山西大学生命科学学院应用生物学研究所
- 作品数：142 被引量：419H指数：11
- 相关作者：郑耀武宣涛王跃刘娇李亚红更多>>
- 相关机构：中国科学院动物研究所太原师范学院生物系吉林大学白求恩医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山西省自然科学基金山西省青年科技研究基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程医药卫生更多>>
- 不同RNAi方法对飞蝗触角高表达基因沉默效率的比较被引量：4
- 2017年
- 【目的】RNAi技术在研究飞蝗功能基因组学方面已经日趋成熟,飞蝗触角中富含有丰富的气味结合蛋白、转运蛋白以及气味降解酶等,这些蛋白在昆虫嗅觉信号传导中发挥着重要的作用,但是关于高效降解这些基因的相关RNAi方法还未知,因此本文通过分析不同RNAi方法对飞蝗触角高表达基因的沉默效率差异变化,以此探索一种高效降解飞蝗触角高表达基因的方法,为后续研究基因功能提供理论依据与技术指导,为从飞蝗嗅觉机制方向设计防控蝗灾的分子靶标奠定基础。【方法】以Lm CYP3117C1基因为目标基因,飞蝗为实验材料,选取飞蝗5龄若虫解剖触角、下颚须、翅、跗足、中肠、马氏管6个组织部位,利用实时荧光定量PCR技术分析基因不同组织部位的表达特异性。用不同溶剂溶解ds RNA(DEPC水,丙酮和DEPC水(1︰1)混合溶剂,0.1%Triton X-100),分别采用注射法(触角窝注射和腹部注射),浸泡法和涂抹法3种方法干扰靶标基因,利用实时荧光定量PCR技术分析基因表达抑制情况,研究不同RNAi方法对基因表达量变化的影响。【结果】Lm CYP3117C1基因在飞蝗若虫6个组织部位均有表达,在触角的表达量最高,分别是下颚须、翅、跗足、中肠、马氏管的3.78倍、2.10倍、10.84倍、363.48倍、365.16倍。通过在两边的触角窝注射ds CYP3117C1,24 h后飞蝗雌雄虫触角Lm CYP3117C1表达量显著降低,雌虫和雄虫沉默效率分别为76.84%和87.51%,但在其他组织部位(下颚须、翅、跗足、其余整虫)基因表达量没有发生显著变化;飞蝗腹部注射ds CYP3117C1,24 h后雌雄虫触角的基因表达水平均发生显著降低,其中雌虫触角沉默效率达68.60%,雄虫沉默效率达61.10%,另外,飞蝗雌虫跗足Lm CYP3117C1基因表达量也发生显著降低,但下颚须、翅和其余整虫没有明显变化;飞蝗雄虫下颚须,其余整虫Lm CYP3117C1基因表达有显著降低,翅和跗足没有发生明�
- 史学凯张艺伟朱坤炎马恩波马恩波刘晓健张建珍
- 关键词：触角RNAI技术浸泡法涂抹法
- 抗凝血剂对山西果园害鼠的防控效果被引量：2
- 2020年
- 为实现对山西省果园害鼠科学、高效的防控,通过试验研究了溴敌隆、溴鼠灵和氟鼠灵3种第二代抗凝血剂的摄食系数和防控效果。结果表明,3种抗凝血剂的室内摄食系数均≥0.5,在果园的校正防效均>85%,且未发生非靶标动物的二次中毒现象,3种抗凝血剂的适口性与防效良好。
- 杨新根王庭林王庭林常文英邹波武振荣
- 关键词：抗凝血剂防控效果
- 注射dsRNA对飞蝗Knickkopf基因在mRNA和蛋白水平的沉默效率被引量：2
- 2016年
