国家自然科学基金(30570763)
- 作品数：22 被引量：67H指数：5
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- 慢性肾衰竭大鼠主动脉NF-κB的表达变化被引量：4
- 2008年
- 目的探讨尿毒症时主动脉局部炎症信号NF-κB表达变化。方法采用单肾切除、对侧肾动脉部分结扎法建立慢性肾衰竭模型,RT-PCR检测NF-κB p65亚基、I-κB mRNA表达水平,免疫组织化学检测p65亚基蛋白表达,凝胶迁移率法测定NF-κB活性,并用图像分析定量。结果与正常大鼠比较,慢性肾衰竭大鼠主动脉NF-κB p65亚基mRNA表达水平显著升高(P<0.01),而I-κB mRNA表达水平显著降低(P<0.01),NF-κB p65亚基蛋白表达和活性也显著增加(P<0.01),并随病程延长而进一步上升。蛋白酶体抑制剂MG-132可明显抑制慢性肾衰竭大鼠主动脉NF-κB组分表达和活性升高。结论慢性肾衰竭大鼠主动脉NF-κB炎症信号通路存在显著活化。
- 冯兵杨旭叶自林袁发焕杨惠标张耀全
- 关键词：慢性肾功能衰竭主动脉NF-ΚB
- 4-苯丁酸钠对大鼠糖尿病肾病的治疗作用被引量：6
- 2010年
- 目的观察分子伴侣4-苯丁酸钠(4-PBA)对大鼠糖尿病肾病(DN)的防治效果。方法 54只SD雄性大鼠随机分为正常对照组(NC组,n=18)、糖尿病肾病组(DN组,n=18)、4-PBA治疗糖尿病肾病组(4-PBA组,n=18)。在4周、8周、12周时分别检测大鼠肾重/体重指数(KI)、代谢参数、24h尿蛋白排泄率(UAER),观察肾脏病理改变。结果 (1)与NC组大鼠比较,DN组大鼠体重明显减轻,而肾重明显增加,相应的KI显著增大(P<0.05)。4-PBA治疗不仅使DN大鼠体重减轻程度显著减低,而且,肾重增加程度也显著降低,KI也明显下降(P<0.05)。(2)与NC组比较,DN大鼠的血糖、甘油三酯、总胆固醇、UAER均明显升高(P<0.05)。4-PBA治疗可显著降低大鼠的血糖水平,显著减少UAER(P<0.05),但对大鼠甘油三酯、总胆固醇无明显影响(P>0.05)。(3)DN大鼠肾小球基底膜增厚,系膜细胞增生、系膜基质积聚,系膜细胞和肾小管上皮细胞表达α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)明显增多。4-PBA治疗可显著抑制上述病理改变。结论 4-PBA对大鼠DN有治疗作用。
- 齐伟牟娇叶自林郭艳红罗志锋曾薇冯兵
- 关键词：分子伴侣内质网应激糖尿病肾病
- MG-132对慢性肾衰大鼠治疗作用的初步研究被引量：9
- 2007年
- 目的探讨蛋白酶体抑制剂在慢性肾衰竭大鼠中的治疗作用。方法采用部分肾动脉结扎加肾切除法复制慢性肾衰竭大鼠模型,RT-PCR法测定主动脉泛素、泛素结合酶mRNA的表达变化,光镜观察肾脏病理改变,酶法测定血肌酐、尿素氮及血脂变化。结果与对照组比较,单纯手术组大鼠肾小球明显硬化、间质纤维化、炎细胞浸润,血肌酐、尿素氮水平均显著升高,主动脉泛素Ub及泛素连接酶E2 mRNA表达水平也显著增加。蛋白酶体抑制剂MG-132治疗4-6个月后大鼠主动脉泛素Ub及泛素连接酶E2 mRNA表达显著降低,同时,病理检查显示肾脏间质纤维化和炎症浸润明显减轻,血肌酐、尿素氮升高水平也显著低于单纯手术组。结论泛素蛋白酶体信号通路活化在慢性肾功能衰竭病理进程中发挥了重要作用。
- 杨旭冯兵叶自林袁发焕杨惠标牟娇
- 关键词：慢性肾功能衰竭泛素炎症
- 兔慢性肾衰竭加速性动脉粥样硬化病理形态学变化被引量：4
- 2008年
