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国家自然科学基金(30871087)
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内吗啡肽对糖基化终末产物致人脐静脉内皮细胞表达一氧化氮、一氧化氮合酶、内皮素1的影响
2012年
目的探讨内吗啡肽(EMs)对糖基化终末产物(AGEs)培养条件下人脐静脉内皮细胞(HUVEC)合成分泌一氧化氮(NO)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、内皮素1(ET-1)的影响。方法体外制备AGEs修饰的牛血清白蛋白(AGEs—BSA);分别用AGEs—BSA、EMs(1×10-5、1×10-6、1×10-7、1×10-8mol/LEM1或EM2)+AGEs—BSA及EMs(1×10-5mol/LEMl或EM2)+纳洛酮+AGEs.BSA共同干预HUVEC,同时以只加BSA的HUVEC作为阴性对照。噻唑蓝(MTT)法检测各组HUVEC存活率;放射免疫法检测各组NO、eNOS水平;酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定各组ET-1表达量;实时荧光定量聚合酶链反应(RT—PCR)法检测各组eNOS、ET-1mRNA的表达。采用单因素方差分析及t检验进行数据统计。结果与AGEs—BSA组相比,1×10-5mol/LEM1干预组HUVEC存活率增加,NO分泌量减少[分别为0.89±0.05VS0.67±0.02和(14.8±1.4)VS(23.0±0.7)μmol/L,t值分别为9.86、13.18,均P〈0.05],ET-1产生及其mRNA表达降低[分别为(0.85±0.01)VS(0.99±0.01)μg/L和10.6±0.7VS25.6±1.6,t值分别为31.36、50.18,均P〈0.05],eNOS活性及其mRNA表达增加[分别为(2.53±0.20)VS(0.61±0.09)U/ml和0.35±0.00VS0.05±0.00,t值分别为21.50、16.80,均P〈0.05],EM1其他浓度组和EM2各浓度组上述各指标与AGEs—BSA组比较结果相似,差异亦均有统计学意义(t值为2.24~102.4,均P〈0.05);纳洛酮组上述指标与AGEs—BSA组差异无统计学意义(t值为0.56—2.05,均P〉0.05),而与各浓度EM1或EM2干预组差异有统计学意义(t值为2.24~64.96,均P〈0.05)。结论EMs可提高AGEs—BSA条件下HUVEC的存活率,降低NO、ET-1浓度,提高eNOS浓度;纳洛酮可阻断EMs的上述作用,提示EMs是通过μ阿片受体发挥作用的。
刘静
闫立萍
魏素虹
许衍甲
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糖基化终末产物
内吗啡肽
一氧化氮
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