国家自然科学基金(30400126)
- 作品数：4 被引量：4H指数：2
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- Sema4C及其相互作用蛋白GIPC的亚细胞定位及荧光共定位研究被引量：2
- 2008年
- 目的:观察脑信号蛋白Sema4C及其相互作用蛋白GIPC的亚细胞定位及两者的荧光共定位情况,为明确Sema4C和GIPC在亚细胞水平的相互作用提供佐证。方法:将Sema4C的基因编码区全长、胞外段和胞内段分别构建到pEGFPN1和pEGFPC1表达载体中,将GIPC编码区基因构建到pDsRed-C1表达载体中,分别转染HEK293细胞,观察亚细胞定位;将pEGFPN1-Sema4C和pDsRed-GIPC分别共转染HEK293和COS7细胞,观察两者的荧光共定位情况。结果:酶切鉴定及测序结果表明重组载体构建正确,Sema4C蛋白全长和胞外段呈跨膜分布,而胞内段在全细胞中呈弥散样分布;GIPC在胞浆内呈斑块状聚集分布;pEGFPN1-Sema4C和pDsRed-GIPC存在荧光共定位区域。结论:Sema4C主要在胞膜和胞浆内表达,GIPC主要在胞浆内呈斑块样聚集分布;Sema4C和GIPC之间存在荧光共定位。
- 吴燕吴海涛刘淑红范文红范明
- 关键词：HEK293细胞COS7细胞激光共聚焦显微镜
- Sema4C在神经干细胞中的表达
- 2007年
- 目的探讨Sema4C及其相关蛋白在神经干细胞中的表达。方法利用RT-PCR、Western blot、免疫荧光等方法对神经干细胞中内源性Sema4C及其相关蛋白的表达进行检测。结果Sema4C及其相关蛋白在神经干细胞中表达,并且Sema4C在神经干细胞终末分化细胞神经元中表达,但在星形胶质中不表达。结论Sema4C及其相关蛋白在神经干细胞中表达,提示Sema4C及其相关蛋白可能在神经干细胞中起作用。
- 樊俊蝶朱玲玲赵彤吴海涛范文红范明
- 关键词：神经干细胞
- Semaphorins在神经发育及突触可塑性中的作用被引量：2
- 2007年
- 在神经发育过程中Semaphorins为轴突导向和神经细胞的迁移提供导向信息。在成年脑中,这些导向分子通过抑制自发的或异常的轴突生长来维持已建立的神经连接,并参与突触可塑性,以及中枢神经受损后抑制神经再生与神经细胞的死亡。本文主要介绍Semaphorins在神经发育及突触可塑性中的作用。
- 樊俊蝶朱玲玲范文红范明
- 关键词：SEMAPHORINS轴突导向细胞迁移神经再生
- 人Sema4C重组腺病毒载体的构建及其在小鼠成肌细胞系C2C12中的表达
- 2007年
- 利用Ad5腺病毒载体系统构建人Sema4C基因重组腺病毒表达载体并在成肌细胞系C2C12中表达,并初步探讨Sema4C基因在成肌发育过程中的可能作用。利用脂质体介导重组腺病毒载体转染HEK293细胞,包装出完整的腺病毒;将重组腺病毒载体感染C2C12成肌细胞后,利用激光共聚焦显微镜观察发现12h即有绿色荧光表达,24h后绿色荧光蛋白表达最强;流式细胞仪检测病毒的感染效率几乎达100%。WB检测结果表明感染重组腺病毒载体组C2C12细胞Sema4C蛋白的表达量明显高于空载体对照组(P<0.01)。为了进一步观察Sema4C基因对C2C12细胞增殖分化的影响,流式细胞仪检测了病毒感染48h后C2C12细胞的增殖指数,并对感染后诱导分化的C2C12细胞的分化情况进行了观察。结果首次表明,过表达外源性人Sema4C基因不仅能使C2C12细胞的G0/G1期比例增加,细胞的增殖指数下降,同时在分化培养条件下还能促进C2C12细胞肌管的形成。
- 吴海涛刘淑红吴燕樊俊蝶范文红范明
- 关键词：腺病毒载体成肌细胞C2C12增殖指数
