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四川大学华西基础医学与法医学院免疫研究室

作品数：21 被引量：48H指数：4
相关作者：董薇张兵朱月明隋鹏诺张敏更多>>
相关机构：石河子大学医学院新疆地方与民族高发病省部共建教育部重点实验室石河子大学医学院石河子大学药学院更多>>
发文基金：国家自然科学基金美国中华医学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
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合作机构

文献类型

  • 21篇中文期刊文章

领域

  • 17篇医药卫生
  • 7篇生物学
  • 1篇理学

主题

  • 9篇杆菌
  • 6篇细胞
  • 6篇结核
  • 6篇分枝杆菌
  • 5篇ESAT-6
  • 4篇结核分枝杆菌
  • 4篇基因
  • 4篇HMGN2
  • 3篇抗原
  • 3篇克隆
  • 2篇单克隆
  • 2篇单克隆抗体
  • 2篇蛋白
  • 2篇真核
  • 2篇真核表达
  • 2篇真核表达载体
  • 2篇重组耻垢分枝...
  • 2篇免疫
  • 2篇抗菌
  • 2篇抗体

机构

  • 21篇四川大学
  • 2篇四川大学华西...
  • 1篇石河子大学

作者

  • 10篇鲍朗
  • 7篇黄宁
  • 7篇吴琦
  • 7篇王伯瑶
  • 5篇张会东
  • 4篇冯云
  • 3篇魏大鹏
  • 3篇蔡美英
  • 3篇熊文碧
  • 3篇李娅莎
  • 3篇刘珍
  • 3篇龙洋
  • 2篇钟琪
  • 2篇邓璐霞
  • 2篇刘燕翔
  • 2篇高蕾
  • 2篇朱庆平
  • 2篇赵丽君
  • 2篇彭媛媛
  • 2篇郝牧

传媒

  • 5篇四川生理科学...
  • 2篇生物化学与生...
  • 2篇航天医学与医...
  • 2篇西部医学
  • 1篇医学综述
  • 1篇生命科学研究
  • 1篇微生物学报
  • 1篇中华微生物学...
  • 1篇中国人兽共患...
  • 1篇国外医学（微...
  • 1篇生物医学工程...
  • 1篇细胞与分子免...
  • 1篇中国呼吸与危...
  • 1篇南方医科大学...

