氧(Nor)、HPC、常氧假手术(Nor+sham)、HPC假手术(HPC+sham)、常氧缺血(Nor+I)和HPC缺血(HPC+I)等6组(每组n=6)。应用小鼠整体HPC和脑中动脉梗死(MCAO)致脑局部缺血模型,结合免疫沉淀、双向凝胶电泳和质谱等技术,分离和鉴定与cPKCβⅡ相互作用蛋白;利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白印迹(Western blot)技术,分析CRMP-2磷酸化和蛋白降解水平在脑HPC和缺血中的变化。结果与Nor组比,HPC鼠脑皮层组织内有10种与cPKCβⅡ相互作用蛋白的表达发生了明显变化,其中CRMP-2在膜相关蛋白组分中的表达量升高,而在胞质蛋白组分中的表达量降低。在脑缺血模型中,与Nor+Sham组相比,Nor+I组小鼠脑皮层缺血核心区(Ic)CRMP-2磷酸化水平明显降低(P<0.05,n=6);与Nor+I组相比,HPC+I组小鼠脑皮层Ic区内CRMP-2磷酸化水平明显增高(P<0.05,n=6)。脑缺血可导致CRMP-2发生水解并伴随着大量55ku水解片段(BDP)的出现,但与Nor+I组相比,HPC+I组小鼠脑皮层缺血半影区(P)内CRMP-2水解片段减少,水解率明显降低(P<0.05,n=6)。结论CRMP-2参与了HPC缓解小鼠脑缺血Ic区内CRMP-2磷酸化水平的降低和减少P区内CRMP-2水解片段从而减轻缺血脑组织的损伤。
- 张彩艳封素娟刘旭卜祥宁张楠郑雅欣袁晓文李晓光李俊发
- 关键词：低氧预适应大脑中动脉阻塞
- 人GALR1启动子的克隆与初步功能分析
- 目的甘丙肽受体GalR1广泛分布于中枢和外周神经系统中,参与饮食、睡眠和学习等多种生理调节过程,但到目前为止,该基因的调控机制并不清楚。本研究的目的主要是探讨GalR1基因的调控机制,为该基因的表达机理提供资料。方法利用...
- 李杰杨予涛徐志卿
- 关键词：启动子
- 文献传递
- 免疫磁珠分选两步法纯化原代小胶质细胞被引量：2
- 2012年
- 目的神经系统感染研究需获得纯度高、细胞生物学状态接近体内的小胶质细胞。既往分离纯化方法不能满足研究需要,需建立新的高效纯化方法。方法获得小鼠全脑单细胞悬液后,应用磁珠分选阳选法,经过两步分选获得小胶质细胞。用流式细胞仪检测小胶质细胞的纯度,瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态,采用7-AAD染色鉴定分选后细胞的活性。结果应用免疫磁珠分选一步法可以获得纯度达(59.98±13.61)%的小胶质细胞;两步法进一步将细胞纯度提高至(97.62±1.35)%。该方法所获得的小胶质细胞活性良好,形态正常。结论免疫磁珠分选两步法能够稳定地获得高纯度的小胶质细胞,对小胶质细胞的活性和形态无显著影响,可用于后续中枢神经系统急性感染的体外研究。
- 孙珊珊王蓓蓓鞠莉莉曾辉徐群渊
- 关键词：小胶质细胞磁珠分选
- 人类神经胶质细胞源神经营养因子的基因克隆与表达被引量：2
- 1997年
- 目的获得能表达有生物学活性的成熟蛋白的人类神经胶质细胞源神经营养因子（ｇｌｉａｌｃｅｌｌｉｎｅｄｅｒｉｖｅｄｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ，ＧＤＮＦ）基因片段。方法分离神经胶质细胞瘤的ｍＲＮＡ，逆转录，采用ＰＣＲ技术，获得ＧＤＮＦ基因片段，将其组装入高效表达载体ｐＢＶ２２０中，表达、分离表达产物。测定其对鸡胚背根神经节的神经营养作用。结果ＰＣＲ后获得４０２ｂｐ的ＧＤＮＦ编码成熟蛋白基因片段，测序结果表明：第４２４碱基由Ａ变为Ｇ。将此片段组装入原核表达载体后，在菌体可溶性蛋白中获得有生物学活性的ＧＤＮＦ。１０００ｍｌ培养液可获４ｍｇＧＤＮＦ粗制品，５０ｎｇ粗制品可促进鸡胚背根神经节生长。结论获得了ＧＤＮＦ基因片段，并使其在原核表达系统中表达。在菌体可溶性蛋白组分中获得了具有促进鸡胚背根神经节生长的ＧＤＮＦ成熟蛋白。
- 张澄波陈惠徐建兰徐群渊
- 关键词：神经胶质细胞神经生长因子克隆
- 甘丙肽抑制大鼠垂体腺瘤细胞体外侵袭性被引量：2
- 2011年
- 目的探讨甘丙肽对大鼠垂体腺瘤细胞侵袭性的作用及其受体机制。方法提取大鼠垂体腺瘤GH3细胞RNA,反转录后测定甘丙肽及其3个受体亚型的表达情况;将大鼠垂体腺瘤GH3细胞分为对照组、甘丙肽药物处理组和选择性甘丙肽2型受体激动剂AR-M1896组,利用MTT方法检测对照组和实验组在给药后12、24和36 h各分组细胞活力,观察其增殖情况;应用Transwell侵袭模型观察各组腺瘤细胞侵袭能力。结果甘丙肽与其3个受体亚型在大鼠垂体腺瘤GH3细胞中均有表达,其中以受体2表达量较高;各组细胞在药物处理12、24和36 h时细胞增殖无显著差异;GH3细胞Transwell侵袭实验中甘丙肽药物组侵袭细胞数量明显少于对照组(P<0.01);甘丙肽受体激动剂AR-M1896组与对照组相比腺瘤细胞侵袭性明显降低(P<0.05);AR-M1896与甘丙肽对GH3细胞的抑制效果差异无显著性。结论甘丙肽能明显抑制大鼠垂体腺瘤细胞的侵袭性,且此作用可能主要由甘丙肽2型受体介导。
- 马克乾孙静李杰闫竹青鲁润春贾旺徐志卿
- 关键词：脑垂体腺瘤侵袭性甘丙肽GH3细胞
- 指导七年制医学生撰写科研论文的体会被引量：4
- 2008年
- 在指导七年制本科生的实践中,发现他们在论文书写过程中普遍存在问题,因此,本文将结合他们书写中出现的问题,谈谈医学科学论文书写过程中应注意的一些细节和问题。希望能够对初次写作的医学生有所帮助.