- 【目的】本研究旨在评估dsRNA对飞蝗Locusta migratoria Knickkopf(Knk)基因mRNA和蛋白表达的沉默效率,以期为基于RNAi技术探索飞蝗体内基因功能的研究提供基础资料。【方法】选择飞蝗2龄第1天的若虫,将体外合成的飞蝗Knk基因dsRNA注射进入飞蝗体腔内,注射后48,72和96 h分别解剖试虫的腹部表皮,一半用于RT-q PCR方法检测其mRNA表达;另一半用于Western blot法检测其蛋白的表达量。【结果】dsRNA注射进入飞蝗体腔内48,72和96 h后,与对照相比,Knk mRNA水平相对表达量分别降低78.3%,96.2%和95.1%;Knk蛋白表达量分别降低61.2%,33.3%和52.9%。【结论】注射ds Knk能显著沉默飞蝗Knk基因mRNA水平和蛋白水平的表达,但mRNA水平的沉默效率高于蛋白水平。
- 于荣荣丁国伟杨美玲马恩波张建珍
- 关键词：飞蝗基因沉默DSRNABLOTRT-QPCR
- 猫蛱蝶线粒体基因组全序列分析被引量：5
- 2013年
- 采用PCR步移法对猫蛱蝶Timelaea maculata线粒体基因组全序列进行了测定和分析。分析结果表明:猫蛱蝶线粒体基因组全长15178bp,包括13个蛋白编码基因、22个tRNA基因、2个rRNA基因和一段长度为382bp的A+T富含区,基因排列顺序与其它已知鳞翅目昆虫相同。猫蛱蝶线粒体基因组中存在很高的A+T含量(81.1%)。13个蛋白编码基因中除COⅠ以CGA作为起始密码外,其余蛋白质基因均以ATN作为起始密码子。COⅡ和ND4基因使用了不完全终止密码子T,其余基因均以典型的TAA、TAG为终止密码子。在所测得的22个tRNA基因中,除tRNASer(AGN)缺少DHU臂外,其余tRNA均能形成典型的三叶草结构。与其它多数鳞翅目昆虫一样,猫蛱蝶的A+T富含区中有一段由"ATAGAA"引导的保守的多聚T结构,长度为19bp,并散在着一些长短不一的串联重复单元。
- 曹天文王菊平宣善滨张敏郭亚平马恩波
- 关键词：鳞翅目蛱蝶科线粒体基因组
- 铜对秀丽隐杆线虫毒性效应的研究被引量：2
- 2012年
- 为了阐明铜(Cu)对秀丽隐杆线虫Caenorhabditis elegans长期作用的毒性效应,对实验室多代筛选的耐铜型秀丽隐杆线虫进行了寿命、衰老、发育、生殖和运动等生物学指标的研究。结果显示耐铜型秀丽隐杆线虫与野生型秀丽隐杆线虫相比其寿命缩短、衰老提前、个体发育受到抑制,且出现繁殖率降低、生殖能力减弱、运动行为存在障碍等一系列生理变化。本文为理解与阐明Cu的毒性效应提供了实验资料,有助于深入开展Cu毒性机理的研究。
- 杨慧敏韩焱宋少娟杨美玲马恩波郭亚平
- 关键词：秀丽隐杆线虫生物学指标
- 镉对中华稻蝗4龄若虫抗氧化酶的影响被引量：7
- 2008年
- 在实验室条件下,研究了镉对中华稻蝗Oxya chinensis急性毒性的影响。对Cd2+急性染毒的中华稻蝗抗氧化酶活性变化研究表明,随着Cd2+浓度的升高,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性均发生改变。对4龄中华稻蝗注射不同浓度的Cd2+(0,1.2,1.5,2.5,3.5,5.5,7.5mg/mL)溶液,结果表明,这3种酶对于防御机体的损伤起着重要作用。
- 吴昊孙鸽吴海花郭亚平马恩波
- 关键词：中华稻蝗镉急性毒性抗氧化系统
- 秀丽小杆线虫耐铜性筛选及其耐铜机制探讨被引量：5
- 2008年
- 为了阐明铜的长期作用对生物体生存状况和生理特性的影响,本文以秀丽小杆线虫Caenorhabditis elegans为材料,在培养基中加入一定浓度的铜(CuSO4.5H2O),最终得到具有Cu2+耐性的线虫(TT),其繁殖率显著降低,丙二醛(MDA)含量显著升高,超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽硫转移酶(GST)比活性显著降低,与重金属络合能力强的柠檬酸含量则显著升高。