- 目的:通过结扎兔肾动脉分支建立慢性肾衰竭模型,观察主动脉病理变化。方法:新西兰白兔60只,随机分为慢性肾衰竭组(CRF组)和假手术组(Sham组)。CRF组结扎左肾动脉分支同时切除右肾,术后动态观察兔主动脉、残余肾的病理形态学变化和肾功能等指标。结果:CRF组兔术后血清BUN、Scr逐渐升高,肾脏病理逐渐出现明显的肾小球硬化和肾间质纤维化;主动脉逐渐出现内皮细胞脱落、脂纹、粥样斑块等动脉粥样硬化的表现。结论:通过结扎兔左肾外动脉分支和切除右肾一次完成的方法可成功建立CRF加速性动脉粥样硬化模型。
- 张耀全冯兵李芙蓉杨旭周剑锋袁发焕
- 关键词：慢性肾衰竭动脉粥样硬化
- 尿毒症患者微炎症与血管功能损伤的关系被引量：13
- 2008年
- 目的探讨尿毒症非透析患者微炎症与血管损伤的关系。方法选择95例尿毒症患者和40例健康对照者,用高分辨B超测颈动脉内膜中膜厚度、切面内膜中膜面积和粥样斑块以及测定肱动脉血管舒张功能。酶联免疫吸附法测定血清C反应蛋白和肿瘤坏死因子α含量。结果与健康对照组比较,尿毒症患者血清C反应蛋白(5.27±1.18mg/L比1.54±0.82mg/L,P<0.05)和肿瘤坏死因子α(2.11±0.34μg/L比0.15±0.03μg/L,P<0.05)含量显著升高(P<0.05),血清前白蛋白和血红蛋白显著降低(P<0.05),收缩压和舒张压明显升高(P<0.05),而血清白蛋白、血糖和血脂无显著变化。与健康对照组比较,虽然颈动脉内膜中膜厚度、切面内膜中膜面积、粥样斑块检出率及肱动脉基础内径和基础血流量差异无显著性,但是肱动脉内皮依赖性舒张功能、非内皮依赖性舒张功能、反应性充血血流量及含服硝酸甘油血流量均显著降低。C反应蛋白和肿瘤坏死因子α含量与肱动脉内皮依赖性舒张功能呈负相关(r分别为-0.76、-0.66,P<0.05),C反应蛋白和肿瘤坏死因子α含量与肱动脉非内皮依赖性舒张功能也呈负相关(r分别为-0.41、-0.48,P<0.05)。结论非透析尿毒症患者微炎症反应与血管功能损伤有关。
- 冯兵杨旭叶自林杨惠标
- 关键词：内科学尿毒症血管损伤肿瘤坏死因子Α
- 他汀药物治疗对尿毒症患者外周血单个核细胞功能的影响
- 2008年
- 目的:探讨小剂量他汀治疗对尿毒症患者外周血单个核细胞(PBMC)功能的影响。方法:选择尿毒症患者55例,随机分为他汀治疗组(氟伐他汀胶囊,20mg/d)和对照观察组,采用放射免疫法测定患者血清和PBMC培养上清中白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。另选择20例健康人作为正常对照组。结果:与正常组比较,尿毒症患者血清炎症细胞因子(IL-1、IL-6、TNF-α)含量显著升高(P<0.05),PBMC分泌上述炎症细胞因子的能力也显著增强(P<0.05)。与尿毒症患者对照组比较,他汀治疗组患者血清炎症细胞因子水平明显下降(P<0.05),PBMC基础分泌和血管紧张素Ⅱ刺激分泌炎症细胞因子的能力被显著抑制(P<0.05)。小剂量他汀治疗对血糖、血脂(总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇)均无影响。结论:小剂量他汀治疗可显著抑制尿毒症患者外周血PBMC的活化。
- 冯兵叶自林杨旭杨惠标
- 关键词：尿毒症他汀白细胞介素-1白细胞介素-6
- MG132可增强糖尿病大鼠肾脏抗氧化能力
- 2011年
