国家自然科学基金(30400116)
- 作品数:8 被引量:125H指数:3
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- 肝干细胞——肝卵圆细胞的研究进展被引量:2
- 2005年
- 对于肝卵圆细胞的研究已有一定时间,但近几年才明确其属于干细胞范畴,笔者简要综述了肝卵圆细胞的特征、来源、调控分化及与肝病的关系。
- 甘向阳滕皋军
- 关键词:肝卵圆细胞肝干细胞
- 小鼠骨髓间充质干细胞体内定向诱导分化与治疗肝功能损伤的实验研究被引量:11
- 2007年
- 目的 观察小鼠骨髓间充质干细胞(MSC)在肝脏特定微环境下是否向具肝细胞表型与功能的细胞横向分化,并探讨其治疗肝功能损伤的可行性。方法 20只裸小鼠,随机分为4组,每组5只:A组:CCl4与橄榄油1:1混合,按1ml/kg腹腔注射,每周2次。1周后经尾静脉移植1×10^6GFP阳性MSC,术后继续注射CCl4,每周2次;B组:CCl4注射同A组,经尾静脉注入等量生理盐水;C组:正常小鼠,细胞移植同A组;D组:正常对照。术后4周处死全部受试动物,血清检测肝功能,HE、Masson染色行组织学观察,双荧光染色确认GFP阳性细胞并观察其是否表达肝细胞特异性蛋白。结果 A、B组受体肝纤维组织增生显示肝功能损伤模型制作成功,二组胶原分布百分比差异并无统计学意义(10.5±1.5vs12.7±1.6,t=-2.238,P〉0.05)。A组镜下可见GFP阳性细胞主要分布于汇管区及小叶间隔周围,部分同时表达白蛋白(35%±7%);B、C、D组镜下均未见绿色荧光细胞。A组白蛋白水平明显高于B组(24.4g/L±3.3g/Lvs18.6g/L±2.9g/L,P〈0.05),两组血清丙氨酸转氨酶(ALT)水平差异有统计学意义(121U/L±21U/Lvs192U/L±29U/L,P〈0.05)。结论 持续肝功能损伤可以有效诱导MSC向肝迁移增殖,部分MSC在肝细胞持续损伤的微环境下有向肝样细胞横向分化的潜能,提示MSC移植可以在一定程度上修复受损肝功能。
- 陆海华滕皋军居胜红孙军辉李爱梅张爱凤
- 关键词:干细胞细胞分化
- 应用硝普钠促进经门静脉移植的骨髓间充质干细胞在肝内弥散分布被引量:1
- 2007年
- 目的探讨硝普钠是否可促进经门静脉移植的骨髓间充质干细胞(MSCs)在肝内弥散分布。方法分离SD大鼠的骨髓MSCs,进行培养、传代,流式细胞仪鉴定MSCs表面标记,以Fe2O3-PLL标记供移植的MSCs。以彩色多普勒超声检查大鼠注射硝普钠后10~20min时门静脉内径及血流速度变化,并计算其血流量。受者(SD大鼠)背部皮下注射四氯化碳,制成肝损伤模型,将模型随机分为实验组和对照组,实验组经门静脉注射以Fe2O3-PLL标记的MSCs悬液0.5ml及含硝普钠的生理盐水(硝普纳的注入量为24nmol/100g),对照组仅注射Fe2O3-PLL标记的MSCs悬液0.5ml。分别于MSCs注射前及注射后3h、1周、2周、4周行磁共振扫描,测定肝脏信噪比(SNR)。最后1次磁共振扫描后,处死全部受者,取各叶肝组织,行HE染色和普鲁士蓝染色,进行组织学观察。结果分离获得的MSCs经培养、传代,高表达CD29(99.88%)和CD90(99.84%),CD45阳性细胞极少(0.130)。注射硝普钠后10-20min,大鼠门静脉内径明显扩张(P〈0.01),门静脉血流量明显增多(P〈0.01)。移植后随着时间延长,两组肝脏SNR均逐渐增高,实验组移植后3h、1周、2周时的肝脏SNR明显低于对照组(P〈0.05),至移植后4周,两组肝脏SNR的差异无统计学意义;两组移植后3h、1周、2周时的肝脏SNR均明显低于移植前(P〈0.05)。至移植后4周,肝脏SNR恢复至移植前水平。实验组肝组织普鲁士蓝染色阳性细胞多于对照组(P〈0.01)。结论门静脉注入硝普钠后,其分支内径扩大,血流量增加,在经门静脉移植MSCs的同时注入硝普钠可促进MSCs向末梢分支与血窦弥散分布。
- 陆海华滕皋军居胜红李爱梅王玲
- 关键词:间质干细胞移植硝普钠磁共振成像
- 大鼠间充质干细胞超顺磁性氧化铁标记和经脾移植后的MR示踪研究被引量:38
- 2006年
