国家自然科学基金(30570726)
- 作品数：14 被引量：23H指数：3
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- 脂氧素与免疫调节研究进展
- 2008年
- 周晓燕
- 关键词：脂氧素免疫介质免疫细胞
- 脂氧素对粒细胞集落刺激因子表达的影响及其机制初探
- 2007年
- 体外培养小鼠巨噬细胞RAW264．7，实验分为空白组、脂多糖（LPS）组（1mg／L LPS）及脂氧素A4（LXA4）处理组（1mg／L LPS与0．1～1000nmol／L LXA4共同温育）。处理预设时间后，实时荧光定量聚合酶链反应和酶联免疫吸附实验分别检测粒细胞集落刺激因子（G—CSF）基因表达和蛋白质分泌水平，免疫印迹法检测IχBα。降解和NF—χB转位情况，荧光素酶报告质粒检测NF-χB转录活性。结果表明：LPS诱导G—CSF表达（P〈0．01），LXA4抑制G-CSF基因表达和蛋白质分泌，其中10nmol／LLXA4作用最明显（抑制率为39．8％）（P〈0．01）；10nmot／L LxA4明显抑制IχB。降解（P〈0．05）、NF-χB转位（P〈0．05）以及LNF-χB的转录活性（P〈0．05）。这提示LXA4可能通过抑制NF-χB的转位和转录活性而抑制LPS诱导RAW264．7巨噬细胞分泌G—CSF。
- 周晓燕张力吴萍熊维李咏生叶笃筠
- 关键词：脂氧素粒细胞集落刺激因子脂多糖巨噬细胞
- 脂氧素A_4对Jurkat T细胞游离钙浓度变化及增殖的影响
- 2006年
- 目的研究脂氧素A4(LXA4)对Jurkat T细胞内游离钙离子浓度变化及细胞增殖的影响。方法钙离子荧光探针Fluo-3/AM负载细胞后,用激光共聚焦扫描显微镜动态检测活细胞内游离钙离子浓度的变化;CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况,并结合流式细胞仪进行细胞周期分析。结果①采用含钙细胞外液时,LXA4降低正常Jurkat T细胞内游离钙离子浓度,而用无钙细胞外液时,细胞内游离钙离子浓度下降不明显;②LXA4呈剂量依赖性抑制钙池操纵钙通道(SOC)激活剂thapsigargin(TG)引起的Jurkat T细胞内游离钙离子浓度的增高,100 nmol/L LXA4也能抑制抗CD3单抗(a-CD3)引起的细胞内钙离子浓度的增高,SOC阻滞剂2-Aminoethoxydiphenylborate(2-APB)能显著抑制TG引起的钙内流;③LXA4呈剂量依赖性抑制a-CD3和抗CD28单抗(a-CD28)诱导的Jurkat T细胞增殖,细胞周期分析发现LXA4阻止Jurkat T细胞由G1期进入S期,降低S期细胞比例、细胞增殖指数(P I)和DNA含量。结论LXA4可能通过抑制Jurkat T细胞钙池操纵的钙通道引起的胞质内游离钙浓度的升高而抑制其增殖。
- 熊维吴萍张力周晓燕李咏生叶笃筠
- 关键词：脂氧素A4JURKATT细胞细胞增殖
- 脂氧素A_4对脂多糖诱导巨噬细胞氧化损伤的影响被引量：1
- 2009年
- 为了研究脂氧素(LXs)是否具备拮抗脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞氧化损伤的作用,本文分别通过MTT法观察脂氧素A4(LXA4)对LPS损伤巨噬细胞活力的影响;流式细胞术检测活性氧(ROS)生成水平;试剂盒检测细胞内丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的生成量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的酶活性变化。结果表明LXA4可以提高LPS处理巨噬细胞的活力;减少ROS、NO、MDA的生成量;抑制iNOS的活性而增强SOD、GSH-Px、CAT抗氧化酶的活性。由些可见,LXA4可以通过抑制ROS及NO产生的同时增强抗氧化酶的活性而拮抗LPS所致的巨噬细胞氧化损伤。
