家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金(SKLVEB2012KFKT003)
- 作品数:4 被引量:9H指数:2
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- 相关机构:华南农业大学生物技术有限公司更多>>
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- 不同来源柔嫩艾美耳球虫虫株微线体3基因的克隆和序列分析
- 2013年
- 以8株不同来源柔嫩艾美耳球虫分离株为研究对象,对其艾美耳球虫微线体3(Eimeria tenella microneme protein,EtMIC3)基因进行了RT-PCR扩增、测序及序列分析,并与GenBank上已发表的柔嫩艾美尔球虫相关序列进行比较,研究Et-MIC3基因遗传变异情况。结果获得2976bp的目的片段,各株与FJ374765.1CDs的序列相似性在99.8%~99.9%之间,各株之间的序列相似性为99.9%~100.0%,各株编码的氨基酸序列与GenBank登记的柔嫩艾美耳球虫EtMIC3蛋白(ACJ11219)相似性在99.6%~99.9%之间,不同地理来源或耐药性虫株之间没有明显差异。本研究首次对中国EtMIC3基因进行了序列分析,结果显示不同来源株EtMIC3基因高度保守,为有效的疫苗候选因子,为进一步进行柔嫩艾美耳球虫基因工程疫苗构建的研究奠定了基础。
- 王新秋高艳吴林林刘少芬刘丽丹翁亚彪林瑞庆
- 关键词:柔嫩艾美球虫RT-PCR
- 5株堆型艾美耳球虫顶质体rpoB基因的扩增及序列分析被引量:2
- 2013年
- 以5株堆型艾美耳球虫为研究对象,对其顶质体rpoB基因的部分序列进行了PCR扩增、测序及序列分析,并与GenBank上发表的柔嫩艾美耳球虫及其他顶复门寄生虫相关序列进行比较,研究顶质体的遗传变异情况。结果表明,从堆型艾美耳球虫不同来源虫株均获得了469bp的目的片段,应用DNAStar软件进行序列对比发现,5株堆型艾美耳球虫的顶质体rpoB序列完全一致,与柔嫩艾美耳球虫相应序列的相似性为92.75%,而与刚地弓形虫和疟原虫的相似性分别为67.23%和64.62%。首次报道了堆型艾美耳球虫rpoB序列,显示rpoB基因序列保守,不同来源堆型艾美耳球虫虫株的序列没有差异,为进一步研究艾美耳球虫的群体遗传学奠定了基础。
- 刘国昌林瑞庆严浩胡钱江刘丽丹翁亚彪
- 关键词:堆型艾美耳球虫RPOB基因
- 堆型艾美耳球虫早熟系与母株11种抗原基因表达水平的比较分析被引量:1
- 2014年
- 应用荧光定量qRT-PCR技术比较堆型艾美耳球虫早熟系及其母株孢子化卵囊的11种抗原基因的表达情况。提取堆型艾美耳球虫早熟系及其母株孢子化卵囊的总RNA,反转录成cDNA,在GenBank中查找堆型艾美耳球虫11种抗原基因并设计相应引物,进行荧光定量qRT-PCR扩增,用熔解曲线、扩增曲线和循环阈值(Ct值)的变化等比较分析堆型艾美耳球虫早熟系及其母株的不同基因的扩增特异性和相对表达量。结果显示,11种抗原基因得到表达;与疫苗母株相比,早熟致弱的疫苗株大部分抗原基因的表达量下降,其中HSP70基因表达量下降明显。结果表明,早熟系毒力的减弱可能与某些抗原基因表达量下降有关。
- 邹尚书梁建英王新秋何媛程田翁亚彪林瑞庆
- 关键词:堆型艾美耳球虫抗原基因荧光定量PCR
- 1株肠炎沙门氏菌噬菌体的污水分离及生物学特性研究被引量:6
- 2014年
- 以1株肠炎沙门氏菌作为宿主菌,应用双层平板噬菌斑试验从污水中分离噬菌体并对其基本生物学特性进行研究。结果显示成功地从污水中分离出1株肠炎沙门氏菌噬菌体,噬菌斑呈圆形透明状,直径2mm左右(培养12h),边界清楚;电镜观察结果显示该噬菌体有1个正多面体立体对称的头部,头部直径约54nm,无囊膜,有1长尾,无收缩尾鞘,尾长约110nm;当感染复数(MOI)为2时,子代噬菌体滴度较高;按一步生长试验结果绘制出一步生长曲线,结果显示感染宿主菌的潜伏期约为10min,裂解期约100min,平均裂解量约为61。该试验结果为动物沙门氏菌病的进一步噬菌体生物防制研究提供了材料。
- 邹尚书许家园翁亚彪林瑞庆
- 关键词:噬菌体生物学特性