国家自然科学基金(30771002)
- 作品数：8 被引量：53H指数：5
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- 内质网应激在白蛋白诱导肾小管上皮细胞凋亡中的作用被引量：6
- 2009年
- 目的探讨内质网应激在白蛋白超负荷诱导肾小管上皮细胞凋亡中的作用和分子机制。方法Western印迹法检测肾小管上皮细胞（HKC）内质网伴侣蛋白糖调节蛋白78（GRP78）和内质网应激蛋白CHOP（CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白，也称为GADD153）表达与人血清白蛋白（HSA）作用时间和浓度的关系。实时荧光定量PCR法检测CHOP siRNA对CHOP基因转录的抑制情况。Western印迹法检测CHOP siRNA转染后CHOP蛋白水平的变化。膜联蛋白V和碘化丙锭（Annexin V-FITC和PI）双染的流式细胞术检测白蛋白诱导HKC凋亡的变化以及CHOP siRNA对HKC凋亡的影响。结果（1）分别以0、5、10、20g／L白蛋白作用于HKC 24h，GRP78、CHOP蛋白表达及细胞凋亡均随白蛋白浓度的增加而上调，各组间差异有统计学意义（P〈0．01）；以20g／L白蛋白分别作用于HKC 0、6、12、24、36h，GRP78蛋白表达在6h即显著增加，CHOP蛋白表达及HKC凋亡则在12h显著增加，各组间差异有统计学意义（P〈0．01）。（2）CHOP siRNA显著抑制白蛋白诱导的CHOP基因转录及蛋白表达（P〈0．01），对白蛋白诱导的HKC凋亡有显著抑制作用（P〈0．01）。结论白蛋白超负荷可诱导肾小管上皮细胞发生内质网应激，并通过上调促凋亡因子CHOP表达引起肾小管上皮细胞内质网相关的细胞凋亡，这可能是蛋白尿引起肾小管间质病变的重要机制。
- 吴小玮何娅妮王惠明李开龙丁涵露吕顺巧
- 关键词：白蛋白类内质网细胞凋亡肾小管上皮细胞
- 慢性肾病患者肾小管上皮细胞内质网应激与细胞凋亡的关系被引量：18
- 2008年
- 目的探讨慢性肾病(chronic kidney disease,CKD)患者蛋白尿诱导肾小管上皮细胞内质网应激与细胞凋亡的关系。方法应用免疫组织化学技术检测CKD患者肾小管上皮细胞中内质网应激标志蛋白氧调节蛋白150(cells-oxy-gen-regulated protein150,ORP150)和糖调节蛋白78(glucose-regulated protein78,GRP78)的表达;TUNEL法检测细胞凋亡。对各指标与CKD患者24h尿蛋白量进行相关性分析。结果CKD患者肾小管上皮细胞细胞质中ORP150、GRP78的表达较正常对照组显著增强(P<0.01),且轻、中、重度蛋白尿3组各组间亦均有显著性差异(P<0.01),并与尿蛋白水平呈正相关(r=0.695,r=0.76,P<0.01);各组小管上皮细胞凋亡系数(apoptosis index,AI)均亦有显著性差异(P<0.01),并与尿蛋白水平呈正相关性(r=0.835,P<0.01)。结论CKD患者肾小管上皮细胞有内质网应激与凋亡的发生,并且其强度与蛋白尿水平呈正相关关系。内质网应激可能是大量蛋白尿引起小管上皮细胞凋亡的重要环节。
- 吴小玮何娅妮丁涵露王惠明李开龙杨聚荣詹俊张建国
- 关键词：慢性肾病内质网应激细胞凋亡
- 内质网应激预处理对大鼠急性缺血性肾损伤的保护作用被引量：6
- 2010年
- 目的研究内质网应激预处理对大鼠急性缺血性肾损伤的保护作用。方法 24只雄性SD大鼠均分为对照组、衣霉素(tunicamycin,TM)处理组、缺血再灌注(ischemia reperfusion,I/R)组,衣霉素+缺血再灌注(TM+I/R)组。采用自动生化分析仪检测大鼠血肌酐、尿素氮水平,PAS染色检测肾小管损伤情况,免疫组化和Western blot检测肾组织内质网应激标志物GRP78蛋白表达。结果①与对照组(0.2±0.03)比较,I/R组肾组织GRP78表达(2.4±0.17)增加(P<0.05),与对照组血肌酐、尿素氮[(47.42±6.02)μmol/L、(4.75±1.77)mmol/L]比较,I/R组血肌酐[(186.83±20.21)μmol/L]、尿素氮[(21.73±2.33)mmol/L]水平升高(P<0.05),肾小管损伤评分升高。②TM组大鼠肾组织GRP78表达升高,但未见明显肾小管损伤,与对照组比较,血肌肝、尿素氮水平无明显变化。③与I/R组比较,TM+I/R组大鼠GRP78表达(3.2±0.24)升高;肾小管损伤评分降低(P<0.05),血肌酐[(98.72±14.55)μmol/L]、尿素氮[(13.22±2.45)mmol/L]水平降低(P<0.05)。结论内质网应激预处理对急性缺血性肾损伤有保护作用,其机制可能为通过激活适宜的内质网应激,上调肾组织GRP78表达,从而抑制I/R导致的过度内质网应激,提高肾组织对缺血的耐受性,减轻细胞和组织损伤,实现其对大鼠急性缺血性肾损伤的保护作用。
