华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室
- 作品数：2,131 被引量：7,885H指数：30
- 相关作者：谭文松李元广钱江潮马兴元李素霞更多>>
- 相关机构：中国科学院上海有机化学研究所中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所福州大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学化学工程医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 重组羧肽酶原B的体外复性及羧肽酶B的纯化研究
- 为了获得活性羧肽酶B,本文利用稀释复性和凝胶层析复性两种方法对羧肽酶B的包涵体进行了复性研究.发现在最终蛋白浓度相同的情况下,凝胶柱复性要优于稀释复性.复性后的蛋白质经过胰蛋白酶酶解后,经DEAE离子交换柱进一步纯化,得...
- 张晓彦袁勤生
- 关键词：羧肽酶B包涵体稀释复性
- 文献传递
- 金属螯合亲和层析分离纯化重组人锰超氧化物歧化酶被引量：3
- 2002年
- 以金属铜螯合的亲和层析方法分离纯化重组人锰超氧化物歧化酶,采用3种不同的洗脱方法都可以对重组酶进行分离纯化.但是通过鉴别比较,采用方法1即逐步降低洗脱液的pH和固定洗脱液的NH+4的浓度可以获得较好的结果,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳得到一条分子质量约为22000u的蛋白条带,证明所得到的为纯度较高的重组人锰超氧化物歧化酶（rhMn-SOD）。
- 廖晓全张艳红袁勤生
- 关键词：重组人锰超氧化物歧化酶金属螯合亲和层析洗脱纯化
- 促甲基化因子对西索米星发酵的影响被引量：7
- 2006年
- 研究发现，发酵培养基中添加2．0—3．0g,／L蛋氨酸或7．5—10．0mg,／L氯化钴可明显促进西索米星的合成。蛋氨酸的添加时机和添加方式对西索米星产物合成的作用明显不同。在产物合成中前期（30-48h）添加蛋氨酸的效果最佳。当发酵液中蛋氨酸初始浓度为0．656g／L时，与在产物合成初期一次性添加相比，1．5g／L蛋氨酸在产物合成初期、中期和后期均分成3次添加的效果更优，当发酵至91h结束时，发酵液中西索米星浓度可达0．70g／L。
- 陈剑锋王航张元兴郭养浩陈浩
- 关键词：西索米星蛋氨酸氯化钴发酵甲基化
- 环境及有机添加剂对难浸金精矿细菌氧化的影响
- 2011年
- 以菌体的生长和生物氧化活性为指标,对酸性氧化亚铁硫杆菌氧化难浸金精矿过程中pH值和温度及有机添加剂的影响进行了研究。结果表明:当pH值为1.1～2.0,温度为41℃左右时菌体的比生长速率最大;当pH值为1.1～1.4,温度为41～44℃时,菌体比氧化速率最大。少量添加蛋白胨可使矿物氧化速率从0.41±0.02g/(L.d)提高为0.92±0.05 g/(L.d);少量半胱氨酸的加入可使矿物氧化速率从0.41±0.02 g/(L.d)提高为0.57±0.03 g/(L.d);两者的最佳添加浓度分别为10-3g/mL和6.4×10-5mol/L,最佳添加时间均为细菌生长进入指数生长期之前。
- 梅艳巧张旭张旭谭文松李春强
- 关键词：难浸金精矿细菌氧化生物冶金
- 运用组学技术研究冶金微生物及其微生物组
- 生物浸出技术与微生物组学技术的结合为生物冶金领域开拓了一个新的研究方向.本文首先简要阐述了冶金微生物和组学的基本概念和特征,重点介绍了人们利用基因组学、转录组学、蛋白组学方法研究冶金微生物技术的现状.研究结果表明:运用组...
- 陈广麟张旭朱明龙谭文松
- 关键词：生物冶金生物浸出
- 重组人锰超氧化物歧化酶(rhMn-SOD)与肿瘤相关性的初步研究
- 作者将纯化后的重组人锰超氧化物歧化酶直接加入到体外培养的肿瘤细胞培养基中,观察其对肿瘤细胞生长的抑制作用,探讨其治疗肿瘤的临床应用.
