福建医科大学基础医学院细胞与发育工程研究中心 作品数:39 被引量:69 H指数:4 相关作者: 柯丹如 徐瑛 王明权 江帆 祝宝钦 更多>> 相关机构: 福建中医学院中西医结合系 福建中医学院中西医结合研究院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 福建省自然科学基金 福建省高等学校新世纪优秀人才支持计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
以建构主义学习论指导组织胚胎学教学 被引量:4 2006年 建构主义是一种认知学习理论,体现“学生为主体,教师为主导”的教学思想,对当前教育改革具有重要的指导意义。开展基于建构主义学习理论的教学实践,有利于培养具有创新精神和实践能力的高等医学人才。文章阐述了建构主义学习论及其在组胚教学中的应用。 魏玉珍 江一平关键词:建构主义 组织学 胚胎学 教学 碱性成纤维细胞生长因子基因转染对犬牙龈成纤维细胞的影响 被引量:5 2009年 背景:研究发现,局部应用外源性碱性成纤维细胞生长因子可明显促进体外培养牙龈成纤维绌胞的增殖,口内局部应用可加速牙龈组织伤口的愈合。目的:观察碱性成纤维细胞生长因子基因转染对Beagle犬牙龈成纤维细胞生物学特性的影响。设计、时间、地点:观察对比体外细胞学实验,于2008-04/09在福建医科大学细胞与发育工程中心及解放军南京军区福州总医院比较医学科完成。材料:Beagle犬4只,12月龄,体质量10-13kg,雄性;含有人全长碱性成纤维细胞生长因子cDNA的plRES2.EGFP.bFGF质粒为自行构建。方法:切取Beagle犬左上颌第2,3,4前磨牙的游离龈,无菌磷酸盐缓冲液冲洗4遍,将组织块剪碎后用2.5g/L的胰酶37℃消化2h,离心后弃上清,加入含体积分数为10%胎牛血清的DMEM,接种于6孔板并覆盖玻片,置丁37℃、体积分数为5%C02的培养箱培养,取对数生长期细胞消化传代。利用脂质体介导法将plRES2.EGFP.bFGF质粒转染Beagle犬牙龈成纤维细胞,以空质粒转染组及未转染组作为对照。主要观察指标:MTT法检测牙龈成纤维细胞增殖状况;AO/EB双染色检测牙龈成纤维细胞凋亡:化学比色法检测牙龈成纤维细胞碱性磷酸酶活性。结果:3组细胞均在转染后第3天开始进入对数生长期。MTT检测结果显示,转染后随着时间改变,与空质粒转染组及未转染组相比,实验组牙龈成纤维细胞的增殖能力明显增强(P〈0.05),而空质粒转染组及未转染组差异无显著性意义(P〉0.05)。AO/EB双染色结果显示,实验组牙龈成纤维细胞凋亡率低于空质粒转染组及未转染组(P〈0.05)。转染碱性成纤维细胞生长因子基因后,牙龈成纤维细胞碱性磷酸酶活性未见明显改变,与未转染细胞差异无显著性意义。结论:碱性成纤维细胞生长因子基因转染可以加速牙龈 陈欣戬 闫福华 钟泉 赵欣 江一平关键词:碱性成纤维细胞生长因子 基因治疗 成纤维细胞 印迹基因Igf2对胎盘发育和胎儿生长的影响 被引量:5 2012年 基因组印迹是哺乳动物正常生长发育和行为的基础。印迹基因胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factors II,Igf2)对胎盘及胎儿的营养供应起着不可或缺的影响。它影响胎盘的大小、形态和营养转运功能,进而影响胎儿生长的营养供应。因此Igf2表达的变化对发育编程具有重要意义,对胎盘发育和胎儿生长起着重要的作用。 祝宝钦 黄燕芳 杨晓煜关键词:印迹基因 IGF2 胎儿生长 胎盘发育 小鼠窦前卵泡的玻璃化冷冻方法研究 被引量:1 2009年 目的对性成熟前小鼠的窦前卵泡采用不同的方法进行玻璃化冷冻,探讨不同冷冻方法对卵泡复苏率的影响。方法用Ⅰ型胶原酶和脱氧核糖核酸酶Ⅰ分离10~14dICR雌鼠的卵巢,共进行A、B两个实验,每次实验对获得的卵泡分为4组,1组作为新鲜对照组,其余3组采用不同的冷冻方法处理,试验A采用常规玻璃化法、-205℃玻璃化法和液氮网篮法;试验B采用-205℃玻璃化法、液氮网篮法和-205℃表面玻璃化法,卵泡复苏后进行台盼蓝染色,计算各组卵泡复苏率。结果液氮网篮和-205℃玻璃化冷冻的冷冻效果一致,两种方法的卵泡复苏率差别无统计学意义;常规玻璃化的冷冻效果最差,-205℃表面玻璃化冷冻的冷冻效果最好,其冷冻小鼠窦前卵泡的复苏率达(83.02±4.10)%。结论-205℃表面玻璃化是一种较好的冷冻窦前卵泡的方法。 常娟娟 江一平 王明权关键词:卵泡 卵子 冷冻 小鼠 Pin1抑制剂对小鼠植入前胚体外发育的影响 被引量:1 2016年 目的观察Pin1在小鼠植入前胚中的定位分布及其抑制剂胡桃醌(Juglone)对小鼠植入前胚体外发育的影响。方法免疫荧光染色观察不同发育阶段植入前胚中Pin1的分布;收集小鼠1-细胞胚,以KSOM培养液为对照组,以培养液中添加有不同浓度的Juglone为实验组,观察各组1-细胞胚体外发育情况;Real-time PCR检测体外发育2-细胞胚内干细胞转录因子(Sox2、Oct4、c-Myc和Klf4)m RNA表达水平。