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- 作品数:41 被引量:14H指数:3
- 相关机构:石河子大学新疆农垦科学院河南牧业经济学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金兵团科技计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生金属学及工艺石油与天然气工程更多>>
- 一种血清4型禽腺病毒灭活苗及其制备方法
- 本发明属于疫苗制备技术领域,具体涉及血清4型禽腺病毒灭活苗及其制备方法。所述血清4型禽腺病毒灭活苗,其抗原为通过悬浮培养方法获得的效价不低于10<Sup>9</Sup>TCID<Sub>50</Sub>/ml的灭活后的血...
- 叶建强张建军李文迹张伟秦爱建殷健高巍邵红霞梁广成
- 文献传递
- 布鲁氏菌外膜囊泡生物信息学分析及免疫原性评价被引量:3
- 2023年
- 【目的】探索布鲁氏菌外膜囊泡(OMVs)在亚单位疫苗上的应用前景,制备布鲁氏菌OMVs亚单位疫苗,评估布鲁氏菌OMVs的免疫原性。【方法】利用高速离心法制备羊种布鲁氏菌OMVs,通过透射电镜、SDS-PAGE和生物信息学分析对制备的OMVs进行形态和组分分析;使用纳米佐剂(LDH)和弗氏佐剂乳化OMVs后免疫小鼠,通过间接ELISA方法检测免疫后7、14、21、28和35 d小鼠血清中的特异性抗体,利用小鼠IgG ELISA检测试剂盒检测免疫后小鼠血清中IgG抗体水平,评估OMVs诱导产生的体液免疫水平;通过小鼠脾脏淋巴细胞分离与细胞因子白细胞介素4(IL-4)和γ-干扰素(IFN-γ)测定及小鼠外周血T淋巴细胞亚群的流式细胞术测定评估OMVs免疫小鼠的细胞免疫水平。【结果】成功提取并纯化了布鲁氏菌OMVs,其直径大小为20~160 nm。生物信息学分析结果显示,OMVs主要组成蛋白OMP25、OMP31、OMP16、OMP19、BP26及SOD均属于亲水性蛋白和抗原性蛋白,且存在多个B细胞和T细胞优势抗原表位。与PBS组相比,OMVs免疫小鼠后,不同佐剂组均可诱导小鼠产生高水平的特异性抗体和IgG抗体(P<0.01);同时OMVs可显著诱导小鼠脾脏淋巴细胞产生IFN-γ(P<0.05),并促进了CD4^(+)T细胞的表达(P<0.05)。【结论】本研究证实了羊种布鲁氏菌OMVs具有较强的免疫原性,能诱导小鼠产生强烈的体液免疫和细胞免疫反应,为布鲁氏菌新型亚单位疫苗的开发奠定了理论基础。
- 徐朕宇徐锦凤邓肖玉王月丽何金科谢珊珊王震王震王勇苗玉和王勇陈创夫
- 关键词:布鲁氏菌免疫原性
- 一种富硒高产鸡蛋的蛋宝中药为主的复合绿色饲料添加剂及其制备方法
- 本发明公开了一种富硒高产鸡蛋的蛋宝中药符合绿色添加剂,由以下重量份数的原料组成:党参10‑15份、黄芪10‑20份、大蒜提取物10‑15份、松针粉20‑30份、益母草10‑20份、艾叶10‑15份,本发明点:所用食品营养...
- 张君超李群然孔德运苗玉和张榆昕
- 文献传递
- 布鲁氏菌重组L7/L12蛋白对小鼠免疫保护效果的评价被引量:2
- 2023年
- 为探究布鲁氏菌候选保护性抗原L7/L12的免疫原性及其对小鼠的免疫保护效果,本研究经PCR扩增羊种布鲁氏菌16M株L7/L12基因,构建重组质粒pET-22b-L7/L12,经双酶切鉴定正确后转化E.coli BL21(DE3)中,通过IPTG诱导表达并纯化后利用SDS-PAGE与western blot检测。结果显示,获得了16 ku的重组L7/L12蛋白(rL7/L12),且纯化效果较好。将rL7/L12以100μg/只腹腔注射免疫6周龄SPF BALB/c小鼠,14 d后以50μg/只加强免疫。首免后7 d、14 d、21 d、28 d、35 d、42 d及49 d分别对所有小鼠尾静脉采血,通过间接ELISA方法检测小鼠血清中的IgG抗体、其亚型(IgG1、IgG2a)抗体水平及二者比值;并利用ELISA方法检测首免后21 d和35 d两组小鼠血清中细胞因子IL-2、IL-10和TNF-α的分泌水平。结果显示,首免后14 d,小鼠血清中IgG抗体水平迅速升高,于首免后21 d达峰值并持续至首免后49 d(P<0.01),对照组小鼠则一直无抗体产生;首免后14 d,rL7/L12组小鼠血清中的IgG1抗体水平极显著高于IgG2a抗体水平(P<0.01),且IgG1/IgG2a大于1;但首免后42 d,rL7/L12组小鼠血清中IgG2a抗体水平极显著高于IgG1(P<0.01),IgG2a/IgG1比值大于1。