国家高技术研究发展计划(2003AA205022)
- 作品数：14 被引量：47H指数：4
- 相关作者：伍津津鲁元刚朱堂友杨涛杨桂红更多>>
- 相关机构：第三军医大学大坪医院第三军医大学西南医院重庆医科大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划重庆市科技攻关计划重庆市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 培养基钙浓度对复方壳多糖组织工程皮肤基底膜构建的形态学研究被引量：7
- 2007年
- 目的寻找最适于组织工程皮肤生长及基底膜构建的体外培养基钙浓度。方法按照鲁元刚等建立的方法制备复方壳多糖组织工程皮肤,根据培养基钙浓度不同,分为1.00、1.45、1.65和1.95mmol/L四组。在37℃、5%CO2及90%以上湿度孵箱内浸没培养3d后,将培养物置于不锈钢筛网上进行气-液界面三维培养,每天换液1次。培养7、15d,行HE、PAS染色观察组织工程皮肤的组织学特性;并利用免疫组织化学染色对基底膜的主要成分——型胶原进行观察,评价基底膜构建情况。结果各组组织工程皮肤组织学观察类似正常皮肤,有分化良好的表皮和致密真皮,但1.95mmol/L组表皮分化较其他组更好;1.00、1.45及1.65mmol/L组角化层外侧常伴未角化的角质形成细胞,1.95mmol/L组表皮细胞角化完全,且与颗粒层细胞结合牢固。PAS染色显示各组真、表皮间有紫红色带状结构;免疫组织化学染色显示真皮与表皮间型胶原反应呈阳性,且1.95mmol/L组阳性反应强于1.00mmol/L组。结论钙浓度为1.95mmol/L的培养基最适合于复方壳多糖组织工程皮肤生长及基底膜构建。
- 鲁元刚伍津津雷霞张教扬朱堂友杨桂红杨涛
- 关键词：组织工程皮肤壳多糖培养基钙浓度
- 壳多糖组织工程皮肤治疗糖尿病足性溃疡被引量：7
- 2011年
- 目的比较壳多糖组织工程皮肤、亲水性敷料(多爱肤)和传统纱布对糖尿病足性溃疡治疗疗效。方法将53例糖尿病足皮肤溃疡患者随机分为多爱肤组、壳多糖组及常规治疗组,以溃疡愈合率及平均愈合时间为观察指标。结果多爱肤组愈合率与常规治疗组比较,差异有统计学意义(P<0.05);壳多糖组愈合率与多爱肤组相比,差异有统计学意义(P<0.05);常规治疗组与多爱肤组及壳多糖组比较,平均愈合时间差异有统计学意义(P<0.05),多爱肤组与壳多糖组比较,平均愈合时间无统计学差异(P>0.05)。结论多爱肤组可提高溃疡愈合率,缩短平均愈合时间;壳多糖组织工程皮肤与多爱肤相比较能显著提高溃疡愈合率。
- 吕波吴绮楠陈兵谭明红邓武权梁自文伍津津
- 关键词：多爱肤糖尿病足溃疡
- 人脐静脉内皮细胞的分离培养和冻存被引量：4
- 2006年
- 目的研究体外分离、培养、冻存人脐静脉内皮细胞的有效方法以获得大量人脐静脉内皮细胞,为构建含血管的组织工程皮肤提供种子细胞。方法新鲜脐带内灌注胶原酶消化,获得内皮细胞,用含20%胎牛血清的M199液进行培养。倒置显微镜观察细胞形态,结合Ⅷ因子免疫组化鉴定细胞来源。内皮细胞加入10%甘油的冻存液,分别置于液氮保存1周和4周,复苏后血球计数板计数,绘制生长曲线。结果脐静脉内灌注胶原酶法可获取高纯度的内皮细胞,与未冻存细胞相比,复苏的细胞活力保持在80%以上,复苏后生长曲线与未冻存细胞相似。结论脐静脉灌注酶消化法可获取大量高纯度的内皮细胞。冻存的内皮细胞复苏后仍保持较高的体外增殖能力,可作为制备含血管的组织工程皮肤的种子细胞来源。
- 周凌伍津津鲁元刚朱堂友杨亚东
- 关键词：脐静脉内皮细胞细胞冻存
- 组织工程皮肤自体及异体移植后表皮分化及重建的动物实验研究
- 2005年
- 目的研究猪组织工程皮肤移植后表皮层角蛋白分化标志的变化情况,为组织工程皮肤临床应用提供实验依据。方法按本科已建立的方法构建猪的组织工程皮肤,进行自体及同种异体移植实验,并于移植后1周、4周、8周取标本,行组织学检查和免疫组化染色,观察移植后组织工程皮肤表皮层角蛋白的表达、表皮细胞分化和重建情况。结果猪组织工程皮肤自体及同种异体移植后均存活,创面达到理想的愈合效果;组织学检查显示表皮分化良好,表皮层广谱角蛋白抗体免疫组化染色阳性;基底层以上细胞角蛋白K10抗体免疫组化染色阳性;基底层细胞角蛋白K5抗体免疫组化染色阳性。结论构建的猪组织工程皮肤自体及同种异体移植后,可获得理想的创面愈合效果,表皮分化和再构建良好,与正常皮肤相似。本实验为组织工程皮肤临床应用提供了有力的实验依据。
- 吴国选伍津津朱堂友鲁元刚毕建军雷霞
- 关键词：组织工程皮肤自体移植异体移植
- 复方壳多糖组织工程皮肤分泌b-FGF的初步研究被引量：1