- 鲁玲玲杨慧
- SH-SY5Y细胞α-突触核蛋白的过表达可部分抵抗鱼藤酮诱导的氧化应激被引量：5
- 2006年
- 帕金森病(Parkinson’sdisease,PD)的发病机制涉及到遗传和环境因素。环境因素通过线粒体导致氧化应激和α-突触核蛋白(α-synuclein)聚集,但其确切的作用机制尚不明确。本文利用过表达α-突触核蛋白-增强型绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)的人多巴胺能神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y为模型,研究α-突触核蛋白对鱼藤酮诱导氧化应激的影响,从而进一步了解α-突触核蛋白和细胞存活之间的关系。(1)用荧光显微镜观察融合绿色荧光蛋白的α-突触核蛋白的表达情况;(2)用实时定量PCR检测α-突触核蛋白基因的表达;(3)用免疫细胞化学测定α-突触核蛋白的分布;(4)用不同浓度的鱼藤酮作用细胞后,以MTT法测细胞的活力、DCF法检测细胞的氧化应激状态、黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶的活力,并用流式细胞仪分析细胞的凋亡。实时定量PCR结果显示,α-突触核蛋白基因表达量在α-突触核蛋白过表达的细胞要高于SH-SY5Y细胞,在荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白和α-突触核蛋白的表达。鱼藤酮使细胞活力下降、线粒体complexⅠ的活性降低,诱导细胞内氧化应激,而过表达α-突触核蛋白的细胞可以部分抵抗鱼藤酮的毒性作用,表现为细胞抗氧化能力迅速增高(P<0.05)和鱼藤酮诱导的细胞凋亡数目明显降低。本研究证明α-突触核蛋白对鱼藤酮产生的氧化应激有部分抵抗作用,而使过表达α-突触核蛋白的SH-SY5Y细胞对鱼藤酮的毒性作用表现出一定的耐受性。这种耐受性也可能是细胞对外界损害的一种代偿反应,从而促进细胞的存活。
- 刘延英赵焕英赵春礼段春礼鲁玲玲杨慧
- 关键词：Α-突触核蛋白氧化应激鱼藤酮帕金森病
- 农药鱼藤酮对表达α-突触核蛋白细胞的作用被引量：12
- 2004年
- 本研究利用农药鱼藤酮作用于神经细胞 ,观察鱼藤酮对神经细胞的损伤作用以及线粒体功能障碍与α synuclein积聚之间的关系。方法 :本实验选用人神经母细胞瘤细胞株SH SY5Y ,实验组为α synuclein GFP基因转染的细胞 ,鱼藤酮处理的转基因细胞和非转基因细胞 ,对照组为未处理的SH SY5Y细胞。通过RT PCR检测α synuclein基因转染细胞的基因表达情况。荧光显微镜观察细胞内α synuclein GFP表达产物绿色荧光蛋白。MTT法检测各组细胞活性。DCF检测细胞氧应激。HE染色、免疫组化检测α synuclein在细胞中的状态。电镜观察细胞超微结构的改变。结果 :RT PCR显示转基因细胞α synuclein基因的表达。荧光显微镜观察显示细胞浆内可见绿色荧光蛋白 ,绿色荧光分布不均匀 ,可见蛋白积聚。MTT检测结果显示 ,与对照组相比 ,鱼藤酮处理的细胞增殖速度明显减小 (P <0 0 1 )。鱼藤酮的浓度为 75nmol L、1 0 0nmol L时 ,未转基因与转基因的细胞活性相比较 ,前者的细胞活性低于后者 (P <0 0 5 )。HE染色 ,鱼藤酮处理的转基因细胞胞浆减少、转基因细胞胞浆内也可见自噬体。胞浆内有嗜酸性包涵体样结构。免疫组化可见鱼藤酮处理高表达α synuclein细胞明显变成梭形并有很长的突起。电镜显示鱼藤酮处理的细胞线粒体肿胀 。
- 珠帕尔.木拉提杨慧蔡青赵春礼梁源赵焕英胡宇
- 关键词：Α-SYNUCLEIN胞浆转基因细胞鱼藤酮农药非转基因