- 目的探讨蛋白酶体抑制剂MG132对糖尿病肾病（DN）大鼠的治疗作用及其机制。方法72只大鼠随机分为正常对照组（NC）、DN组和MG132治疗组（DN＋MG132），每组各24只。在治疗第4、8和12周末检测各组大鼠24h尿蛋白排泄率（UPER）、24h尿量和尿丙二醛（MDA）含量、肾组织26S蛋白酶体、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）活性；实时荧光定量PCR法检测各组大鼠肾组织SOD、GSH—PX和p47phoxmRNA的表达变化；Western印迹检测p47phox的蛋白表达变化。结果与Nc组大鼠比较，在4、8和12周时，DN大鼠的UPER显著增高（均P〈0．05）；12周时病理显示DN组大鼠肾小球系膜显著增生和系膜基质积聚增多。与同期DN组大鼠比较，MG132治疗组大鼠的UPER显著降低（均P〈0．05），肾小球系膜增生和基质积聚均减少。在4、8和12周，DN组大鼠肾组织26S蛋白酶体活性比NC组分别增高了2．14倍、2．66倍和3．68倍（均P〈0．05）。与DN组大鼠比较，MG132治疗组大鼠26S蛋白酶体活性显著下降（均P〈0．05）。与NC组大鼠相比，DN组大鼠肾组织p47phoxmRNA表达分别升高了1：55％、149％和120％（均P〈O．05）；p47phox蛋白表达分别升高了139％、152％和186％（均P〈0．05）；尿MDA含量分别升高了1．95倍、2．04倍和2．62倍（均P〈0．05）；而DN大鼠肾组织SOD活性分别下降23．09％、33．59％和53．31％（均P〈0．05）；GSH—PX的活性分别下降28．57％、33．06％和48．76％（均P〈0．05）；SODmRNA表达分别下降38．09％、61．44％和76．53％（均P〈0．05），GSH．PXmRNA表达分别下降29．16％、37．26％和62．40％（均P〈0．05）。与1）N组大鼠比较，MG132治疗组大鼠肾组织D47phoxmRNA和蛋白表达以及尿MDA含量则显著下降（均P〈0．05），而SOD和GSH—PX的活性和mRNA均显著升高（均P〈0．05）。结论MG132对DN大鼠肾脏有显著的保�
- 罗志锋齐伟曾薇庞琦郭艳红牟娇冯兵
- 关键词：氧化性应激抗氧化剂蛋白酶体MG132
- 慢性肾功能衰竭大鼠主动脉核因子kB活化及泛素通路的调节作用被引量：1
- 2008年
- 目的探讨慢性肾功能衰竭大鼠主动脉泛素（Ub）-NF-kB通路的表达变化规律。方法将大鼠随机分为假手术对照组（CON）、肾功能衰竭组（CRF）、肾功能衰竭加MG-132干预组（CRF＋M），观察6个月。采用部分肾动脉结扎加对侧肾切除法复制慢性肾功能衰竭大鼠模型。ELISA法测定血液中炎性因子白细胞介素1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量。RT-PCR半定量测定主动脉中NF-kB及Ub mRNA表达。免疫组织化学方法检测主动脉中NF-kB及Ub蛋白表达。Western印迹法测定主动脉泛素化蛋白的含量。凝胶电泳迁移率（EMSA）法测定动脉中NF-kB的活化情况。结果与CON组比较，CRF组大鼠术后4～6个月时血清中IL-lβ[（9．02±1．29）比（2．74±0．96）mg／L]和TNF-α[（50．02±9．52）比（14．04±1．29）mg／L]水平显著升高（P〈0．01）；主动脉NF-kB、Ub的mRNA表达升高1．38倍和1．29倍（P〈0．01）；NF-kB、Ub的蛋白质表达升高3．75倍和20．5倍（P〈0．01）；NF-KB活性增强1．82倍（P〈0．01），术后6个月各指标均有进一步上升趋势。与CRF组比较，CRF＋M组大鼠干预治疗4～6个月后，大鼠血清中IL-lβ[（2．94±0．33）mg／L]和TNF-d[（12．80±2．12）mg／L]含量显著下降（P〈0．01）；NF-kB、Ub的mRNA及蛋白质表达显著减少（P〈0．01）；NF-KB的活性显著降低（P〈0．01），与CON组比较，差异已无统计学意义，而主动脉中泛素化蛋白含量显著升高（P〈0．01）。结论慢性肾功能衰竭大鼠主动脉泛素．NF-KB炎性反应信号明显活化，抑制蛋白酶体活性可能是降低主动脉NF-KB活化的重要药物靶点。
