中山大学达安基因股份有限公司
- 作品数:114 被引量:473H指数:11
- 相关作者:胡守旺高旭年邱耕程罕松雷孝锋更多>>
- 相关机构:南方医科大学生物技术学院南方医科大学生物技术学院抗体工程研究所南阳理工学院张仲景国医学院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划广州市科技计划项目广州市科技攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学生物学经济管理更多>>
- 昆虫杆状病毒系统表达口蹄疫病毒3ABC基因被引量:4
- 2005年
- 以O型口蹄疫病毒为研究对象,经过RTPCP扩增得到非结构蛋白3ABC基因,克隆到转移载体pFastbacHT,将其转入含穿梭载体Bacmid的DH10Bac,与Bacmid发生位点特异性转座作用,得到3ABC的重组穿梭载体Bacmid3ABC,再将其转染昆虫细胞HiFive。PCR鉴定证实3ABC基因正确地插入到病毒基因组的多角体蛋白基因启动子下游,经过SDSPAGE和Westernblot检测,3ABC基因在昆虫细胞中表达了大小约为50kDa的蛋白条带,3ABC基因在BactoBac系统中的成功表达为建立以基因工程产品为抗原、鉴别诊断自然感染和免疫动物的方法提供了技术条件。
- 罗宝正薄清如陈金顶王伟毅程钢何蕴韶
- 关键词:口蹄疫病毒杆状病毒
- 企业会计实务中收到财政专项拨款会计处理的探讨
- 2007年
- 为了鼓励企业自主创新,国家安排专项资金支持企业研发。专项科研经费的会计处理是财务人员经常要面对的问题。本文对企业会计制度中关于收到财政拨款会计处理的规定;实务中企业会计制度与行政事业会计制度同时执行的矛盾;实务中对于财政专项拨款的收付实际进行会计处理的情况;以及财政专项拨款的核销等进行了阐述。
- 何立新
- 关键词:财政专项拨款会计处理
- 荧光聚合酶链反应检测严重急性呼吸综合征冠状病毒的方法建立及临床初步应用被引量:36
- 2003年
- 目的 建立荧光聚合酶链反应 (F PCR)检测严重急性呼吸综合征 (SARS)冠状病毒的方法 ,并探讨其临床应用价值。方法 根据公布的SARS冠状病毒基因序列 ,自行设计合成引物、探针 ,应用研制的SARSF PCR诊断试剂盒 ,检测 115份临床漱口液样本。结果 PCR扩增产物经测序证明与SARS冠状病毒基因序列完全一致。 6 7例确诊SARS患者漱口液中 4 9份为阳性 ;18例密切接触者漱口液中 8份为阳性 ;30名健康者漱口液均阴性。结论 建立的F PCR检测SARS冠状病毒方法可成为SARS筛查和早期诊断的一种快速、准确、有效的检测方法。
- 吴新伟程钢狄飚尹爱华何蕴韶王鸣周新宇何丽娟罗凯杜琳
- 关键词:严重急性呼吸综合征冠状病毒荧光聚合酶链反应传染性非典型肺炎
- 白三烯受体拮抗剂对人鼻黏膜上皮细胞黏蛋白MUC5ACmRNA表达的影响
- 2011年
- 目的探讨白三烯受体拮抗剂孟鲁司特对鼻黏膜上皮细胞黏蛋白MUC5AC mRNA表达的影响。方法取第二代培养的鼻黏膜上皮细胞分成四组:对照组、IL-1β组、白三烯受体拮抗剂+IL-1β组、白三烯受体拮抗剂组,培养24小时后通过荧光定量巢式RT-PCR检测鼻黏膜上皮细胞黏蛋白的定量表达。结果 MUC5AC mRNA的定量表达在照组为(4.32±2.53)×106拷贝/μg,白三烯受体拮抗剂组为(2.96±2.17)×106拷贝/μg,IL-1β组为(3.90±1.79)×107拷贝/μg,白三烯受体拮抗剂+IL-1β组为(5.13±2.47)×106拷贝/μg。