- 目的磁粒子标记骨髓间充质干细胞,同种异体移植入急性肝损伤大鼠脾脏,应用1·5TMR仪进行活体成像,为干细胞移植并无创示踪提供实验依据。方法制备Fe2O3-多聚左旋赖氨酸(PLL),标记分离纯化后的大鼠骨髓间充质干细胞(bonemesenchymalstemcells,BMSCs),普鲁士蓝染色显示细胞内铁。12只急性肝损伤大鼠分成实验和对照两组,将标记细胞(实验组,n=6)和未标记细胞(对照组,n=6)同种异体移植入大鼠脾脏,在移植前、移植后3h及3、7、14d应用MR的T2W对肝脏进行活体成像,测量肝脏信噪比(signal-to-noiseratio,SNR),并与肝脏组织切片普鲁士蓝染色对照。结果BMSCs的Fe2O3-PLL标记率近100%,普鲁士蓝染色显示蓝色铁颗粒位于BMSCs胞质内。实验组和对照组注射前、注射后3h及3、7、14d肝脏的SNR分别为19·53±2·30,3·28±1·06,7·34±2·10,10·25±3·96,15·50±3·73;20·20±4·35,21·20±4·43,19·13±2·80,21·43±5·45,19·07±4·80。与注射前比较,实验组3h及3、7d肝脏的SNR下降,差异具有统计学意义(Dunnett检验,t值分别为16·25,12·19,9·29,P值均<0·05),14d时SNR虽仍较低,但差异无统计学意义(Dunnett检验,t=4·03,P>0·05)。对照组移植后各时间点与移植前比较,SNR改变差异无统计学意义(方差分析,F=0·187,P>0·05)。组织学示普鲁士蓝阳性细胞主要分布于肝小叶中央静脉周围病变区。结论Fe2O3-PLL可以有效标记大鼠BMSCs,临床应用型1·5TMR仪可对磁粒子标记的BMSCs经脾植入后进行活体示踪。
- 居胜红滕皋军陆海华张爱凤张宇马明
- 关键词:间充质干细胞
- 骨髓源性肝干细胞的发现、诱导与移植被引量:2
- 2006年
- 陆海华滕皋军
- 关键词:骨髓肝干细胞分化
- 脐血间充质干细胞磁探针标记和MR成像研究被引量:79
- 2005年
- 目的 应用磁性氧化铁纳米粒子和多聚赖氨酸 (Poly L Lysine ,PLL)的偶联物Fe2 O3 PLL ,体外标记人脐血间充质干细胞 (mesenchymalstemcells,MSCS) ,磁共振进行标记细胞成像。方法 制备Fe2 O3 PLL ,分离人脐血MSCS 进行纯化并传代培养 ,标记Fe2 O3 PLL ,普鲁士蓝染色显示细胞内铁 ,四氮噻唑蓝 (MTT)比色试验评价不同浓度Fe2 O3 PLL标记MSCS 后对细胞生长状况的影响 ,Annexin/碘化吡啶 (PI)双染色法检测细胞凋亡 ,应用MR的T1WI、T2 WI、T2 WI3个序列进行细胞群成像。结果 普鲁士蓝染色清晰显示蓝色铁颗粒位于MSCS 胞质内 ,MTT比色试验示 5~ 2 0 0 μg/ml等7个铁浓度组 ,Fe2 O3 PLL标记后细胞的光吸收值与未标记MSCS 者比较 ,各组间总体比较差异无统计学意义(Kruskal Wallis秩和检验 ,χ2 =10 35 ,P =0 17)。标记MSCS 时 ,铁浓度采用 2 0 μg/ml较合适。标记MSCS、未标记MSCS 者晚期凋亡及坏死细胞分别为 5 4 3%、2 95 % ,早期凋亡细胞分别为 9 93%、10 14 %。在MR的T1WI、T2 WI、T2 WI中 ,标记 1× 10 6个MSCS 者、标记 5× 10 5个MSCS 者较未标记MSCS 者均有信号降低改变 ,且前者的降低率大于后者 ,3个序列中以T2 WI的信号强度变化率最大 ;标记 1× 10 6个MSCS 者 ,标记后培养
- 居胜红滕皋军毛曦张爱凤张宇马明顾宁
- 关键词:人脐血间充质干细胞MR成像PLL行标
- 干细胞的磁粒子标记和磁共振示踪被引量:3
- 2005年
- 居胜红滕皋军
- 关键词:干细胞磁共振成像肝细胞
- 肝干细胞分子免疫学若干研究进展
- 2005年
- 肝干细胞是一种具有双向分化能力和自我更新能力的细胞。肝干细胞分化过程和机理较为复杂,肝干细胞分子免疫学的研究成为肝干细胞研究的重要方面。现对近年来相关文献作一回顾,重点阐述肝干细胞分子机制研究进展。
- 孙军辉滕皋军
- 关键词:肝干细胞分子免疫学