北京协和医学院药物研究所药物靶点研究与新药筛选北京市重点实验室
- 作品数：79 被引量：770H指数：12
- 相关作者：成银霞辛文妤邢程更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院药物研究所河南大学药学院烟台大学药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程生物学更多>>
- 动物类有毒中药“毒”的历史认识及现代研究被引量：19
- 2019年
- 动物类中药是我国传统中药的重要组成部分。古代中医药学者已经认识到动物类有毒中药的毒性成分同时也是其有效成分,并采取配伍、炮制、制剂等方法达到减毒增效的目的。现代研究发现,各种动物毒素是引起动物类有毒中药毒性的物质基础。动物毒素包括结构和功能丰富多样的蛋白质和多肽等活性物质,不同的动物毒素生物效应也不同。该文通过系统查阅土鳖虫、水蛭、全蝎、金钱白花蛇、斑蝥、蜈蚣、蕲蛇和蟾酥等8种动物类有毒中药的历史记载和现代毒性研究报道,从引起毒性反应的化学成分、分子机制以及临床表现和对策等角度进行综合评价,以期为科学认识动物类有毒中药、促进临床合理应用动物类有毒中药提供参考。
- 王诺琦张莉杨秀颖杜冠华
- 关键词：毒性物质动物毒素
- 香草酸抗血小板聚集作用的体内外研究被引量：9
- 2020年
- 目的香草酸是一种酚酸类化合物,具有抗氧化、抗炎等药理作用,其抗血栓作用尚未有报道。本实验室前期通过筛选发现香草酸具有良好的抗血小板聚集作用,因此本研究通过体内外实验对香草酸抗血小板聚集的作用进行系统评价。方法采用花生四烯酸(arachidonic acid,AA)、二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)、凝血酶(thrombin,THR)诱导体内外血小板聚集模型,结合凝血四项检测评价香草酸抗血小板聚集及抗血栓的作用。结果体外实验中,香草酸对ADP和AA诱导的血小板聚集具有显著抑制作用,并剂量依赖性抑制ADP诱导的血小板聚集;体内试验中,香草酸(10、30和100 mg/kg)能够剂量依赖性抑制ADP和AA诱导的血小板聚集;同时,香草酸(100 mg/kg)能显著降低纤维蛋白原、增加凝血酶原时间,对活化部分凝血活酶时间和血浆凝血酶时间无明显影响。结论本研究首次发现香草酸对ADP和AA诱导的血小板聚集具有抑制作用,为研发具有自主知识产权的抗血小板聚集药物提供了实验依据。
- 孔令雷王海港刘成娣张森刘楠楠马国栋杜冠华
- 关键词：香草酸血栓性疾病血小板聚集
- 山柰酚对LPS诱导小鼠急性肾损伤作用及机制探讨被引量：16
- 2020年
- 目的研究山柰酚(KAE)对脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肾损伤的作用及其机制。方法BALB/c小鼠随机分为正常对照组、LPS模型组、KAE 25、50、100 mg·kg-1药物处理组。KAE给药7 d后,LPS模型组和KAE给药组腹腔注射LPS 5 mg·kg-1,6 h后取血清和肾组织进行检测。检测血清尿素氮和肌酐含量评价肾功能;ELISA法检测肾组织中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)水平;Western blot检测炎症通路相关蛋白的表达。结果与正常对照组比较,LPS模型组血清尿素氮和肌酐水平显著增高;与LPS模型组比较,KAE可剂量依赖性降低尿素氮和肌酐水平。与正常对照组比较,肾组织中炎症相关因子及蛋白IL-1β、IL-6、TNF-α、ICAM-1、P2X7、HMGB1、TLR4水平显著增高,而KAE可剂量依赖性降低肾组织促炎因子、黏附分子释放,并下调炎症通路蛋白的表达。结论KAE对LPS刺激引起的小鼠急性肾脏损伤和炎症反应具有保护作用,机制可能与下调炎症蛋白HMGB1、TLR4和P2X7受体相关。
- 程笑杨滢霖李伟瀚刘漫王月华杜冠华
- 关键词：急性肾损伤山柰酚脂多糖
- 黄连碱对异丙肾上腺素致心肌缺血损伤的保护作用
- 目的:黄连为常用中药,具有清热燥湿,泻火解毒之功效。现代研究表明,黄连具抗菌、降血糖、保护脑损伤、抗血小板聚集及抗溃疡等作用。黄连碱是从黄连中提取的异喹啉类生物碱,具有抗病毒、抗真菌、抗氧化、抑制平滑肌细胞增殖等作用。但...
