福建省教育厅资助项目(JB09035)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：陈清霞宋芬芬江贤章黄建忠刘锦清更多>>
- 相关机构：福建师范大学更多>>
- 发文基金：福建省教育厅资助项目国家自然科学基金福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 一种快速提取裂殖壶菌基因组DNA的方法
- 2011年
- 研究建立快速有效提取裂殖壶菌基因组DNA的方法。以裂殖壶菌Schizochytrium sp.FJU-512为试验材料,比较了十六烷基三乙基溴化铵(cetyltriethylammnonium bromide,CTAB)法、十二烷基硫酸钠(Sodium dodecyl sulfate,SDS)法、SDS快速法和裂解法4种DNA提取方法在裂殖壶菌中的提取效果。4种方法均能从裂殖壶菌中提取到长度大约为23Kb的DNA片段,不同的提取方法获得的DNA产量存在明显差异。运用真菌18S rDNA通用引物和β-酮脂-酰基ACP合酶(beta-ketoacyl[ACP]synthase,KS)引物分别PCR扩增均能得到目的片段。结论:CTAB法提取DNA的效率更高、操作步骤快速简单,适用于一次微量提取多个样品的基因组DNA。
- 刘锦清陈清霞江贤章
- 关键词：裂殖壶菌基因组DNA
- 毛霉△^6-脂肪酸脱氢酶随机突变文库的构建与分析被引量：1
- 2011年
- 毛霉Mucor sp.EIM-10△6-脂肪酸脱氢酶是γ-亚麻酸合成途径的关键酶。为提高脂肪酸脱氢酶的活性以及研究该酶一级结构对酶活性的影响,利用易错PCR对毛霉△6-脂肪酸脱氢酶基因(mcd6)进行随机突变,将PCR产物与大肠杆菌-酿酒酵母穿梭表达载体PYMD6PMCD6连接,获得随机突变质粒PYTBMCD6,转化酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae,构建了原始库容为4.6×104 CFU的△6-脂肪酸脱氢酶的随机突变表达文库。随机突变表达文库的构建与分析为定点突变等酶蛋白的理性设计奠定基础。
- 宋芬芬江贤章陈清霞黄建忠
- 关键词：易错PCR随机突变毛霉Γ-亚麻酸