年份

  • 1篇2010
  • 4篇2009
  • 2篇2008
  • 3篇2007
  • 3篇2006
  • 3篇2005
  • 3篇2004
  • 1篇2003
  • 1篇2002
共 21 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
人淋巴结中HMGN2蛋白的分离纯化及其亚细胞分布研究被引量：3
2010年
从人淋巴结中分离与纯化HMGN2蛋白,探讨HMGN2分子抗菌作用及其在淋巴结中的亚细胞分布。我们采用高效液相色谱分离纯化,琼脂糖弥散法筛选纯化组分的抗菌活性,对活性组分进行质谱分析测定精确分子量,进行Western-blot检测同源性。结果成功从人淋巴结中分离纯化出的活性蛋白,对致病性大肠杆菌54080有抗菌活性,质谱精确分子质量测定、Western-blot分析证明此活性蛋白即为HMGN2分子,免疫组化实验结果显示在淋巴结组织细胞细胞浆和细胞核均有HMGN2蛋白分布。从人淋巴结组织成功分离纯化出纯度较高、具有生物活性的HMGN2蛋白,可能参与了体内的天然免疫防御作用。
李薇张平孔祥丽李燕陈思秀冯云吴琦王伯瑶
关键词：人淋巴结HMGN2分离纯化亚细胞定位
人IL-12与结核分枝杆菌抗原ESAT-6联合基因疫苗的免疫效果观察被引量：12
2007年
人白细胞介素12（IL-12）与结核分枝杆菌免疫优势抗原ESAT-6真核表达质粒联合基因免疫,诱导免疫应答效果观察.近交系BALB/c小鼠,随机分组：A组（生理盐水对照）、B组（pcDNA3.1空质粒对照）、C组（BCG对照）、D组（pcESAT-6）和E组（pcIL-12＋pcESAT-6）.B、D、E质粒免疫组小鼠分别于胫前肌肌肉注射布比卡因（7.5g/L）和质粒的混和物（1：4,100μL,含质粒70μg/次）,A组小鼠肌肉注射生理盐水和布比卡因的混和物（1：4,100μL）,均间隔2周免疫一次,共免疫3次;末次免疫时,C组小鼠皮下注射BCG菌液,0.3mL/只,含10^6CFU/mL.末次免疫后14d和28d,各组小鼠分别取血分离血清用于总IgG测定,同时分离脾细胞,经TB-PPD刺激后检测脾细胞增殖（XTT比色法）活性和脾细胞培养上清液中γ干扰素（IFN-γ）、白介素4（IL-4）分泌水平.pcESAT-6质粒DNA单独免疫（D组）或与pcIL-12质粒DNA联合免疫（E组）,均能诱导小鼠产生特异性抗体,且抗体水平在末次加强免疫后14～28d逐渐增加;但pcIL-12与pcESAT-6联合免疫后,特异性抗体水平较pcESAT-6单独免疫增加不明显（P＜0.05）.c、D、E组免疫小鼠脾细胞体外经TB-PPD刺激后,E组小鼠特异性淋巴细胞增殖活性和IFN-γ分泌水平明显强于C组和D组（P＜0.05）,而IL-4分泌水平相互间未发现明显差异.末次加强免疫后14～28d,E组小鼠脾细胞增殖活性维持在较高水平,而C组小鼠脾细胞增殖活性先低后高,D组则先高后低;IFN-γ诱生水平,E组最高,C组次之,D组最低.pcIL-12与pcESAT-6质粒DNA联合免疫后能刺激机体产生强烈的细胞免疫和稳定的体液免疫,在动物体内诱发的细胞免疫较ESAT-6或BCG单独免疫时均有明显增加并维持较长时间,此外联合免疫后诱导的体液免疫也较BCG免疫有明显增加.
郝牧鲍朗高蕾
关键词：白细胞介素12结核分枝杆菌ESAT-6
生物素N—羟基丁二酰亚胺酯标记抗rhIFN-α单克隆抗体被引量：5
2004年
目的　探讨生物素N 羟基丁二酰亚胺酯标记单克隆抗体的方法。方法　用硫酸铵纯化的抗rhIFN α单克隆抗体 ,将 2 .0ml抗体 ( 6.0mg/ml)和 18μlBNHS( 3 8mg/ml)混合 ,室温反应 4小时 ,加入 48μl 1MNH 4Cl,10分钟后将反应混合液装入透析袋对PBS透析 ,然后用生物素 亲和素ELISA法测定所制备的生物素化抗体活性。结果　该法制备的生物素化抗体活性高 ,用于检测rhIFN α敏感性好。结论　该生物素化抗IFN α单克隆抗体的制备方法具有制备简单 ,稳定性好等优点。
余玲魏大鹏蔡美英
关键词：生物素ELISA
兔胸腺HMGN2的分离纯化鉴定被引量：1
2008年
目的:分离纯化鉴定兔高迁移率非组蛋白N2(High mobility group chromosomal protein N2,HMGN2)。方法:利用液氮研磨和5%高氯酸从新鲜兔胸腺组织获得酸溶性萃取物,经反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离得到HMGN2,经过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western-blotting对HMGN2进行分子量测定和特异性鉴定。并利用琼脂糖弥散抑菌实验对其杀菌活性进行鉴定。结果:利用上述方法分离纯化出高纯度的兔HMGN2。对大肠埃希菌临床分离株54080、大肠埃希菌ATCC25922有明显杀菌活性。结论:建立简单分离高纯度的HMGN2的方法。
石艳娥李恒彭媛媛邓璐霞周新娥赵媛黄宁
关键词：HMGN2
人宫颈黏液HMGN2鉴定及在宫颈组织的表达
2008年
为探讨人子宫颈黏液的抗菌机制,采用酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳和反相高压液相色谱技术,从人子宫颈黏液酸溶性提取物鉴定出对大肠杆菌氨苄青霉素耐药株ML-35p有较强的抗菌活性的多肽HCP-21和HCP-26.蛋白质N端氨基酸序列测定和精确质谱分子质量测定证明,HCP-21为HMGN2,HCP-26为SLPI片段.提取原代培养宫颈上皮细胞的总RNA,采用RT-PCR技术扩增出一条与HMGN2 cDNA大小相同(270bp)目的基因片段,表明在生理状况下,宫颈上皮细胞即可表达其mRNA.制备HMGN2多克隆抗体,对生理状态下宫颈组织切片和宫颈黏液涂片进行HMGN2分子免疫组化分析表明,该分子主要分布于子宫颈黏膜层,并存在于子宫颈黏液.HMGN2分子在宫颈黏膜上皮组织和黏液中固有表达,可能在子宫颈天然免疫防御中起重要作用.