- 方莲花宫丽丽郭晶王守宝王月华秦海林杜冠华
- 基于疾病与活性化合物靶点网络构建的异鼠李素抗缺血性神经损伤作用评价与验证研究被引量：2
- 2023年
- 基于网络药理学与分子对接探讨异鼠李素对缺血性神经损伤的治疗作用。采用ChEMBL、SwissTargetPrediction、DrugBank、STITCH及BindingDB数据库检索异鼠李素药理学靶点,应用DisGeNET、GenCLiP及CTD数据库检索缺血性神经损伤的疾病靶点,取交集作为异鼠李素对缺血性神经损伤的治疗靶点,并进行表型分析。将交集靶点导入STRING构建蛋白互作网络,使用Network analyser进行拓扑分析,同时应用MODE构建功能模块,并基于ClueGo对功能模块进行分析。之后应用DAVID数据库对治疗靶点进行GO及KEGG富集分析。利用Discovery Studio评价异鼠李素与核心靶点的结合活性,最后建立OGD/R损伤PC12细胞模型,采用MTT和LDH法检测细胞活力,Western blot法对AKT1、IL6和MMP2的表达进行检测。异鼠李素通过50个缺血性神经损伤相关靶点,调控细胞凋亡、转录、蛋白质磷酸化、炎症反应等生物学过程,干预PI3K-AKT信号通路、HIF-1信号通路、雌激素信号通路、肿瘤坏死因子信号通路、FoxO信号通路等多条途径发挥抗缺血性神经损伤的作用。初步阐释异鼠李素治疗缺血性神经损伤的作用,涉及多靶点、多通路,为进一步探究其药理学活性奠定理论基础。
- 张雯张森刘珊宋俊科杜冠华
- 关键词：异鼠李素分子对接
- 葛根素通过改善线粒体呼吸功能减轻血管内皮细胞氧化损伤被引量：4
- 2022年
- 本研究旨在探究黄酮类化合物葛根素对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导损伤的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的影响及其机制。采用体外培养HUVEC细胞,设立空白组、模型组(H_(2)O_(2)400μmol·L^(-1))、不同浓度葛根素组(3、10、30、100μmol·L^(-1))。采用葛根素预孵育2 h,H_(2)O_(2)损伤HUVEC细胞24 h。CCK-8法检测细胞活力,Transwell小室观察细胞迁移能力,以JC-1为荧光探针检测线粒体膜电位。O2k线粒体功能检测系统测定线粒体呼吸功能。RT-PCR实验技术分析细胞中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL^(-1)β)和白细胞介素-18(interleukin-18,IL^(-1)8)的mRNA表达水平;Western blot检测细胞焦亡相关蛋白氮端gasdermin D(N-GSDMD)、裂解天冬氨酸特异蛋白酶-1(cleaved-cysteinyl aspartate specific proteinase-1,cleaved-caspase-1)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)和嘌呤能离子通道型受体7(purinergic ligand-gated ion channel 7 receptor,P2X7R)的表达水平。结果显示,400μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)处理24 h对HUVEC细胞有明显的损伤作用,与模型组比较,葛根素能够浓度依赖性地提高细胞活力,其中30和100μmol·L^(-1)效果最为显著;葛根素能够显著降低线粒体膜电位,改善线粒体呼吸功能,抑制H_(2)O_(2)诱导的细胞迁移,降低炎性因子的表达,下调焦亡相关蛋白的表达。上述研究结果表明,葛根素能够抑制HUVEC细胞的迁移,减轻H_(2)O_(2)诱导的HUVEC氧化损伤,其机制可能与改善线粒体呼吸功能、抑制细胞焦亡有关。
- 孙姝婵龚迪菲袁天翊王守宝方莲花杜冠华
- 关键词：葛根素人脐静脉内皮细胞线粒体
- 新型非甾体抗炎药水杨酸甲酯糖苷抗神经小胶质细胞炎症作用的研究被引量：4
- 2014年
- 目的：以脂多糖（LPS）刺激小神经胶质细胞BV-2，体外模拟神经退行性疾病的炎症模型，探讨新型非甾体抗炎药水杨酸甲酯糖苷（MSL）的抗炎作用。方法：采用LPS1μg·mL-1刺激小神经胶质细胞建立炎症模型，MTT法检测MSL对BV-2细胞的毒性作用；Griess法检测MSL对LPS刺激BV-2细胞一氧化氮（NO）释放量的影响；ELISA方法检测MSL对LPS刺激BV-2细胞产生炎性因子TNF-α，IL-6的影响；WesternBlot法检测MSL对LPS刺激BV-2细胞iNOS，COX-1，COX-2蛋白表达的影响。结果：MSL在0．1～100μmol·L-1浓度范围内对BV．2细胞没有细胞毒性。MSL（2，10，50μmol·L-1）能够剂量依赖性抑制LPS诱导的BV-2细胞NO，炎性因子IL-6的释放，对TNF-α也有一定的抑制作用。MSL（2，10，50μmol·L-1）能够不同程度地抑制iNOS，COX-1，COX-2蛋白的表达。结论：MSL能够抑制小神经胶质细胞炎性相关因子的产生，以及抑制COX-1／2的表达，发挥抗炎作用。
- 马晓玮张天泰杜冠华
- 关键词：小神经胶质细胞神经炎症
- 多晶型药物的生物活性评价
- 在早期成药性评价中化合物多晶型的生物活性研究具有重要意义。首先，对有一定活性基础并具有全新结构的固体化合物，应探讨如何结合物质晶型对其吸收、分布、代谢、排泄和毒性进行体外预测。其次，对具有明确活性的难溶性固体或半固体物质...
