上海泽润生物科技有限公司
- 作品数：103 被引量：98H指数：6
- 相关作者：马新兴更多>>
- 相关机构：上海中医药大学上海交通大学医学院附属第三人民医院上海市中药研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项上海市科学技术委员会资助项目上海市科技人才计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学化学工程更多>>
- 肠道病毒71型在Cellspin系统中无血清微载体培养工艺的建立被引量：1
- 2013年
- 目的建立肠道病毒71型(Enterovirus71,EV71)在Cellspin系统中无血清微载体培养工艺,为生物反应器培养EV71工艺的建立奠定基础。方法在Cellspin培养系统中对Vero细胞进行微载体培养,考察不同种类培养基MEM、DMEM/F12、VP-SFM、Opti-SFM、Opti-pro、MD505-199及不同微载体浓度3、5、10 g/L对细胞密度的影响。分别以MOI为0.2及2.0接种EV71至Vero细胞,考察病毒接种量对病毒增殖的影响。分别按培养上清、微载体洗脱液模式收毒,比较不同组分中EV71的抗原含量及TCID50。结果采用5 g/L微载体、VP-SFM培养基时,Vero细胞的密度达4.40×106个/ml;按MOI为2.0染毒,72 h后即可收毒,较MOI为0.2的收毒时间早48 h,按MOI为0.2染毒,收获液上清中的抗原含量达193.5 U/ml,病毒滴度达8.43 Log10TCID50/ml;按上清加洗脱液模式收毒,抗原含量可达573 U/ml。结论成功建立了无血清微载体培养Vero细胞生产EV71的方法,为生物反应器培养EV71工艺的建立奠定了基础。
- 周正高晗杨志建夏德镇张高峡
- 关键词：肠道病毒属微载体
- HPV及其相关疫苗的研究进展被引量：22
- 2018年
- 持续性的人乳头瘤病毒(HPV)感染是随后发展为宫颈癌的主要原因。在世界范围内,多种高致癌性HPV正在不断诱发包括宫颈癌在内的多种恶性肿瘤,并维持很高的发病率与病死率。近年来,针对HPV的预防性疫苗和治疗性疫苗的研制开发取得了巨大的进展。通过疫苗预防HPV的感染仍然是目前降低宫颈癌发病率较为经济有效的关键策略。目前,虽然预防性HPV疫苗在全球推广使用并取得显著效果,但仍存在一些不足,而且并无治疗性HPV疫苗上市。多种新型HPV疫苗研究为宫颈癌的进一步防治带来了希望。随着临床调查与研究的深入,低成本且安全有效的新型HPV疫苗备受关注。
- 吴宝杰杨志建
- 关键词：人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒疫苗宫颈癌预防性疫苗治疗性疫苗
- 一种重组新型冠状病毒疫苗组合物
- 本发明公开了一种重组新型冠状病毒（SARS‑CoV‑2）疫苗组合物，该疫苗组合物包含具有SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的重组刺突蛋白。所述疫苗组合物进一步包含药学上可接受的载体，例如铝佐剂联合CpG ODN佐剂。...
- 刘海涛宋玉娇李佳黛周晨亮张玲莉刘革
- 文献传递
- 人乳头瘤病毒假病毒中和试验血清起始稀释倍数的研究被引量：1
- 2018年
- 目的对人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)假病毒中和试验起始稀释倍数进行研究,确定该系统中合适的起始稀释倍数。方法为了排除血清中HPV抗体以及母传抗体的干扰,选取50份15~18月龄的儿童血清作为验证样本。血清以不同的稀释倍数,与适量的假病毒中和。以光学显微镜观察接种细胞的形态,来判定不同稀释度的血清对细胞生长状况的影响;观察感染细胞表达的绿色荧光蛋白的强度及数量,以此考察血清对假病毒感染过程的影响。结果血清稀释度1∶40对细胞生长状况影响较小;该稀释倍数的病毒进入细胞表达的荧光强度与不加血清的阳性对照类似;假病毒感染细胞导致的荧光斑点数与真实病毒对照相比减少了10%,远低于中和试验判定阈值(相对抑制率50%)。结论在该实验系统中,HPV假病毒中和试验的血清起始稀释度以1∶40较为合适。
- 赵慧李娟马新兴周凌云李长贵
- 关键词：人乳头瘤病毒假病毒
- 重组人乳头瘤蛋白表达
- 本发明公开了一种密码子优化的人乳头状瘤病毒主要衣壳蛋白L1编码基因，所述基因在被转入酵母细胞后可高效地表达重组人乳头状瘤病毒主要衣壳蛋白L1。本发明还公开了一种具有免疫原性的大分子，其主要由所述经密码子优化的人乳头状瘤病...
