广西大学科研基金(XBZ130036)
- 作品数:2 被引量:5H指数:2
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- 鸡传染性支气管炎病毒GX-YL5株N蛋白在昆虫杆状病毒系统中的分泌表达被引量:2
- 2016年
- 以鸡传染性支气管炎病毒(IBV)广西优势血清型代表株GX-YL5为研究对象,利用RT-PCR扩增出其核蛋白(N)基因,引入昆虫细胞识别的蜂素(Honeybee melittin,HBM)信号肽,同时在C端加入6个组氨酸标签以利于纯化,将其定向克隆到转座载体pFast Bac^(TM)dual中,转化DH10Bac^(TM)感受态细胞进行同源重组获得重组杆粒r HBM-N;利用脂质体介导转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒,通过间接免疫荧光(IFA)和Western-blot鉴定表达的N蛋白。结果显示:IFA出现特异性荧光,Western-blot中细胞上清和细胞沉淀均出现51 ku的特异性条带。结果表明N蛋白获得了分泌表达且具有良好的免疫原性。研究首次引入昆虫细胞识别的HBM信号肽进行N蛋白的表达,不仅为N蛋白的生物学功能、诊断试剂以及IBV新型亚单位疫苗研究奠定了基础,也为其它蛋白的表达提供参考。
- 张志鹏张丽华孙新宽宋丽丽韦天超磨美兰韦平
- 关键词:鸡传染性支气管炎病毒N蛋白
- 昆虫杆状病毒表达系统在病毒性家禽疾病研究中的应用进展被引量:3
- 2014年
- 昆虫杆状病毒表达系统作为四大表达系统之一,具有安全性高、对外源基因克隆容量大、重组病毒易于筛选、具有完备的翻译后加工修饰系统和高效表达外源基因的能力等特点,已成功表达了近千种高价值蛋白,在很多领域都得到较广泛的应用。本文对该表达系统在主要病毒性家禽疾病方面的相关应用研究进展进行综述,旨在为相关研究提供参考。
- 孙新宽宋丽丽韦平韦天超磨美兰
- 关键词:昆虫杆状病毒