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国家自然科学基金(81170756)
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李和平
唐澜
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父亲应激对子代糖代谢的调控作用及机制研究
目的: 当今社会,随着经济水平的发展,生活方式的转型,焦虑、紧张、抑郁等心理压力与应激日益频繁,已严重危害人类健康。大量人群流行病学研究表明,心理应激(Psychological stress)与多个疾病的发生发展密切...
吴铃
关键词:
病理机制
文献传递
兔Oct4启动子驱动RFP基因表达载体的构建及验证
2014年
转录因子OCT4在维持和调控胚胎干细胞的多能性中发挥着重要的作用。Oct4基因启动子驱动标志蛋白的表达对研究胚胎干细胞多能性和建立iPS细胞有重要意义。由于GFP在慢病毒转染过程中常用作转染标记,计划构建兔Oct4基因启动子(rOct4)驱动红色荧光蛋白表达的载体,这将有利于兔ES细胞和iPS细胞制备的研究。通过PCR方法扩增rOct4,构建了rOct4驱动RFP基因的表达载体rOct4-RFP。经转染小鼠ES细胞验证正确后,将rOct4-RFP质粒转染兔成纤维细胞系获得rOct4-RFP成纤维细胞系。经过酶切和测序验证,证明rOct4-RFP构建成功,而且能够在小鼠ES细胞系E14中表达细胞红色荧光蛋白,并受细胞分化状态的调控。通过脂质体介导的基因转移、抗性筛选和PCR鉴定建立了rOct4-RFP转基因成纤维细胞系。
唐澜
姜伟华
尹明茹
周小梅
李和平
陈学进
李善刚
关键词:
RFP
干细胞
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