- 2007年
- 目的研究组织工程皮肤培养液中碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)的分泌情况。方法收集复方壳多糖组织工程皮肤制备过程中复方壳多糖皮肤替代物(SE)、复方壳多糖真皮替代物(DE)、单层角质形成细胞(KC)以及复方壳多糖DE与KC在transwell内共培养的培养液样本,双抗体夹心ELISA法测定其中b-FGF分泌量。结果b-FGF分泌量依次为单层KC<复方壳多糖DE/KC共培养<复方壳多糖SE<复方壳多糖DE。结论角质形成细胞能调控成纤维细胞分泌b-FGF能力,有利于伤口愈合。
- 王亚洲伍津津朱堂友李元朝张民众
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子组织工程皮肤成纤维细胞角质形成细胞
- 皮肤组织工程的基础研究:三磷酸腺苷酶染色法定性及定量观察猪表皮朗格汉斯细胞被引量：3
- 2005年
- 目的:观察三磷酸腺苷ATP)酶染色的猪表皮朗格汉斯细胞密度和形(态。方法:用改良的JuhlinATP酶染色法,对小型香猪表皮进行染色,显示朗格汉斯细胞。结果:猪表皮朗格汉斯细胞为棕黑色树突状,测得猪腹部表皮的朗格汉斯细胞平均密度为750个/mm。2结论:ATP酶染色法可以对猪表皮朗格汉斯细胞进行染色,并可以定量、定性观察猪表皮朗格汉斯细胞。
- 毕建军伍津津唐书谦朱堂友吴国选杨亚东
- 关键词：郎格尔汉斯细胞皮肤生物医学工程
- 贵州小型香猪皮肤成纤维细胞库的构建被引量：12
- 2004年
- 目的:小型猪与人的皮肤组织结构相似,探索一种贵州小型香猪成纤维细胞的分离、培养、传代、冻存、复苏及鉴定方法为组织工程皮肤的构建奠定基础。方法:采用细胞培养技术和组织工程学方法。结果:采用细胞培养技术将贵州小型香猪成纤维细胞传代至23代,此时的细胞数至少是原代培养的细胞数的1×109倍,经冻存、复苏后,猪成纤维细胞仍具有增殖能力,生长状态与原代培养的猪成纤维细胞相类似。结论:通过细胞培养技术和组织工程学的方法可以成功地构建贵州小型香猪成纤维细胞库。
- 吴国选伍津津朱堂友李伟鲁元刚
- 关键词：皮肤成纤维细胞细胞培养技术冻存原代培养复苏后
- 体外构建皮肤基底膜的组织学特征被引量：1
- 2007年
- 目的观察制备的组织工程皮肤基底膜的组织学特征。方法取门诊正常儿童包皮环切术之包皮,采用胰蛋白酶胶原酶顺序消化得到角质形成细胞(KC)和成纤维细胞(Fb)悬液。制备复方壳多糖组织工程皮肤,浸没培养3 d后,继续行气液界面培养。将培养7、10、15 d的复方壳多糖组织工程皮肤用中性甲醛溶液固定后石蜡包埋、切片,行HE及高碘酸-雪夫(PAS)染色,并用免疫组织化学染色法观察基底膜的重要成分:Ⅳ型胶原、Ⅶ型胶原及层黏连蛋白(LN)的存在情况。结果HE染色可见培养的组织工程皮肤表皮结构分化良好,大致可分为基底层、棘层和角质层,各层均有数量不等的扁平梭形细胞。PAS染色显示真皮表皮间有一均匀红染的条带。免疫组织化学染色结果显示,Ⅳ型胶原、Ⅶ型胶原及LN呈阳性表达。结论复方壳多糖组织工程皮肤基底膜构建良好。
- 鲁元刚伍津津张教扬杨桂红杨涛
- 关键词：壳多糖基底膜
- 复方壳多糖组织工程真皮促血管生成活性的研究被引量：4
- 2007年
- 组织工程皮肤作为皮肤替代物覆盖创面，能否有效促进血管形成一直是学术界关注的重点。为了解复方壳多糖组织工程真皮的促血管生成活性，笔者采用氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷（^3H—TdR）掺入法，对复方壳多糖组织工程真皮条件培养基促内皮细胞增生的能力进行了观察，拟为组织工程皮肤血管化的进一步研究提供实验依据。
- 周凌伍津津鲁元刚朱堂友
- 关键词：组织工程皮肤促血管生成活性复方壳多糖内皮细胞增生皮肤替代物
- 去牛血清清蛋白化对复方壳多糖组织工程皮肤单向混合淋巴细胞反应的影响
- 2008年
- 目的探索复方壳多糖组织工程皮肤去牛血清清蛋白化的洗涤方法及对其单向混合淋巴细胞反应的影响。方法从头制备复方壳多糖组织工程皮肤,ELISA法检测不同洗涤条件下外渗液中牛血清清蛋白的浓度,然后检测在最优洗涤条件下组织工程皮肤单向混合淋巴细胞反应的强度。结果当洗涤间隔时间为3h,洗涤次数为2次时能使外渗液中牛血清清蛋白的浓度降到50ng/mL以下;按该方法洗涤后,组织工程皮肤的单向混合淋巴细胞反应强度显著降低。结论复方壳多糖组织工程皮肤以3h×2次洗涤,能够显著降低其外渗液中牛血清清蛋白的浓度及其单向混合淋巴细胞反应的强度。
- 李元朝伍津津毕建军杨桂红