- 仝鑫张梦华江元翔孟凡举许丹
- 文献传递
- 生物反应器培养Vero细胞生产肠道病毒71型被引量：8
- 2013年
- 目的研究利用微载体技术规模化制备肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)的方法。方法利用NBSCelliGen 310 5 L生物反应器进行Vero细胞微载体培养,考察了不同微载体Cytodex-1浓度(3、10、15、20 g/L)对Vero细胞生长代谢及细胞密度的影响,并且与细胞工厂(Cell factory,CF)中Vero细胞染毒后的病毒繁殖进行比较。分别采用上清液、洗涤液、洗脱液模式收毒,比较不同收毒方式中EV71的抗原含量及病毒滴度(CCID50)。结果采用10 g/L微载体浓度,批次培养方式培养Vero细胞120 h后,细胞密度可达5.47×106个/ml;当微载体浓度大于15 g/L时,由于葡萄糖消耗速度快,需采用灌注模式培养。按MOI 0.2染毒后,微载体培养的收毒时间比CF慢48 h,但其病毒滴度可达8.8 Log10CCID50/ml,约为CF的5倍。EV71与微载体存在离子交换吸附作用,按上清液加洗脱液方式收毒,抗原总量可达12 61 U/ml,约为CF的3倍。结论已成功建立了生物反应器微载体5 L发酵培养Vero细胞生产EV71的方法,为进一步EV71大规模培养以及疫苗研发奠定了基础。
- 夏德镇杨志建周正高晗张高峡
- 关键词：肠道病毒71型VERO细胞生物反应器微载体
- 一种截短型的18型人乳头状瘤病毒主要衣壳蛋白L1基因
- 本发明提供了一种截短型的18型人乳头状瘤病毒主要衣壳蛋白L1基因以及表达该基因的毕赤酵母表达菌株。本发明提供的L1蛋白的基因序列为毕赤酵母偏爱密码子优化，并对最优的密码子频率进行一定的修正的表达L1蛋白的基因序列。本发明...
- 张高峡沈琼雷建强袁靖宇张梦华吴克
- 文献传递
- 重组人乳头瘤病毒33亚型蛋白表达
- 本发明公开了经密码子优化的人乳头状瘤病毒主要衣壳蛋白L1编码基因，所述基因在被转入酵母细胞后可高效地表达人乳头状瘤病毒主要衣壳蛋白L1。本发明还公开了一种具有免疫原性的大分子，其主要由所述经密码子优化的人乳头状瘤病毒主要...
- 许丹仝鑫江元翔谢云陈荣军郭慧丽杜府亮田平生王子龙梁小平曾宪放史力
- Biacore法测定重组人乳头瘤病毒双价(16/18型)疫苗原液的动力学常数被引量：2
- 2014年
- 目的：建立Biacore法测定重组人乳头瘤病毒双价（16/18型）疫苗原液的动力学常数。方法：分别将HPV 16·V5中和单抗与HPV 18·J4中和单抗偶联到CM5芯片上，然后根据Biacore X-100 Kinetics/Affinity控制软件将 HPV 16L1和HPV 18L1原液分别稀释至适当的不同浓度，采用50 mmol·L^-1 氢氧化钠溶液作为再生液进行动力学分析。根据Biacore X-100 Evaluation分析软件进行拟合，得到样品的动力学常数KD值。结果：Biacore法测定重组人乳头瘤病毒16型、18型原液动力学常数KD分别为4.844×10^-10 mol·L^-1和1.67×10^-10 mol·L^-1，HPV 16L1和HPV 18L1原液在浓度为0.625-40 μg·mL^-1时线性关系良好（HPV16L1：Y=17.77X-0.0184，r=1.000；HPV 18L1：Y=18.73X＋5.282，r=0.9957）。HPV 16L1和HPV 18L1原液精密度和稳定性试验的RSD均〈20%。并且Biacore法测定的结合常数ka值和体外相对效力测定（IVRP法）的EC50值之间具有一定的相关性。结论：该方法实时、简便、快速、准确、灵敏，适用于重组人乳头瘤病毒原液的动力学分析。
- 周朝明
- 关键词：人乳头瘤病毒16型人乳头瘤病毒18型动力学常数BIACORE表面等离子共振
- 牙龈卟啉菌和牙垢密螺旋体在不同深度牙周袋内的分布被引量：5
- 2009年
- 目的：建立检测牙龈卟啉菌（Porphyromonas gingivalis，Pg）和牙垢密螺旋体（Treponema denticola，Td）的实时荧光定量PCR方法，探讨尸窖和喇的定植量与牙周状况的关系。方法：建立SYBRGreenI荧光实时定量PCR法检测Pg和Td细菌数量的方法。采集43例慢性牙周炎患者的龈下菌斑并检测Pg和Td的检出率和细菌量，同时记录取样位点的牙周探诊深度。结果：在10^2-10^7范围内细菌数与Ct值有良好的线性关系，最低检测到Pg和蹦的DNA模板为100拷贝。尸窖和刚在慢性牙周炎患者中的阳性检出率、共同检出率和两种细菌数量均随着牙周探诊深度的增加而升高，多组探诊深度间有统计学差异。结论：慢性牙周炎的牙周状况与欢和刚的细菌数量密切相关。
- 邬春兰蒋建群雷建强
- 关键词：牙龈卟啉菌慢性牙周炎