王莉莉何跃东黄宁李明熊文碧冯云吴琦王伯瑶潘小玲
关键词：女性生殖道子宫颈抗菌肽HMGN2
结核杆菌CFP-10／ESAT-6融合基因在耻垢分枝杆菌中的表达及其抗原性的初步研究被引量：2
2006年
目的构建表达结核分枝杆菌CFP-10／ESAT-6融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌,并观察其对巨噬细胞的作用。方法采用SOE法构建CFP-10／ESAT-6融合基因,克隆人大肠杆菌-分枝杆菌穿梭载体pMV261中,将重组质粒电转化耻垢分枝杆菌,SDS-PAGE检测CFP-10／ESAT-6融合蛋白在重组耻垢分枝杆菌中的表达。以重组耻垢分枝杆菌感染小鼠巨噬细胞ANA-1,半定量RT-PCR检测ANA-1细胞一氧化氮合成酶的表达水平。结果经DNA测序证实CFP-10／ESAT-6融合基因序列正确。重组耻垢分枝杆菌经热诱导后可以表达相对分子质量(Mr)约为18×103的融合蛋白,与预期值一致。重组耻垢分枝杆菌能够诱导小鼠巨噬细胞表达一氧化氮合成酶。结论表达CFP-10／ESAT-6融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌构建成功,该重组耻垢分枝杆菌能够活化巨噬细胞,具有抗原性,为研制结核疫苗提供一定参考。
李岩鲍朗张会东商正玲钟琪李娅莎
关键词：CFP-10ESAT-6融合基因重组耻垢分枝杆菌
结核分枝杆菌免疫相关蛋白脯氨酸-谷氨酸家族的研究进展
2004年
脯氨酸-谷氨酸家族蛋白是一个在结核分枝杆菌中新发现高度保守的富含甘氨酸、丙氨酸的酸性蛋白质家族。目前认为该家族与结核分枝杆菌抗原变异相关,有利于细菌逃避宿主免疫系统,并通过抑制宿主免疫细胞对其抗原的呈递过程影响机体的免疫应答,干扰宿主对结核感染的保护性。该家族蛋白作为结核感染的免疫学标志,在结核诊断和新药物靶向以及抗结核DNA疫苗的研制开发方面具有重要意义和广阔的应用前景。
龙洋鲍朗
关键词：结核分枝杆菌脯氨酸谷氨酸免疫应答
多耐药临床分离株结核分支杆菌耐药基因rpsL的克隆表达及功能的初步研究
2005年
制备多耐药临床分离株结核分支杆菌基因组DNA,PCR扩增其耐药基因rpsL基因和rrS基因,同时进行测序分析,结果显示该株多耐药临床分离株结核分支杆菌的rpsL基因的93、94bp处的碱基发生了突变,碱基C、C突变为T、T,使得相对应的编码氨基酸由脯氨酸(Pro)突变为亮氨酸(Leu);而rrS基因未发生核苷酸的插入、缺失或取代;进一步构建该株多耐药临床分离株结核分支杆菌耐药基因rpsL高效原核表达重组载体pGEX-λT/rpsL,所构建的重组质粒pGEX-λT/rpsL在大肠杆菌中高效表达了38kD的融合蛋白.结果提示,该株多耐药临床分离株结核分支杆菌对链霉素耐药仅仅是由于rpsL基因的个别碱基突变,是单基因型的,在国内外属首次研究发现.
张万江鲍朗邓喜玲吴芳曹旭东王晓樱
关键词：结核分支杆菌克隆
IL-12基因不同亚基真核表达载体的构建及表达被引量：2
2006年
目的:克隆并构建含人白介素12(hIL-12)基因p35、p40不同亚基的真核表达载体,瞬时转染真核细胞并诱导IL-12的表达。方法:人单核细胞白血病细胞株(THP-1)和人白血病细胞株(HL-60),经DMSO、IFN-γ和LPS诱导后,用RT-PCR及SOEPCR扩增IL-12p40、p35及p40-p35融合基因;并构建pcDNA-p35、pcDNA-p40及pcDNA-IL-12真核表达载体。以3种重组质粒分别瞬时转染COS-7细胞后,通过RT-PCR及ELISA法检测目的基因的表达。结果:经诱导后,从HL-60细胞中扩增到IL-12p40和p35基因片段;但从THP-1细胞中只扩增到p35基因片段,未能扩增到p40基因片段;经酶切鉴定、PCR扩增及序列测定表明pcDNA-p35、pcDNA-p40及pcDNA-IL-12真核表达质粒构建成功;并在COS-7细胞中可检测到IL-12的表达。结论:含hIL-12基因不同亚基的真核表达质粒的成功构建,对进一步研究IL-12在免疫应答中的调节作用以及作为免疫佐剂改善BCG免疫保护效果的研究奠定了基础。
郝牧鲍朗张会东高蕾李娅莎
关键词：白细胞介素12真核表达瞬时转染
抗FLT3受体单克隆抗体的制备与鉴定
2009年
目的制备抗FLT3受体的单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法以PET146-FLT3-His-tag表达蛋白作为免疫原免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经多次筛选及克隆化,建立可以稳定分泌抗FLT3受体的单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用ELISA、Western blot、免疫组化对此抗体特性进行鉴定。结果筛选到两株能稳定分泌抗FLT3受体单克隆抗体的细胞株5F3B11B1和D3H2C12,亚类鉴定两种单抗为IgG1,ELISA法测定两株细胞腹水抗体效价分别为1∶409600和1∶102400,抗体相对亲和力为7.85×106L/mol。Western blot显示抗体能特异识别免疫原。细胞免疫组化显示此单抗可以特异的识别急性髓系白血病病人骨髓中原始细胞表达的FLT3受体。结论成功制备抗FLT3受体单克隆抗体,为进一步研究其与白血病等血液疾病的关系奠定了基础。
童师雯宣景秀章崇杰魏大鹏
关键词：单克隆抗体白血病
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