江苏省基因药物工程技术研究中心
- 作品数：27 被引量：46H指数：4
- 相关作者：冯志英更多>>
- 相关机构：南京大学南京理工大学江苏省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家科技重大专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学经济管理化学工程更多>>
- 抑制人bc1－2基因表达的siRNA和表达质粒及其在制药中的应用
- 本发明公开了一种特异性抑制人bcl－2基因表达的siRNA及该siRNA的表达质粒和它们在制备治疗或预防与人bcl－2基因有关的肿瘤的药物中的应用。本发明利用生物计算机信息技术从GenBank中获得一组人bcl－2基因序...
- 傅更锋樊燕蓉郭丹肖祥华刘文华刘新卷徐根兴
- 文献传递
- 重组人内皮抑素DOPS胶束的制备及抑瘤效应研究被引量：3
- 2010年
- 目的:本研究采用二油基磷脂酰丝氨酸(DOPS)制备包载重组人内皮抑素的胶束,并考察其体内外抑瘤效应。方法:研究DOPS制备胶束的理化性质,考察重组人内皮抑素DOPS胶束对肿瘤细胞生长、鸡胚绒毛尿囊体内血管生长的影响及对H22肝癌荷瘤小鼠的肿瘤抑制效果。结果:制备的重组人内皮抑素DOPS胶束的粒径为(117.7±21.4)nm,Zeta电位为+18.1 mV,包封率为96.54%。该胶束明显抑制MCF-7肿瘤细胞的生长和增殖,抑制率为32.02%;对鸡胚绒毛尿囊血管新生也有明显的抑制作用,剂量越大,抑制作用越强。与单独使用重组人内皮抑素相比,该胶束抑制H22肝癌荷瘤小鼠肿瘤生长,抑制率达到55.42%。结论:以DOPS胶束作为药物载体可有效地增强重组人内皮抑素的抑瘤效应。
- 邢静樊燕蓉冯志英王建军徐根兴
- 关键词：重组人内皮抑素胶束肿瘤
- 内皮抑素作为递送系统和化学合成的RNA干扰分子组成的组合物及应用
- 本发明属于生物医药领域，公开了内皮抑素作为递送系统和化学合成的RNA干扰分子组成的组合物及应用。该组合物包含携带+5至+15电荷的内皮抑素重组蛋白和携带-15至-55电荷的化学合成的RNA干扰分子，二者通过正负电荷结合形...
- 徐根兴殷妍郭佳佳张昌栋吴稚伟
- 文献传递
- 人复制蛋白变体胶乳增强免疫检测试剂盒的研制被引量：2
- 2015年
- 初步建立了人复制蛋白变体（CIZ1-V）的胶乳增强免疫比浊检测方法,用于早期肺癌的检测。用制备的CIZ1-V多克隆抗体（兔抗）与0.13μm粒径的胶乳微球颗粒进行化学偶联,研制CIZ1-V试剂盒,并对试剂盒性能进行鉴定。结果表明,CIZ1-V试剂盒标准曲线呈线型,相关系数R2=0.998 8;检测范围为0.20~8.00μg/m L,灵敏度为0.11μg/m L,检测限为0.20μg/m L。试剂盒对表达纯化所得目的蛋白的回收率范围为98.92%~104.00%,平均100.91%;平均批内及批间变异系数均小于5%,符合国家检测试剂盒标准。试剂盒和Elisa方法对于表达纯化所得目的蛋白的回收率无显著差异（P〉0.05）,对1 L菌液的CIZ1-V表达量测定结果也无显著差异（P〉0.05）,为早期肺癌的血清检测做了充分准备。
- 曹娅华子春徐根兴
- 关键词：肺癌多克隆抗体试剂盒
- VEGF-asiRNA与依诺沙星和环磷酰胺联用的抑瘤效应研究被引量：1
- 2015年
- 探讨靶向VEGF基因的不对称小干扰RNA(VEGF-asiRNA)与依诺沙星、环磷酰胺联用的抑瘤效果。通过细胞计数法、CCK-8法体外检测VEGF-asiRNA与依诺沙星和环磷酰胺对乳腺癌MCF-7细胞活力的影响。实验结果证明,与其他组相比,VEGF-asiRNA与依诺沙星和环磷酰胺联用组明显增强了对MCF-7细胞生长和增殖的抑制作用。构建胃癌BGC荷瘤裸鼠模型,分为不同实验组分别给药,14 d治疗结束后称量瘤重并计算抑瘤率。实验结果证明,脂质胶束-内皮抑素-asiRNA+依诺沙星+环磷酰胺组肿瘤体积抑制率为68.74%(P<0.01),瘤重抑制率为72.15%(P<0.01),均比其他组高。结果表明与依诺沙星、环磷酰胺联用,能够增强VEGF-asiRNA的体内外肿瘤抑制效果。
- 于晓玮殷妍郭佳佳张昌栋华子春徐根兴
- 关键词：内皮抑素依诺沙星环磷酰胺
- 重组人血管内皮抑素(Rh-Endostatin)的基础与临床研究
- 1997年Cell杂志发表了 O'Reilly等发现小鼠血管内皮瘤(EOMA)细胞系的培养液能够抑制血管内皮细胞的增殖,通过分离纯化得到一种新的蛋白质,命名为鼠的Endostatin,后来翻译成血管内皮抑制素(简称内皮抑...
