华盛顿特区乔治敦大学 作品数:6 被引量:6 H指数:1 相关机构: 苏州大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省高校自然科学研究项目 长江学者和创新团队发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 艺术 文学 更多>>
世纪之交的印度电影 被引量:5 2010年 即便是到印度来搜奇览胜的最普通的观光客,说起这个国家以超过12种语言、年产上千部影片的电影业态的产能,也不免要咂舌称奇。而大多数并不深谙个中玄妙的评论者则会罗列出一大堆极受大众欢迎但却鲜有批评价值的东西,不合情理的情节转折、过多的传奇剧式的事件、吵闹的歌舞场面、冗长乏味的叙事。 拉利萨.高普兰 五七关键词:印度电影 评论者 传奇剧 观光 大众 辐射敏感性新基因UHRF1真核表达载体的构建及鉴定 2011年 目的构建UHRF1的真核表达载体,并验证其在乳腺癌细胞MDA-MB-231中的表达。方法采用RT-PCR方法,从乳腺癌细胞MCF-7的总cDNA中扩增出2.3kb的UHRF1基因的cDNA片段,经限制性内切酶KpnⅠ与XhoⅠ双酶切,定向克隆到真核表达载体pcDNA3中,构建重组质粒pcDNA3(+)-UHRF1,利用限制性内切酶双酶切分析和DNA序列分析鉴定重组质粒;构建成功的重组质粒,经脂质体Lipofactamin2000介导转染MDA-MB-231细胞,G418筛选阳性克隆,以RT-PCR和Western blot检测UHRF1的mRNA和蛋白的表达。结果获得全长约为2.3kb的UHRF1基因片段;重组质粒经限制性内切酶XhoⅠ和KpnⅠ酶切、电泳后显示2.3kb的UHRF1目的片段和5.4kb的pcDNA3载体片段,即UHRF1基因的cDNA已正确克隆到真核细胞表达载体pcDNA3中;UHRF1转染乳腺癌MDA-MB-231细胞后的RT-PCR和Western blot的结果显示:UHRF1的mRNA和蛋白水平均呈现高表达。结论成功构建UHRF1基因的真核表达载体,为进一步研究该基因的功能奠定基础。 李新莉 孟庆慧 朱然 朱巍 樊赛军关键词:基因克隆 真核表达载体 脂质体 UHRF1对人乳腺癌细胞MDA-MB-231辐射敏感性的影响及作用机制 被引量:1 2010年 目的 了解基因UHRF1的不同表达水平对乳腺癌细胞MDA-MB-231辐射敏感性的影响及潜在的作用机制.方法 利用克隆形成实验观察细胞存活;流式细胞术测定细胞周期;利用DNA片段分析和Annexin V试剂盒测定细胞凋亡;Western blot测定蛋白表达变化;利用经典的染色体分析,观察染色体畸变(着丝粒环和双着丝粒).结果 与对照相比较,UHRF1转染可将D0值由2.08 Gy提高至3.17 Gy,即降低MDA-MB-231细胞对X射线的辐射敏感性.利用siRNA抑制UHRF1的表达,可将X射线照射后细胞的生存率由41%降低至17%,即增强了细胞的辐射敏感性.UHRF1的高表达,可诱导G2/M期阻滞,抑制细胞凋亡,下调促凋亡蛋白Bax,上调DNA损伤修复蛋白Ku70和Ku80的表达水平,而且,抑制X射线诱导的染色体畸变.结论 UHRF1的高表达可以抑制细胞凋亡,促进DNA损伤修复.因此,通过抑制UHRF1的表达,可作为临床提高乳腺癌放疗疗效的新靶标. 李新莉 孟庆慧 Eliot M Rosen 樊赛军关键词:乳癌 增加UHRF1的表达降低乳癌细胞的放射敏感性 2008年 为了了解基因UHRF1(ubiquitin-like,containing PHD and RING finger domains,1)基因对乳癌细胞的生长、增殖和辐射敏感性的影响,将全长UHRF1基因的cDNA克隆至真核表达载体pcDNA3中,通过脂质体介导转染入乳癌细胞MDA-MB-231,筛选出UHRF1高表达的细胞株。借助生长曲线、集落形成实验,研究基因转染细胞的生长、增殖能力;通过γ射线辐照后的集落形成实验,观察基因转染对细胞辐射敏感性的影响。实验结果显示,与MDA-MB-231母细胞和转染了pcDNA3"空"质粒的MDA-MB-231/pcDNA3细胞相比,转染有UHRF1基因的MDA-MB-231/UHRF1细胞的生长率和克隆形成率都未有明显改变,但细胞的辐射敏感性明显降低,这些结果首次揭示人类UHRF1基因的表达水平并不影响乳癌细胞MDA-MB-231的生长和增殖能力,但可以调节其辐射敏感性,具体机制有待进一步深入研究。 李新莉 樊赛军关键词:乳癌 稳定转染 细胞生长