国家自然科学基金(31172378)
- 作品数：11 被引量：55H指数：5
- 相关作者：田文儒曹荣峰李华涛丛霞张倩更多>>
- 相关机构：青岛农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金更多>>
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- 酶消化组织块法体外培养奶牛乳腺上皮细胞被引量：5
- 2016年
- 建立稳定培养奶牛乳腺上皮细胞系的方法。结合酶消化法和组织块法,在体外进行分离培养奶牛乳腺上皮细胞,利用胰酶消化进行纯化和传代。通过倒置显微镜观察、细胞爬片姬姆萨染色和角蛋白18免疫组织化学方法对培养的细胞进行形态学观察和鉴定。观察发现,细胞排列紧密,呈多角形或梭形,长满后呈铺路石样。胞核呈圆形或椭圆形,核仁清晰可见,多为3～5个。通过细胞角蛋白18免疫组织化学方法对乳腺上皮细胞进行鉴定,呈阳性反应。获得的乳腺上皮细胞增殖旺盛,培养至40代生长活性仍然稳定。酶消化组织块法成功培养出奶牛乳腺上皮细胞,是分离乳腺上皮细胞的一种有效方法。
- 杨文浩朱丽萍齐晓楠张倩任婷婷李华涛丛霞曹荣峰田文儒
- 关键词：酶消化组织块乳腺上皮细胞奶牛
- 黄芩苷对热应激条件下LLC-PK1细胞HSP70表达的影响被引量：3
- 2015年
- 为了探讨不同浓度黄芩苷对热应激条件下猪肾小管上皮(LLC-PK1)细胞HSP70表达的影响,筛选出黄芩苷诱导热应激条件下细胞HSP70表达的最佳浓度。将培养的LLC-PK1细胞随机分为7个组,Ⅰ组为37℃常温对照组,Ⅱ组为42℃单纯热应激组,Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组和Ⅶ组分别为42℃热应激并用不同浓度黄芩苷(0.01~100μg/m L)处理组,运用实时荧光定量PCR和Western Blot检测HSP70 m RNA及蛋白的表达。结果显示,42℃单纯热应激能显著诱导LLCPK1细胞HSP70的表达;一定浓度范围内的黄芩苷(0.1~10μg/m L)处理的LLC-PK1细胞HSP70表达显著高于42℃单纯热应激;黄芩苷(0.01~100μg/m L)能显著上调热应激条件下LLC-PK1细胞HSP70的表达,且1μg/m L的黄芩苷上调效果最显著。
- 迟世凯孙春玲李华涛丛霞姜忠玲王新曹荣峰田文儒
- 关键词：黄芩苷LLC-PK1热应激HSP70
- 犊牛睾丸生殖干细胞与支持细胞体外共培养体系的建立被引量：2
- 2015年
- 旨在建立牛雄性生殖干细胞(mGSCs)-支持细胞(SCs)体外共培养体系,并比较不同密度SCs共培养mGSCs的效果。分离、培养mGSCs和SCs并鉴定,然后在密度不同的SCs上共培养mGSCs,观察细胞形态、统计mGSCs集落数、测定两种细胞特异基因的相对表达量。结果表明,培养的mGSCs具有与小鼠mGSCs相同的形态特征,AKP染色细胞克隆阳性,各培养体系均表达SCs和mGSCs特异基因SCF、OCT-4;低密度SCs(225个/cm2)培养mGSCs比中密度(1 300个/cm2)和高密度(5 600个/cm2)培养mGSCs效果好:mGSCs集落纯度、体积较大;mGSCs集落比例显著(P<0.05)和极显著增高(P<0.01);mGSCs特异基因表达量均极显著增高(P<0.01)。说明建立睾丸干细胞体外共培养体系时,采用较低密度的支持细胞共培养可获得理想的睾丸生殖干细胞。
- 张倩齐晓楠杨文浩丛霞李华涛曹荣峰田文儒
- 关键词：睾丸支持细胞共培养集落
- 黄芩苷黄芩素小檗碱对LLC-PK1细胞炎症模型中TNF-α IL-1β及IL-6表达的影响被引量：5
- 2015年
- 研究中药黄芩苷、黄芩素、小檗碱对细菌脂多糖(LPS)诱导的猪肾小管上皮细胞(LLC-PK1)中肿瘤坏死因子-α(TNG-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及白细胞介素-6(IL-6)表达的影响。用噻唑蓝比色法(MTT法)筛选LPS、黄芩苷、黄芩素和小檗碱对细胞作用的最佳浓度,用RT-PCR检测TNF-α、IL-1βmRNA表达,以确定细胞炎症模型是否建立成功;炎症模型建立后,用最佳浓度的黄芩苷、黄芩素和小檗碱分别作用细胞24h,用qPCR检测TNF-α、IL-1β及IL-6mRNA的表达量。结果LPS刺激组细胞TNF-α、IL-1βmRNA表达量极显著高于正常对照组(P<0.01),黄芩苷、黄芩素和小檗碱作用组细胞TNF-α、IL-1β及IL-6mRNA表达量比LPS刺激组显著降低(P<0.05),与对照组无显著差异(P>0.05)。上述结果表明,黄芩苷、黄芩素和小檗碱通过抑制炎症细胞TNF-α、IL-1β及IL-6 mRNA的表达,从而发挥抗炎作用。
- 任浩文丛霞李华涛姜忠玲王新曹荣峰田文儒
- 关键词：TNF-ΑIL-1Β黄芩苷黄芩素小檗碱
- JNK介导的细胞凋亡被引量：7
- 2015年
- JNK介导细胞凋亡的作用与多种疾病的发生有关,因此有关JNK促细胞凋亡分子机制的研究不断深入。本文综述了与JNK介导细胞凋亡相关的多种疾病并概括了JNK促细胞凋亡的主要的上游激活物和下游分子信号途径,同时根据近年来研究热点,强调了Hsp72作为JNK天然抑制剂对于抑制JNK信号通路激活的重要性。JNK又称为应激活化蛋白激酶,在应激条件下JNK激活,进而引发细胞凋亡等生理变化,从而对机体产生不利影响。而在畜牧养殖生产中,环境等的应激因素往往是不可避免的,因而减少应激以及应激时细胞内JNK的激活将有利于经济动物的健康生长,明确JNK的促凋亡机制并寻求且充分利用其有效的天然抑制剂对于疾病治疗以及畜牧经济发展具有重要意义。
- 张倩张东君丛霞李华涛曹荣峰田文儒
- 关键词：JNK信号通路细胞凋亡