- 徐根兴
- 关键词：内皮抑素ENDOSTATIN重组蛋白内皮细胞
- 脂质胶束介导VEGF基因对称和不对称siRNA的抑瘤效果
- 2011年
- 目的:探讨脂质胶束递送靶向VEGF基因的对称siRNA和不对称siRNA(asiRNA)的抑瘤效果。方法:通过RNA电泳等方法,筛选不同组分比例的脂质胶束,用Western blot、细胞板计数法、CCK-8实验检测对乳腺癌MCF-7细胞活力的影响。构建H22肝癌荷瘤小鼠模型,随机分为不同实验组,连续14天尾静脉注射给药,计算抑瘤率和小鼠生存率。结果:在4组不同RNA干扰片段中,asiRNA21/23组抑制VEGF蛋白表达效果最好。在H22荷瘤小鼠实验中,asiRNA21/23组显示了明显的抑瘤效果,且延长了荷瘤小鼠的生存期。结论:脂质胶束递送VEGF-asiRNA21/23降低了MCF-7细胞中VEGF基因的表达,且具有明显的肿瘤抑制效果。
- 郭佳佳殷妍张昌栋王建军徐根兴
- 关键词：血管内皮生长因子
- 小发夹RNA特异性抑制Hela细胞中hTERT基因的表达被引量：1
- 2004年
- 目的 :双链RNA特异性地干扰相应序列的mRNA的功能 ,是介导转录后基因沉默的重要因素。本研究旨在探讨能靶向作用于人端粒酶催化亚单位 (humantelomerasereversetranscriptase ,hTERT)mRNA的小发夹双链RNA是否能抑制人宫颈癌细胞 (Hela)中hTERT蛋白的表达。方法 :构建能特异性作用于hTERTmRNA的小发夹RNA质粒表达载体。用免疫荧光法检测转染入Hela细胞的上述质粒对hTERT蛋白表达的影响。结果 :转染特异性小发夹双链RNA质粒表达载体 ( pU 6 TERT和 pH1 TERT)的Hela细胞中其表达hTERT蛋白的阳性细胞数量明显减少 ;而转染非相关性小发夹双链RNA质粒表达载体 pU6 bcl2的Hela细胞并不影响其hTERT蛋白的表达。结论 :该研究构建的靶向作用于hTERT的小发夹双链RNA质粒载体能使Hela细胞中hTERTmRNA的表达水平下调 。
- 郭丹傅更锋樊燕蓉刘新卷徐根兴王建军
- 关键词：人端粒酶催化亚单位RNA干扰小发夹RNAHELA细胞
- 靶向HIV-1细胞受体基因CCR5的不对称siRNA的稳定性和体内分布研究
- 2011年
- 目的:探讨靶向HIV-1细胞受体基因CCR5的不对称siRNA(asiRNA)在血清和动物体内的稳定性和在动物体内分布情况。方法:用内皮抑素同脂质胶束联合递送asiRNA,琼脂糖凝胶电泳法检测asiRNA的血清稳定性,ELISA法和活体荧光成像法检测asiRNA的体内分布。结果:改变合适的实验条件和asiRNA的修饰,可提高asiRNA的血清稳定性。用ELISA法检测出静脉给药15 min后双链asiRNA在血液、肝、肺和肾内浓度较高,用活体荧光成像法检测出静脉给药24 h后asiRNA向肾内汇集排泄,两种检测方法测得asiRNA在脾内浓度较低。结论:两种检测方法方便实用,灵敏度不同,均可用于阳离子脂质体递送asiRNA的体内分布检测。
- 张昌栋殷妍郭佳佳梁晓飞段友容吴稚伟王建军徐根兴
- 关键词：CCR5SIRNAELISA
- RNA干扰抑制SiHaB2细胞中Bcl-2基因的表达
- 2005年
- Bcl-2基因作为细胞凋亡的一个潜在抑制剂调节细胞的死亡,抑制恶性肿瘤细胞中Bcl-2基因的表达可促进肿瘤细胞的凋亡。采用RNA干扰技术,合成了含有21个核苷酸的小双链干扰RNA(siRNA-Bcl-2),并构建了含有19个核苷酸基因的质粒载体(pSilencer2.1-U6-Bcl-2),把合成的siRNA-Bcl-2和pSilencer2.1-U6-Bcl-2分别转导入Bcl-2高表达的细胞株SiHaB2中,通过Western印迹检测,免疫荧光法检测及DNA梯(ladder)检测,可观察到在导入siRNA-Bcl-2和pSilencer2.1-U6-Bcl-2的SiHaB2细胞被培养72h后,可以明显抑制Bcl-2蛋白的表达。
- 林学红傅更锋郭丹刘新卷王建军徐根兴
- 关键词：RNA干扰技术BCL-2基因基因表达细胞凋亡