- 宋少娟郭亚平阴琨吴海花张小民杨美玲马恩波
- 关键词：秀丽小杆线虫铜耐受性生物学特性生理学特性
- POPU金钱豹mtDNA ND5基因序列及其遗传变异
- 2012年
- 测定山西7个不同地域金钱豹9个体mtDNA ND5基因部分序列,结合GenBank下载的37条序列,进行遗传多样性分析,用豹属的狮Panthera leo和虎Panthera tigris作外群,构建其不同单倍型的NJ分子聚类关系。46条序列共产生18个单倍型,单倍型多样度和核苷酸多样度指数表明金钱豹的遗传多样性比较丰富,AMOVA分析显示其种群间出现显著的遗传分化。单倍型聚类分析表明,亚洲和非洲种群尽管有一定的分化,但其置信度很低,不足以形成各自独立的分支。
- 朱军张阳马恩波任竹梅
- 关键词：金钱豹MTDNA基因序列
- 几丁质合成抑制剂除虫脲对中华稻蝗的毒性效应研究被引量：3
- 2008年
- 为研究几丁质合成抑制剂除虫脲对不同龄期中华稻蝗若虫的毒性效应,将除虫脲用丙酮溶解,稀释至不同浓度,点滴法处理试虫。结果表明除虫脲对2、3龄中华稻蝗若虫具有一定的毒性效应,试虫出现因蜕皮困难而死亡的现象,且影响其进食和增重。
- 曾慧花张建珍杨美玲郭亚平马恩波
- 关键词：中华稻蝗几丁质合成抑制剂除虫脲
- 中华稻蝗羧酸酯酶家族基因生物信息学及组织表达特异性分析被引量：2
- 2015年
- [目的]对重要农业害虫中华稻蝗(Oxya chinensis)羧酸酯酶(carboxylesterases,Ces)家族基因进行生物信息学分析,并对部分基因的组织表达特性进行研究,为揭示中华稻蝗Ces基因功能及研发新的分子靶标提供依据。[方法]基于中华稻蝗转录组数据库,通过关键词搜索获得Ces基因序列,采用生物信息学方法进行比对拼接、氨基酸序列推导和开放阅读框分析,选择全长序列构建系统发育树,采用在线软件分析中华稻蝗Ces氨基酸序列结构、理化性质、信号肽和N糖基化位点等特征。采用实时定量PCR技术,通过ge Norm与Normfinder软件分析4个候选内参基因β-肌动蛋白(β-actin)、延长因子(EF1α)、3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)和核糖体蛋白49(RP49)表达稳定性,筛选中华稻蝗5龄若虫不同组织部位最适内参基因并检测10个羧酸酯酶基因在不同组织部位相对表达量。[结果]从中华稻蝗转录组数据库搜索获得Ces基因c DNA片段180个,经筛选获得28个Ces基因全长序列进行生物信息学分析。推导的氨基酸序列与其他昆虫物种的聚类分析结果显示,中华稻蝗28个Ces分布于4个功能簇中,其中A簇直翅目和部分双翅目昆虫α酯酶(20个)、D簇表皮特异酯酶(2个)、E簇β酯酶(4个)和F簇非鳞翅目保幼激素酯酶(2个)。氨基酸序列分析结果显示,中华稻蝗大部分Ces的等电点(p I)均为偏酸性或弱酸性,p I为4.38—6.84,只有3个Ces的p I值偏碱性。中华稻蝗所有的Ces基因都具有N糖基化位点、N端保守的半胱氨酸残基及氧离子洞,信号肽预测结果表明19个Ces具有完整的信号肽;21个Ces具有典型的催化三联体S-E-H,其余7个Ces催化三联体发生了不同的替换。Ge Norm与Normfinder分析结果显示,4个候选内参基因稳定性EF1α=RP49>β-actin>GAPDH。选择EF1α作为内参基因,RT-q PCR结果显示10个羧酸酯酶基因在7个不同组织部位均有表达,其中OcCesA1、OcCesA6、OcCesA12、OcCesA1
- 刘娇张建珍李大琪张婷婷马恩波张建琴
- 关键词：中华稻蝗生物信息学组织特异表达