结果小鼠不同发育阶段植入前胚中都存在Pin1的表达,胞质和胞核内均有分布,且核内荧光着色明显比胞质强;10μmol/L和25μmol/L胡桃醌持续作用93h(注射人绒毛膜促性腺激素后27h^120h)使1-细胞胚阻滞于2-细胞阶段,极少能过渡至4-细胞胚(P<0.01)。25μmol/L胡桃醌短时间作用18h(注射人绒毛膜促性腺激素后27~45h)同样使1-细胞胚发育阻滞于2-细胞胚(P<0.01);25μmol/L胡桃醌组2-细胞胚内Sox2 m RNA表达水平低于KSOM组(P<0.05),而Klf4、cMyc和Oct4 m RNA表达水平无明显变化(P>0.05)。结论小鼠1-细胞胚之后,Pin1主要定位在细胞核内,提示其可能参与细胞转录活动。且Pin1抑制剂(胡桃醌)能使2-细胞胚至4-细胞胚过渡率明显降低,并使干细胞转录因子Sox2 m RNA表达下调,提示Pin1在小鼠植入前胚早期发育阶段具有一定作用,其参与调控合子基因组激活与干细胞转录因子Sox2有关。 连秀丽 宋婵婵 贺琳 程霄翔 陈俊明 杜娟 刘玥 王世鄂关键词:PIN1 胡桃醌 实时定量聚合酶链反应 免疫荧光 小鼠 抗人精子甘露糖受体抗血清对精子穿透实验的影响 被引量:2 2007年 目的研究人精子甘露糖受体(MR)在精卵融合中的作用。方法用亲合层析法分离纯化的人精子甘露糖受体来免疫Balb/c小鼠得到抗MR抗血清;用抗血清处理顶体反应后的人精子,并进行去透明带金黄地鼠卵的精子穿透实验(SPA),观察其体外受精情况。结果抗MR抗血清可抑制人精子与去透明带金黄地鼠卵的结合与穿透,使卵子的受精率下降,具剂量依赖性。结论人精子MR与精卵膜的识别与融合有关。 江澍 林典梁 江一平关键词:甘露糖受体 人精子 精卵融合 受精 阻滞和非阻滞品系小鼠次级卵母细胞基因表达水平的比较 被引量:1 2016年 目的:通过基因芯片检测阻滞品系昆明(KM)小鼠和非阻滞品系B6C3F1小鼠次级卵母细胞(MⅡ卵)基因表达差异,探讨KM小鼠植入前胚体外发育阻滞是否与母源基因表达差异相关.方法:分别收集KM小鼠和B6C3F1小鼠MⅡ卵,运用基因芯片分析和real-time PCR验证,母源基因的差异表达.结果:基因芯片检测共筛出差异表达基因995个,其中B6C3F1小鼠MⅡ卵上调基因有793个;下调基因有202个.B6C3F1小鼠MⅡ卵表达上调的基因主要与调节基因转录、蛋白质合成与转运、氧化还原、生长因子等相关.结论:KM与B6C3F1小鼠植入前胚体外发育潜能不同可能与母源基因表达差异相关. 吕俊杰 逄丽丽 程霄翔 连秀丽 初晨凤 魏建恩 王世鄂关键词:基因表达 小鼠 小鼠精子采集方法对体外受精的影响 被引量:1 2011年 目的进一步改良"双舱浮游法"采集小鼠精子,提高收获精子的前向运动率;判断自制的培养皿是否影响精子的受精功能和发育潜能。方法自制简易的双舱培养皿;同一只小鼠的两侧附睾,分别用"常规浮游法(A法)"和"双舱浮游法(B法)"采精,左、右两侧的附睾尾交替地用两种方法采精,同时取5例做体外受精,并统计受精率。数据进行配对t检验,统计两种方法收获精子的前向运动率和受精率的差异。结果两种方法得到的平均前向运动精子百分率分别为(68.54±8.176)%(CV 11.93%)和(85.38±4.073)%(CV 4.77%),组间有高度显著性差异;两种方法的平均受精率分别为(62.44±11.41)%(CV 18.27%)和(83.39±13.59)%(CV 16.30%),组间有显著性差异。结论改良的"双舱浮游法"不仅可以获得稳定的高前向运动率的精子,还可使受精率显著提高,为需要高活率精子的相关研究提供一个简便的精子采集技术。 张艳 江一平关键词:精子能动性 精子 附睾 甘露糖受体家族 被引量:5 2005年 唐小蕾 江一平关键词:甘露糖 磷脂酶A2 5-氮脱氧胞苷及曲古抑菌素A影响供核细胞H19基因表达的时间依赖性及浓度依赖性 2008年 目的:探讨甲基转移酶抑制剂——5-氮脱氧胞苷(5-aza-2′-deoxycytidine,5-aza-dC)和组蛋白去乙酰基酶抑制剂——曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)影响供核细胞H19基因表达的时间依赖性和浓度依赖性。方法:用不同浓度5-aza-dC及TSA按不同作用时间处理供核细胞(鼠尾尖成纤维样细胞),利用实时定量PCR法检测处理后H19基因的表达。结果:不同浓度的5-aza-dC处理组之间H19的表达无明显差异,但延长作用时间可使H19表达增强;TSA使H19的表达下降,但无时间依赖性。结论:长时间低浓度的5-aza-dC能增强供核细胞中H19基因的表达,而TSA则使H19的表达减弱,为体细胞克隆中表观遗传修饰抑制剂的选择及后续基因印迹研究提供了依据。 杨晓煜 姚建凤 黄燕芳 张更 徐榕清 郑鸣关键词:甲基转移酶抑制剂 组蛋白脱乙酰基酶抑制剂 5-AZA-DC TSA 供核细胞