- 周晓燕徐方云蔡震宇王红梅祝子瑞吴萍叶笃筠
- 关键词：脂氧素脂多糖活性氧
- 脂氧素对PMMA骨水泥诱导的巨噬细胞炎症反应的影响被引量：1
- 2007年
- 目的:观察脂氧素对PMMA骨水泥微粒刺激的巨噬细胞炎症反应的影响。方法:利用PMMA骨水泥刺激的RAW264.7小鼠巨噬细胞株为模型,用四唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖情况,采用细胞内Ca2+特异性荧光探针Fluo3/AM标记,用激光共聚焦显微镜动态观察胞内游离Ca2+浓度变化,ELISA试剂合检测细胞分泌的TNF-α,IL-1,IL-10水平。结果:PMMA骨水泥微粒成剂量依赖性促进细胞的增殖(P<0.05),而100nM脂氧素对此具有显著抑制作用(P<0.01);脂氧素可显著降低PMMA骨水泥微粒诱发的胞内Ca2+增加;同时,分别对促炎介质TNF-α、IL-1和抗炎介质IL-10的分泌具有负性和正性调节作用(P<0.05)。结论:在细胞水平,脂氧素对PMMA骨水泥微粒刺激的巨噬细胞炎症反应具有明显的负性调节作用。
- 李钢吴萍周媛媛黄梦玉史峰叶笃筠
- 关键词：脂氧素
- 脂氧素A4对脂多糖活化小鼠巨噬细胞NF-κB和TNF-α转化酶的影响
- 2007年
- 目的 研究脂氧素A4（LXA4）对脂多糖（LPS）活化的小鼠巨噬细胞NF-κB及TNF-α转化酶的影响。方法 小鼠RAW 264．7巨噬细胞株培养于细胞培养板,随机分为空白对照组、LPS处理组（LPS 1μg/ml）和LPS＋LXA4组（LPS 1μg/ml＋LXA4 10^-7mol/L）。酶联免疫吸附法测定上清液TNF-α水平,提取细胞总蛋白,Western blot法测定NF-κB p65、IκB-α及TNF-α转化酶含量,荧光素酶报告质粒测定NF-κB活性。结果 LXA4抑制LPS活化的RAW 264．7巨噬细胞IκB-α降解、NF-κB p65核转位及NF-κB活性,同时抑制TNF-α蛋白表达和上调TNF-α转化酶蛋白表达。结论 LXA4通过抑制NF-κB活性和下调TNF-α转化酶表达而减少LPS活化的RAW264．7巨噬细胞分泌TNF-α。
- 金胜威张力叶笃筠吴萍周晓燕熊维姚尚龙
- 关键词：脂氧素类脂多糖类NF-ΚB金属蛋白酶类
- 脂氧素对巨噬细胞表面免疫抑制分子和共刺激分子表达的影响被引量：3
- 2007年
- 目的研究脂氧素A4(LXA4)对RAW264.7巨噬细胞免疫功能的影响。方法体外培养小鼠RAW264.7巨噬细胞,分为空白对照组、脂多糖(LPS)组和LXA4组。各组处理预设时间后,RT-PCR检测PIR-A和PIR-B基因表达水平,总一氧化氮检测试剂盒检测一氧化氮含量,流式细胞仪检测细胞表面MHC-Ⅱ分子、CD80(B7-1)、CD86(B7-2)的表达量。结果LXA4显著上调PIR-B,而几乎不影响PIR-A的基因表达水平;明显促进一氧化氮分泌(P<0.01);抑制LPS活化巨噬细胞表达MHC-Ⅱ和CD86(P<0.05),但对CD80的表达无明显影响(P>0.05)。结论LXA4促进巨噬细胞表达免疫抑制分子PIR-B和一氧化氮,抑制巨噬细胞的抗原提呈能力。