表明在免疫前期,rL7/L12主要诱导小鼠的Th2型体液免疫反应,免疫后期主要诱导小鼠Th1型细胞免疫反应。首免后21 d和35 d,rL7/L12组小鼠IL-2和TNF-α含量极显著高于PBS对照组(P<0.01),首免后35 d,该组小鼠抑炎因子IL-10的含量极显著低于PBS对照组(P<0.01)。首免后21 d和35 d,分别剖杀每组小鼠,分离小鼠脾淋巴细胞,利用ELISpot法检测各组小鼠脾淋巴细胞中IFN-γ的分泌水平。结果显示,首免后21 d,rL7/L12组小鼠脾淋巴细胞IFN-γ的分泌水平有所升高,但与PBS对照组无显著差异(P>0.05);但免疫后35 d,rL7/L12组小鼠脾淋巴细胞IFN-γ分泌水平显著高于PBS对照组(P<0.05)。上述结果表明,rL7/L12免疫后期刺激小鼠机体产生Th1型细胞免疫反应,与抗体检测结果相符。首免后42 d�
- 谢珊珊王月丽邓肖玉席静于水发马忠臣王震王震苗玉和孟闯易继海徐艺玫
- 关键词:布鲁氏菌ELISPOT
- 一种具有超声提取功能的中药提取罐
- 本实用新型涉及一种具有超声提取功能的中药提取罐,包括罐体,所述罐体的内顶壁固定有连接环,所述连接环上设有定位机构,所述罐体的内部活动连接有盖体,所述盖体内设有粉碎机构,所述连接环的内部滑动连接有筒体。该具有超声提取功能的...
- 崔丽瑾苗玉和郭海岩郭伟王红军潘家茂田野
- 一株禽流感病毒毒株及其应用
- 本发明提供了一株H9N2亚型禽流感病毒毒株及其应用。本发明的禽流感亚型毒株命名为SW001,其保藏编号为CGMCC No.19387。本发明提供的病毒株为低致病性毒株,具有良好的特异性和免疫原性,免疫雏鸡能产生针对H9亚...
- 傅芬芳苗玉和崔丽瑾
- 一种兽药加工用的筛分装置
- 本实用新型提供了一种兽药加工用的筛分装置,包括有装置主体,所述装置主体内侧壁安装有分料罐,所述分料罐的罐壁为分离网,所述分料罐上端设置有分料罐盖,所述分料罐盖的下端设置有旋转电机,所述旋转电机连接有旋转轴,所述旋转轴上设...
- 崔丽瑾杜小平王红军苗玉和
- 文献传递
- MDCK细胞悬浮驯化及对H9亚型禽流感病毒悬浮培养工艺研究
- 引言我国兽医生物制品行业多采用鸡胚接种收获尿囊液的方式制备H9亚型禽流感抗原,但鸡胚接种制备疫苗抗原存在诸如鸡胚来源不固定、有外源病毒污染可能等因素,而无血清悬浮培养可以有效提高单位体积内的细胞量,并能够增加批次间的稳定...
- 崔丽瑾张凌云侯野卢荣彬白雨婷郑杰苗玉和
- 一种原料药合成用分离提纯装置
- 本实用新型涉及一种原料药合成用分离提纯装置,包括机架:机架上表面装设有旋转组件,旋转组件包括有位于机架上表面左侧的电机;电机的输出端朝后设置且连接有减速机,减速机输出端朝上设置且输出端外壁上装设有齿轮。该原料药合成用分离...
- 邹冰洁郭伟王红军李建明赵月政丁洪岗
- 布鲁氏菌LPS合成相关重要蛋白的生物信息学分析及per基因的克隆表达被引量:1
- 2022年
- 脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)作为布鲁氏菌(Brucella)重要毒力因子,在布鲁氏菌感染宿主过程中发挥重要作用。本研究通过对布鲁氏菌LPS合成相关重要蛋白进行生物信息学分析,并选择布鲁氏菌LPS O侧链关键基因per进行克隆表达,挖掘布鲁氏菌LPS功能及应用潜力。结果显示,布鲁氏菌LPS合成相关30个重要蛋白主要为无信号肽和跨膜螺旋结构的亲水性蛋白,均具有较强反应原性和甲基化及磷酸化修饰位点;其中18个蛋白(18/30)可发生糖基化修饰,4个蛋白(4/30)可发生乙酰化修饰;亚细胞定位显示,绝大多数蛋白在细胞质中发挥功能,少数在细胞周质及细胞内膜上发挥功能;除Wbpw蛋白外,布鲁氏菌LPS合成相关重要蛋白之间可发生相互作用;构建了pET28a-per重组表达质粒,经诱导在上清液中表达45.7 kDa蛋白,Western Blot验证该蛋白反应原性较强。本研究为布鲁氏菌LPS功能的后续研究及新型疫苗和诊断技术研发提供科学依据。
- 孙天浩易德武张倩李楠苗玉和王震陈创夫
- 关键词:布鲁氏菌LPS生物信息学分析原核表达