- 杨旭冯兵叶自林袁发焕杨惠标张耀全
- 关键词：肾功能衰竭慢性泛素核因子KB
- 慢性肾衰竭兔血清对主动脉平滑肌细胞增殖及核因子κB活化的作用被引量：1
- 2010年
- 目的 研究慢性肾衰竭兔血清对其主动脉平滑肌细胞增殖和核因子κB（NF-κB）活化的影响,并探讨其作用的可能机制.方法 建立慢性肾衰竭兔模型,采集血清.采用原代培养的兔主动脉平滑肌细胞,用不同浓度的慢性肾衰竭兔血清刺激不同时间,四甲基偶氮噻唑盐（MTF）法检测细胞增殖;Hoechst33342染色观察细胞凋亡;Western印迹检测慢性肾衰竭血清对主动脉平滑肌细胞增殖细胞核抗原（PCNA）、NF-κB p65蛋白表达的影响;免疫荧光观察NF-κB p65核转位.结果 （1）在较低浓度（≤10%）时,慢性肾衰竭兔血清对平滑肌细胞的增殖有明显的促进作用,且呈浓度、时间依赖性;但血清浓度继续增加后,对平滑肌细胞的促增殖作用却明显减弱,与正常血清组差异有统计学意义（P＜0.05）.（2）Hoechst33342染色表明,慢性肾衰竭血清在低浓度时（≤10%）细胞凋亡率和正常血清组差异无统计学意义（P＞0.05）,但高浓度（＞10%）时,平滑肌细胞凋亡率增加,与正常血清组差异有统计学意义（P＜0.01）.（3）慢性肾衰竭血清刺激24 h后,低浓度促进PCNA、NF-κB p65蛋白表达,高浓度抑制PCNA、NF-κB p65表达,与正常血清组差异有统计学意义（P＜0.01）.（4）10%慢性肾衰竭血清与平滑肌细胞孵育24 h后免疫荧光显示,NF-κB p65发生了核转位.结论 不同浓度的慢性肾衰竭兔血清可导致平滑肌细胞增殖或凋亡,其促增殖作用可能与其活化了NF-κB有关.本研究为防治慢性肾衰竭加速性动脉粥样硬化提供理论依据.
- 张耀全袁发焕冯兵胡宏
- 关键词：血清细胞增殖核因子ΚB
- 内质网应激在尿毒症血清致内皮细胞功能异常中的作用被引量：7
- 2011年
- 目的探讨内质网应激(ERS)在尿毒症血清致内皮细胞功能异常中的作用。方法采集尿毒症患者和正常健康人的静脉血血清。以不同浓度的尿毒症血清或正常血清(2.5%、5%、10%、15%、20%)刺激人脐静脉内皮细胞(hUVEC)24h后,采用MTT比色法检测细胞活力的变化,流式细胞术检测细胞周期,Hoechst33342染色观察细胞凋亡,荧光定量RT-PCR法检测单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)mRNA表达的变化。结果当浓度小于10%时,尿毒症血清对hUVEC细胞增殖率和S期百分比的影响随浓度增加而增大。当浓度大于10%时,hUVEC细胞增殖率和S期百分比逐渐下降,且细胞凋亡率逐渐增高。与正常血清组比较,10%尿毒症血清刺激后hUVEC GRP78和MCP-1 mRNA表达均显著升高(P<0.05)。应用分子伴侣4-苯基丁酸(4-PBA)干预,可显著抑制尿毒症血清诱导的GRP78 mRNA和MCP-1 mRNA表达(P<0.05),降低hUVEC的增殖率和S期百分比(P<0.05)。结论内质网应激可能是尿毒症血清诱导内皮细胞功能异常的重要细胞内机制。
- 曾薇罗志锋齐伟郭艳红庞琦张均王宗前牟娇冯兵
- 关键词：内质网应激尿毒症人脐静脉内皮细胞动脉粥样硬化