- 周晓燕张力吴萍熊维李咏生叶笃筠
- 关键词：脂氧素一氧化氮共刺激分子
- 脂氧素A_4通过抑制Jurkat T细胞钙池操纵的钙通道电流而抑制其激活和增殖被引量：3
- 2007年
- 目的通过研究脂氧素A4（LXA4）对Jurkat T细胞内游离钙离子浓度变化、钙池操纵的钙通道电流（Isoc）及细胞激活和增殖的影响，初步探讨其对T细胞的调节作用及机制。方法钙离子荧光探针Fluo-3／AM负载细胞后，用激光共聚焦扫描显微镜技术动态检测活细胞内游离钙离子浓度的变化；全细胞膜片钳技术记录Isoc；ELISA测IL-2水平；3^H-TdR掺入法测细胞增殖情况，并结合流式细胞仪进行细胞周期分析。结果（1）用含钙细胞外液时，LXA4降低正常Jurkat T细胞内游离钙离子浓度，而用无钙细胞外液时则无显著差异；（2）LXA4呈剂量依赖性抑制钙池操纵的钙通道（SOC）激活剂thapsigargin（TG）引起Jurkat T细胞内游离钙浓度的增高，100nmol／L LXA4也能抑制anti-CD3或植物血凝素（PHA）引起的细胞内钙离子浓度的增高，SOC阻滞剂2-aminoethoxydiphenylborate（2-APB）能显著抑制TG引起的钙内流；（3）膜片钳结果显示，LXA4抑制正常Jurkat T细胞Isoc，TG能显著增大Isoc，而LXA4呈剂量依赖性抑制TG引起的Isoc的升高；（4）LXA4剂量依赖性抑制anti-CD3和anti-CD28诱导的Jurkat T细胞IL-2表达及细胞增殖，细胞周期分析发现LXA4阻止Jurkat T细胞由GI1期进入S期，降低S期细胞比例。结论LXA4可能通过抑制Jurkat T细胞Isoc引起的胞质内游离钙离子浓度的升高而抑制其激活和增殖。
- 熊维李天张临洪张力吴萍周晓燕李咏生叶笃筠
- 关键词：脂氧素A4JURKATT细胞膜片钳
- 脂氧素对Jurkat T细胞增殖和白细胞介素-2／白细胞介素-2受体表达的影响被引量：5
- 2008年
- 目的:研究脂氧素对JurkatT细胞增殖和白细胞介素-2表达的影响。方法:体外培养JurkatT细胞,anti-CD3(2mg/L)和anti-CD28(2mg/L)单抗刺激Jurkat细胞活化,加入不同浓度脂氧素(0.1nmol/L-100nmol/L)共同孵育24h后,加入[3H]-TdR继续孵育6h,液闪仪测放射性活度;或收集培养上清,ELISA测IL-2水平,收集细胞,流式细胞仪检测细胞表面IL-2受体α亚单位CD25表达,PI染色后经流式细胞仪进行细胞周期分析。结果:脂氧素剂量依赖性抑制anti-CD3和anti-CD28活化的Jurkat T细胞增殖(P<0.05);细胞周期分析发现脂氧素处理组S期细胞比例减少;脂氧素显著降低培养上清中IL-2含量(P<0.05)但对CD25表达无明显影响(P>0.05)。结论:脂氧素能抑制活化Jurkat T细胞增殖和白细胞介素-2表达;脂氧素可通过影响T淋巴细胞的活化增殖进而发挥免疫负性调节作用。
- 张力吴萍万敬员周晓燕熊维袁萍李咏生叶笃筠
- 关键词：脂氧素白细胞介素2
- 钙池操纵的钙通道的调控机制被引量：3
- 2007年
- 钙池操纵的钙通道(store-operated calciumchannel,SOC)系存在于细胞膜表面的一种新发现的钙通道,它是非兴奋性细胞Ca2+内流的主要通道。SOC的开启是由钙库耗竭所激发,然而,钙库耗竭如何开启SOC仍不十分清楚。文章综述了SOC开启调控机制的有关研究进展。
- 李咏生喻研叶笃筠
- 关键词：钙通道