- 张艳红廖晓全袁勤生刘新垣
- 关键词：锰超氧化物歧化酶肿瘤细胞抗肿瘤活性临床药理
- 文献传递
- 黄杆菌肝素酶I基因的克隆与表达
- 2008年
- 目的克隆并表达黄杆菌肝素酶I(HepI)基因。方法通过PCR从黄杆菌基因组DNA中扩增黄杆菌HepI基因,验证后插入到表达质粒pET-22b中构建表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)进行蛋白质表达,并用Azure A法测定酶活性。结果PCR扩增得到序列正确的HepI基因,并将该基因成功插入到pET-22b表达载体中。重组质粒转入E.coli BL21(DE3)后表达的蛋白质经SDS-PAGE分析,与目的蛋白质的相对分子质量基本一致,其活性约为50 U/LA600。结论克隆并成功表达了黄杆菌HepI基因。
- 傅文彬熊可强阚梦元赵健李素霞姬胜利袁勤生
- 关键词：克隆基因表达酶活性
- 固定床生物反应器中慢病毒生产工艺的优化
- 2024年
- 慢病毒载体能将外源基因稳定整合至多种细胞的基因组,在基因治疗领域中具有广泛应用。固定床反应器可规模化培养贴壁细胞并通过质粒瞬时转染的方式生产慢病毒,但其慢病毒产量受到各种操作参数的影响。本研究对慢病毒生产过程中质粒转染条件和细胞培养参数进行优化,并在国产固定床反应器中验证了优化后的工艺。结果表明,在质粒转染过程中,当PEI与DNA混合时质量比在2:1及以上、转染时的DNA浓度等于或高于2μg/mL、转染6 h及以上时可显著提高质粒转染效率;而混合时的DNA浓度和混合时间对转染效率的影响较小,其主要影响外源基因在细胞中的表达。在HEK293T细胞培养中,在5.0×10^(4)cells/cm^(2)的高接种密度下细胞在固定床载体表面均匀分布并较快进入指数生长期;而转染时过高或过低的细胞密度均不利于慢病毒生产,当细胞密度为1.0×10^(6) cells/cm^(2)时,可获得较高的慢病毒滴度。采用上述优化的工艺条件,在表面积为2.0 m2的国产固定床反应器中收获的慢病毒产量达2.4×10^(10)TU。本研究结果为建立基于固定床反应器的慢病毒载体高效生产工艺提供数据支撑。
- 陶思然程俊曹磊周燕谭文松
- 关键词：固定床生物反应器慢病毒
- 人绒毛膜促性腺激素α亚基cDNA克隆、表达及纯化被引量：2
- 2003年
- 目的 从人绒毛膜组织中克隆人绒毛膜促性腺激素α亚基 (HCGα)cDNA ,构建表达载体并进行了表达、纯化 ,为进一步研究HCGα在多种肿瘤及异常妊娠中的作用作前期准备。方法 提取新鲜人绒毛膜组织总RNA ,利用RT -PCR技术扩增出HCGαcDNA ,克隆于表达载体PGEX4T - 1,酶切鉴定后测序 ,测序证实序列正确 ,并转化大肠杆菌BL2 1,IPTG诱导表达融合蛋白GST -HCGα。超声破菌后上清经谷胱甘肽Sepharose 4B亲和层析纯化 ,沉淀包涵体经变性、透析复性等处理 ,用SDS -PAGE电泳、Western印迹分析产物。结果 琼脂糖凝胶电泳结果显示RT -PCR扩增片段大小约 2 80bp ,同预计片段相符。SDS -PAGE电泳显示诱导表达的产物经初步处理后有 36kd左右的一条明显新增条带 ,与预期分子量相符 ,Western印迹证实此结果。融合蛋白主要以包涵体形式存在。结论 成功地从人绒毛膜组织中克隆出HCGαcDNA ,克隆基因在大肠杆菌中获得了较高水平的表达 。
- 金东华诸葛洪祥钱峰石永兵
- 关键词：克隆大肠杆菌
- EC-SOD研究概况被引量：4
- 2005年
- 朱希强袁勤生
- 关键词：EC-SOD超氧化物歧化酶糖蛋白大脑萎缩心血管疾病
