云南省自然科学基金(2006C0057Q)
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
- 相关作者：王琳胡明道刘锋周玉凯李晓更多>>
- 相关机构：昆明医学院第二附属医院云南西双版纳更多>>
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- Hint1基因抑制HepG2细胞AP-1转录因子活性的实验研究被引量：1
- 2009年
- 目的探索体外过表达Hint1基因对人肝肿瘤HepG2细胞AP-1转录因子活性的影响。方法分子克隆获得Hint1基因序列，构建pHA—Hint1重组融合基因表达载体。阳离子脂质体介导，pHA—Hint1转导人肝母细胞瘤HepG2细胞，RT—PCR和Western blot检测HepG2细胞中外源HA—Hintl表达。pHA—Hint1质粒、启动子荧光素酶报告质粒AP-1／Luc及巨细胞病毒-β-半乳糖酶报告质粒（β—gel）共转导HepG2细胞。36h后测定荧光素酶活性及β—gel活性。结果重组质粒经EcoR I和BamH I双酶切，获约100bp特异条带，测序证实成功构建pHA—Hint1表达载体。pHA—Hint1及空载体pcDNA3／HA转导HepG2细胞，半定量RT-PCR结果显示pHA—Hint1组Hint1 mRNA表达高于空载体组（t=3．89，P〈0．05）；Western blot结果显示pHA-Hint1组HA标签蛋白表达高于空载体组（t=3．12，P〈0．05）。AP-1转录因子活性检测结果：pHA—Hint1终浓度为0μg/ml，0．5μg/ml，1．0μg/ml，1．5μg/ml，2．0μg/ml时，AP-1转录因子相对活性（10^6）为：5．12±0．25、4．24±0．74、3．43±0．31、2．62±0．48、2．09±0．21。随着pHA—Hint1浓度增加，荧光素酶活性呈明显下降，当pHA—Hint1浓度达到1．5μg及2．0μg时，差异有统计学意义（F=72．009，P〈0．05）。结论过表达Hint1基因可抑制HepG2细胞AP-1转录因子活性。
- 戈佳云王琳陆晓青李晓吴涛
- 关键词：肝肿瘤转录因子AP-1
- 蛋白激酶CβⅡ与原发性肝癌的研究进展
- 2009年
- 综述了蛋白激酶C的分类及其亚型,蛋白激酶C-βⅡ的结构、激活、细胞信号传导、抑制凋亡作用及与肿瘤的关系.
- 刘锋胡明道赵峦峰周玉凯
- 关键词：原发性肝癌周期蛋白细胞信号传导
- 甲磺酸加贝脂抑制肿瘤细胞增殖实验研究进展被引量：1
- 2009年
- 甲磺酸加贝脂(Gabexate mesilate,GM)是一种人工合成的丝氨酸蛋白酶抑制剂,能抑制各种血浆蛋白酶,如凝血酶、纤维蛋白溶酶、激肽释放酶、补体系统中的C1脂酶和凝血因子Xa等活性.目前临床上GM主要用于急性胰腺炎和弥散性血管内凝血的治疗.近年国外有少量文献报道将甲磺酸加贝脂用于抑制肿瘤细胞增殖的探索性实验研究.本文就GM对肿瘤细胞增殖、分化、侵袭、转移影响的研究现状进行综述.
- 舒云张小文王琳
- 关键词：肿瘤细胞丝氨酸蛋白酶抑制剂基质金属蛋白酶尿激酶型纤溶酶原激活因子
- 蛋白激酶Cδ对人原发性肝癌细胞增殖的影响
- 2009年
- 目的初步探讨PKCδ对人原发性肝癌细胞增殖的影响.方法体外培养SMMC-7721细胞,脂质体介导基因体外转导,通过细胞计数、细胞形态学观察、MTT法、流式细胞仪检测技术等方法研究PKCδ对人原发性肝癌细胞的影响.结果细胞计数的生长曲线示转导入PKCδ的SMMC-7721细胞数目明显减少;MTT法显示转导入PKCδ的SMMC-7721细胞的OD值减小,活细胞数目显著减少(P<0.01);细胞形态学观察转导入PKCδ的SMMC-7721细胞脱落,连接疏松,失去光泽;流式细胞仪检测到加入PKCδ的SMMC-7721细胞凋亡率增加.结论PKCδ有抑制SMMC-7721细胞增殖,促进凋亡的作用.
- 周玉凯胡明道王琳刘锋
- 关键词：人原发性肝癌细胞增殖
- 蛋白激酶C-βⅡ对SMMC-7721人肝癌细胞增殖的影响
- 2009年
- 目的研究蛋白激酶C-βⅡ对SMMC-7721人原发性肝癌细胞增殖的影响.方法体外基因扩增获得pcDNA3/PKCβⅡ真核表达质粒.脂质体介导pcDNA3/PKCβⅡ基因体外转导人原发性肝癌SMMC-7721细胞,分为实验组(pcDNA3/PKCβⅡ)、对照组(pcDNA3空载体)及空白对照组.细胞计数、MTT法、细胞形态学观察、流式细胞仪等方法检测PKCβⅡ对SMMC-7721人原发性肝癌细胞增殖的影响.结果细胞生长曲线检测结果显示转导入PKCβⅡ的SMMC-7721细胞数目明显增加;MTT法显示转染PKCβⅡ的人原发性肝癌细胞SMMC-7721的OD值增加(P<0.01);细胞形态学观察实验组SMMC-7721细胞间连接紧密,巨核、双核、多核、奇异型的核也明显增加,核分裂像增多,特别是出现不对称、多极性及顿挫性等病理性核分裂像尤为明显;流式细胞仪检测显示转导PKCβⅡ的SMMC-7721细胞细胞周期中S期细胞明显增多.结论PKCβⅡ可促进SMMC-7721细胞增殖,其机制可能与促进细胞DNA合成相关.
- 刘锋王琳胡明道周玉凯
- 关键词：人原发性肝癌细胞增殖