- 冀志勇景宇张建国李开龙詹俊林利容何娅妮
- 关键词：再灌注损伤内质网应激
- 内质网应激在急性缺血性大鼠肾损伤中的作用被引量：12
- 2009年
- 目的研究大鼠肾脏内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)与急性缺血性肾损伤(acute kidney injury,AKI)的关系。方法30只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为假手术组(n=6)和模型组(n=24),模型组下设缺血40 min再灌注1、6、12、24 h 4个时相点,每个时相点6只。采用自动生化分析仪检测大鼠血肌酐、尿素氮水平。采用PAS染色检测肾小管损伤情况,免疫组化技术检测肾组织ERS标志物GRP78蛋白表达。结果①血肌酐在缺血再灌注(ischemic/reperfusion,I/R)后1 h明显升高,12 h达高峰,24 h下降(P<0.05)。肾小管损伤评分在I/R后1 h升高,12 h达高峰,24 h下降(P<0.05)。②肾组织中GRP78蛋白表达在I/R后6 h升高达高峰,至12 h仍持续较高水平(P<0.05),24 h时下降。③GRP78表达与肾小管损伤呈显著正相关性(r=0.671,P<0.05),也与血肌酐水平呈显著正相关性(r=0.559,P<0.05)。结论肾I/R启动了ERS,并且ERS与肾小管损伤、血肌酐水平呈正相关关系。ERS可能在AKI中起重要作用。
- 姚凤华何娅妮詹俊冀志勇
- 关键词：内质网应激GRP78肾缺血再灌注
- 内质网应激与肾脏疾病被引量：11
- 2007年
- 吴小玮何娅妮
- 关键词：内质网应激肾脏疾病肾脏病亚细胞水平
- 内质网应激与衰老被引量：1
- 2009年
- 内质网应激是内质网蛋白加工的质控机制。衰老原因和机制极为复杂,本文综述了内质网应激和衰老的关系。包括:衰老进程存在慢性内质网应激;衰老时内质网应激功能减退,转而影响衰老;衰老时内质网应激保护效应减退,损害效应增强;内质网应激促进衰老。能量限制延长寿命的机理之一是能量限制减轻内质网应激。
- 张光明何娅妮
- 关键词：内质网应激衰老
- 内质网应激在大鼠肾小管上皮细胞缺氧复氧损伤炎症反应中的作用被引量：4
- 2011年
- 目的观察大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E细胞)缺氧复氧损伤时内质网应激蛋白和炎症细胞因子表达的改变及其意义,以探讨缺氧复氧诱导大鼠肾小管上皮细胞内质网应激与炎症反应的关系。方法 NRK-52E细胞用含5%胎牛血清的DMEM液培养于37℃、5%CO2恒温培养箱。将细胞分为正常对照组和缺氧/复氧损伤(hypoxia reoxygenation,H/R)组。采用全自动生化分析仪检测细胞培养液上清LDH活性,Western blot方法检测GRP78、CHOP蛋白表达,ELISA法检测细胞上清IL-β水平。结果①与对照组细胞培养液上清LDH(22.07±1.23)U/L比较,H/R损伤组(45.93±6.42)U/L显著增加(P<0.05)。②与对照组肾小管上皮细胞GRP78表达(0.80±0.04)比较,H/R损伤组(1.24±0.04)明显增加(P<0.05)。③与对照组肾小管上皮细胞CHOP表达(0.81±0.05)比较,H/R损伤组(1.19±0.05)明显增加(P<0.05)。④与对照组IL-1β水平(6.55±2.03)pg/ml比较,H/R损伤组(14.93±2.26)pg/ml显著增加(P<0.01)。结论缺氧复氧可以诱导大鼠肾小管上皮细胞内质网应激与炎症反应。内质网应激上调CHOP表达可能在肾小管上皮细胞缺氧复氧损伤炎症反应中具有重要作用。
- 童玉娜杨聚荣张建国李开龙何娅妮
- 关键词：缺氧复氧内质网应激肾小管上皮细胞CHOP
- 内质网应激在肾脏疾病进展中的作用被引量：4
- 2010年
- 内质网应激是机体对有害刺激的一种自身应答机制,细胞是存活还是死亡取决于刺激信号的强弱,适宜的内质网应激可保护细胞免受各种刺激的损害作用,而过强或过长时间的内质网应激使保护机制不能与损伤抗衡则扰乱内质网稳态,诱导细胞凋亡发生。内质网应激作为多种应激过程的共同通路,与多种肾脏疾病的进展密切相关,例如:肾小球疾病、肾小管间质损伤、肾缺血再灌注损伤、糖尿病肾病等。本文就内质网应激在肾脏疾病进展中作用的研究进展作一综述。
- 刘俊何娅妮
- 关键词：内质网应激肾脏疾病