四组中MUC5AC mRNA定量表达的差异具有统计学意义(F=21.45,P<0.01)。白三烯受体拮抗剂+IL-1β组的MUC5AC mRNA定量表达低于IL-1β组,差异具有统计学意义(t=4.57,P<0.01)。IL-1β组的MUC5AC mRNA定量表达高于对照组,差异具有统计学意义(t=4.68,P<0.01)。白三烯受体拮抗剂组和对照组比较,MUC5AC mRNA定量表达差异无统计学意义(t=1.00,P>0.05)。结论白三烯受体拮抗剂孟鲁司特降低IL-1β诱导的鼻黏膜上皮细胞黏蛋白MUC5AC mRNA的表达,对正常的鼻黏膜上皮细胞黏蛋白的表达无影响。
- 黄雪琨李源刘红张革化徐伟杰
- 关键词:白三烯受体拮抗剂黏蛋白
- 建立禽流感H7和H9亚型荧光定量PCR检测方法被引量:7
- 2010年
- 目的建立高致病性禽流感H7和H9亚型荧光定量PCR方法。方法根据禽流感病毒(avian influenzavirus,AIV)HA-H7基因和HA-H9基因分别设计特异AIV H7和H9亚型特异荧光定量PCR引物和探针,优化反应体系和反应条件,分析该试剂的敏感性、特异性、重复性等。结果经优化反应体系和反应条件后,AIV H7试剂和AIV H9试剂的敏感性达到1×104.67EID50和1×103.80EID50水平,特异性与细胞培养敏感性类似;批内和批间精密度Ct值的CV值均远小于10%,可重复性良好。结论本项目研制的AIV H7和H9亚型的敏感性、特异性、重复性均好,适合在禽流感H7和H9亚型疫情和人类疑似禽流感病例中检测使用。
- 王秋泉黄平胡守旺高秀洁杨杏芬李杰
- 关键词:流感病毒A型H7H9
- 甲型副伤寒沙门菌对喹诺酮类药耐药机制的研究被引量:3
- 2007年
- 目的探讨甲型副伤寒沙门菌对喹诺酮类药物的耐药性变异及其机制。方法药敏检测,采用VITEK-32自动微生物分析系统或纸片扩散法;基因分析,采用聚合酶链反应(PCR)法扩增含有喹诺酮类耐药决定区的gyrA、gyrB、parC和parE4个基因片段,并进行测序分析。结果3 528株甲型副伤寒沙门菌的耐药率在1999-2006年8年中上升最显著的是喹诺酮类药,其中萘啶酸由20.00%升至99.07%,培氟沙星由0升至97.37%(χ2=259.39,P<0.01;χ2=406.20,P<0.01);青霉素类也有不同程度的耐药。15株耐药菌株上述4个基因序列检测结果,gyrA基因均存在同一个突变位点,即83位氨基酸Ser→Phe突变(TCC→TTC),突变率达100%;其余3个基因未发现突变。结论甲型副伤寒沙门菌对喹诺酮类药物的耐药性严重,主要机制是喹诺酮类耐药区gyrA基因的第83位表现出高频单点突变,其耐药表型和基因突变有较高的一致性。
- 储从家胡斌孔繁林吴惠玲向秀华
- 关键词:沙门菌甲型副伤寒喹诺酮类药抗药性微生物
- 肠道病毒71型实时荧光RT-PCR检测方法的建立及临床评价被引量:3
- 2010年