- 方莲花何国荣王月华王守宝吕扬杜冠华
- 关键词：生物活性评价指标
- 文献传递
- 丹酚酸A对慢性脑缺血大鼠认知损伤及神经炎症的影响
- 2021年
- 目的探讨丹酚酸A(SalA)对慢性脑缺血(CCI)大鼠认知损伤及神经炎症的影响。方法采用双侧颈总动脉结扎(2VO)法建立大鼠CCI模型,术后28 d采用Morris水迷宫(MWM)筛选模型,将造模成功大鼠随机分为2VO组,2VO+SalA(5,10和20 mg·kg^(-1))组,2VO+尼莫地平组,另设假手术组作为对照。通过MWM和旷场试验观察各组大鼠的认知功能,包括学习记忆能力和探索能力;采用HE染色、Nissl染色观察大鼠皮质和海马区的病理变化;通过酶联免疫吸附实验(ELISA)和免疫组化分析检测皮质和海马区炎症因子的表达和胶质细胞的活化。结果MWM测试显示,在空间探索实验中,SalA(5,10和20 mg·kg^(-1))明显缩短CCI大鼠潜伏期(P<0.05),尼莫地平有缩短潜伏期的趋势但是效果不明显,SaLA 10和20 mg·kg^(-1)组和尼莫地平组在60 s内穿越平台所在位置的次数明显增加(P<0.05)。旷场测试显示,与模型组相比,2VO+NS组的运动总距离(P<0.01)、站立次数(P<0.01)和进入中心区域的频率(P<0.05)显著降低。HE染色显示,正常神经元数目减少,可见神经细胞脱失,细胞形态不规则排列紊乱,出现神经细胞变性坏死,SalA可以改善这一现象,效果优于尼莫地平。Nissl染色显示,SalA 20 mg·kg^(-1)和尼莫地平治疗可以显著减少CCI大鼠皮质神经元缺失(P<0.05),并且SalA 10和20 mg·kg^(-1)可以显著减少CCI大鼠海马神经元缺失(P<0.05),而尼莫地平无显著作用。ELISA检测表明,SalA治疗明显降低了CCI大鼠皮质和海马区炎症因子TNF-α,IL^(-1)β和IL-6的表达水平,而尼莫地平只对皮质区IL-6的表达具有明显降低的作用(P<0.05)。免疫组化结果显示,经SalA治疗,CCI大鼠海马和皮质区GFAP、CD68的表达被明显降低(P<0.05),而尼莫地平对2种蛋白的表达都没有影响。结论SalA可以通过降低炎症反应,减轻CCI引起的大鼠认知功能损伤。
- 杨玉娇宋俊科刘珊张森蒋楠杨海光杜冠华
- 关键词：慢性脑缺血丹酚酸A神经炎症
- 牛舌草总黄酮通过ROS/TXNIP/NLRP3抑制炎症小体活化抗心肌缺血再灌注损伤被引量：5
- 2021年
- 目的考察牛舌草总黄酮(TF)抗心肌缺血再灌注(I/R)损伤作用及其机制,探讨炎症小体活化和活性氧/硫氧还蛋白互作蛋白/NOD样受体蛋白3(ROS/TXNIP/NLRP3)通路是否参与其中。方法采用冠状动脉左前降支结扎制备小鼠I/R损伤模型。将模型制备成功的30只小鼠随机分为I/R模型组和I/R+TF(30和100 mg·kg^(-1))处理组,再灌同时给予生理盐水或TF。于再灌注24 h时,检测小鼠心功能,测定心肌梗死范围和血清心肌酶谱,心肌冰冻切片染色观察ROS水平,Western印迹法分析NLRP3炎症小体活化以及TXNIP与NLRP3相互作用的变化。结果TF 30和100 mg·kg^(-1)均可明显改善心功能,减少心肌梗死范围,降低血清心肌酶水平。另外,TF处理减少心肌炎症因子IL^(-1)β,IL-6和TNFα含量,降低心肌ROS水平。TF 30和100 mg·kg^(-1)均显著降低TXNIP、NLRP3、活化的胱天蛋白酶1和活化的IL^(-1)β,并抑制TXNIP与NLRP3相互作用。结论TF通过抑制ROS/TXNIP/NLRP3通路减轻NLRP3炎症小体活化,从而发挥抗心肌I/R损伤作用。
- 阴苏月姜瑜王丹姝燕柳艳王守宝杜冠华
- 关键词：心肌缺血再灌注损伤活性氧