- 目的利用实时荧光RT-PCR技术,并通过系统的分析性能和临床性能评价,建立一种早期快速检测肠道病毒71型(EV71)的方法。方法根据EV71基因组中编码衣壳蛋白VP1基因保守区序列设计一对引物和一条荧光探针,利用实时荧光RT-PCR技术建立了检测EV71的方法,并对扩增产物进行分析,同时进行灵敏度、特异性、精密度评价,在此基础上利用不同标本类型共1104例临床样本对本方法和RT-PCR方法进行对比分析。结果本方法可以特异性的检测EV71,而对种属相近的或引起症状相似的其他病毒均无交叉反应。本方法检测灵敏度达到9.22×102PFU/ml,不同浓度样本的Ct值的变异系数在1.4%~2.9%之间。1104例临床样本的研究显示本方法与RT-PCR方法检测结果的总符合率达到96.74%,阳性样本的检出率要高于RT-PCR方法。结论本方法检测EV71具有灵敏度高、特异性强、精密度高、快速简便的特点,并与RT-PCR方法具有很好的符合率,在手足口病的早期快速诊断和疫情监测方面具有很好的应用前景。
- 朱坤高秀杰邓中平徐伟文高旭年李明
- 关键词:肠道病毒71型实时荧光RT-PCR性能评价
- 深圳龙华地区β-地中海贫血基因型与红细胞参数分析被引量:4
- 2020年
- 目的分析深圳市龙华地区最新β地中海贫血(地贫)携带(患)者基因型分布特点,并全面探讨该地区不同基因型的β地贫携带(患)者的血液学特征。方法以怀疑地贫就诊者为研究对象,采用PCR-流式荧光杂交法进行β地中海贫血基因突变检测,采用血细胞分析仪检测红细胞计数(RBC)、血红蛋白浓度(HGB)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞分布宽度(RDW)等血液学参数;采用毛细血管电泳法检测血红蛋白亚型(HbA、HbA2和HbF)比率。并对14岁以上不同基因型组红细胞及血红蛋白参数进行t检验统计分析。结果从4 983例怀疑地贫就诊者标本中,检出400例β地中海贫血,检出率为8.03%。最常见3种基因型为CD41-42/N(137,34.25%)、IVS-II-654/N(122,30.50%)、CD17/N(56,14.00%)。β-地中海贫血患者血液学参数主要表现为HGB、MCV、MCH降低,即红细胞呈小细胞、低色素形态。与正常人参考值相比,男性β^0/β^N与β^+/β^N基因型的RDW和HbA2更高,女性β^0/β^N与β^+/β^N基因型MCV、MCH、MCHC更低,而RDW和HbA2更高,βE/β^N与β^0/β^N和β^+/β^N基因型在MCV、MCH、MCHC、RDW、HbA和HbA2参数上更接近正常人参考值,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论深圳市龙华区β地贫基因突变最常见类型为CD41-42/N、IVS-II-654/N和CD17/N基因型,不同性别不同基因型的β地贫拥有其独特的血液学特征,可用于辅助不同类型地贫的参考鉴别。
- 刘运洪崔晓阳魏晓珠汪宇婴张婧惟苏维吴文权孙平姜孝新
- 关键词:Β-地中海贫血基因型红细胞参数
- 未婚人流青少年生殖道解脲脲原体和沙眼衣原体初步检测结果分析
- 目的:初步了解未婚人工流产青少年生殖道解脲脲原体(UU)和沙眼衣原体(CT)的感染率及其与年龄分布的关系。方法:对来院要求行人工流产的未婚女青少年按照年龄分为A、B两组,A组年龄<20岁或=20岁,共计63例,B组...
- 秦君璞张帝开程钢
- 关键词:未婚青少年解脲脲原体沙眼衣原体微生物学检验
- 体外诊断试剂临床试验方案的设计要求被引量:1
- 2016年
- 随着体外诊断技术的不断发展,越来越多的新技术被应用于体外诊断试剂。新型体外诊断试剂若要面向市场,得到临床应用,均要通过临床试验(少数特殊类型可以免临床),只有临床试验验证合格的试剂盒,才能最终被食品药品监督管理部门批准注册,走向市场。
- 王嘉明雷孝锋李尔华高旭年
- 关键词:体外诊断试剂药品监督临床试验机构试剂盒技术审评