国家自然科学基金(81170767)
- 作品数：15 被引量：26H指数：2
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- 糖尿病大鼠后肢缺血与内皮型一氧化氮合酶解耦联的关系
- 2014年
- 目的 探讨糖尿病大鼠后肢缺血损伤的血管内皮功能障碍与内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,eNOS）解耦联的关系.方法 15只SD大鼠随机分为正常组（5只）、糖尿病组（5只）及糖尿病后肢缺血组（5只）,建立糖尿病模型及糖尿病后肢缺血模型.建模2周后,用酶联免疫法检测各组股动脉一氧化氮（NO）的表达;用二氢乙锭（dihydroethidium,DHE）荧光探针法检测各组股动脉冰冻切片中超氧阴离子（O2-）的表达;Western blot检测各组股动脉1型三磷酸鸟苷环化水解酶（GPT cy-clohydrolase 1,GTPCH-1）的表达.结果 ①与正常组比较,糖尿病组股动脉NO表达降低,糖尿病后肢缺血组降低更为显著,3组间比较差异具有统计学意义（P=0.000,P=0.000,P=0.001）.②与正常组比较,糖尿病组O2-的表达明显增加,但不及糖尿病后肢缺血组.③与正常组比较,糖尿病组股动脉GTPCH-1的表达降低,糖尿病后肢缺血组降低更为显著,3组间比较差异具有统计学意义（P =0.001,P=0.000,P=0.012）.结论 在糖尿病大鼠后肢缺血血管损伤中存在eNOS解耦联.
- 余爱林高凌李竞
- 关键词：糖尿病缺血后肢氧自由基
- 非吞噬细胞氧化酶1介导糖基化终末产物对牛视网膜周细胞凋亡的影响
- 2013年
- 目的:探讨非吞噬细胞氧化酶1(NOX1)激活是否介导糖基化终末产物(AGE)对牛视网膜毛细血管周细胞(BRP)的凋亡。方法:将原代培养BRP分为3组:对照组、AGE组(200mg/L AGE)、干预组(200mg/L AGE+NOX1RNAi)。用锥蓝排斥法观察各组BRP的增殖,使用流式细胞术检测BRP凋亡水平,采用免疫杂交法检测活性Caspase-3的表达。结果:AGE组BRP增殖率较对照组明显降低;干预组则较AGE组明显升高(P均<0.01)。活性Caspase-3在AGE组表达上调,而在干预组表达降低(P均<0.01)。结论:AGE对BRP增殖的抑制或者促凋亡作用可能是通过激活Caspase-3实现,而信号通路NOX1的激活可能介导了AGE对Caspase-3的活化。
- 高凌李竞
- 关键词：晚期糖基化终末产物周细胞凋亡牛视网膜视网膜毛细血管
- 2型糖尿病大鼠后肢缺血模型的建立及评价被引量：2
- 2013年
- 目的建立2型糖尿病大鼠后肢缺血模型并进行评价,为后续的干预实验提供研究平台。方法将15只SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组及糖尿病后肢缺血组,每组5只。糖尿病组及糖尿病后肢缺血组的10只大鼠均给予高脂饮食喂养4周后,腹腔注射链脲佐菌素(STZ,40 mg/kg)以建立2型糖尿病模型。糖尿病后肢缺血组大鼠建模成功后行双侧髂总动脉结扎术以建立后肢缺血模型,正常对照组和糖尿病组大鼠仅分离髂总动脉,不予结扎。2周后对3组大鼠股动脉的起始段行彩色多普勒超声检查,以检测股动脉的血流峰值速度和血流加速时间;取缺血部位的小腿三头肌及大腿股四头肌组织,分别行HE染色及免疫组化SP染色,以观察3组大鼠肌细胞的营养状况及血管再生情况。结果后肢缺血模型建模2周后,正常对照组、糖尿病组和糖尿病后肢缺血组大鼠的血流峰值速度分别为(22.49±3.02)cm/s、(17.36±2.60)cm/s和(11.23±1.26)cm/s,血流加速时间分别为(0.080±0.009)s、(0.120±0.009)s和(0.160±0.020)s,糖尿病后肢缺血组大鼠的股动脉血流峰值速度小于正常对照组和糖尿病组(P<0.05),而血流加速时间较长(P<0.05)。HE染色结果显示:糖尿病后肢缺血组大鼠小腿三头肌的结构破坏,有大量炎症细胞浸润,肌肉损伤程度重于正常对照组和糖尿病组。免疫组化SP染色结果显示:糖尿病后肢缺血组大鼠大腿股四头肌的毛细血管密度〔(1.40±0.55)个/HPF〕小于正常对照组〔(6.80±0.84)个/HPF〕及糖尿病组〔(4.60±0.55)个/HPF〕,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论对SD大鼠给予高脂饮食联合小剂量STZ注射可以成功诱导2型糖尿病模型,在此模型基础上结扎髂总动脉可以成功制备糖尿病后肢缺血模型。
- 余爱林李竞高凌
- 关键词：2型糖尿病后肢缺血模型
- 2型糖尿病和糖调节异常患者胰岛α、β细胞功能的变化被引量：12
- 2017年
- 目的探讨2型糖尿病(T2DM)和糖调节异常(IGR)患者胰岛α、β细胞功能的变化。方法选取2014年4月-2016年4月在该院就诊的T2DM和IGR患者120例。其中,T2DM患者68例(T2DM组),IGR患者52例(IGR组),同时选取健康体检者40例作为对照组,观察各组空腹状态下胰岛素稳态模型分泌指数(HOMA-β)、胰岛素稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平。结果 T2DM组血糖、胰高血糖素和游离脂肪酸分别为(8.70±0.73)mmol/L、(210.11±40.14)nmol/L和(0.89±0.21)mmol/L,与IGR组比较,差异有统计学意义(P<0.05),T2DM组高于IGR组;T2DM组胰岛素水平与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);IGR组胰岛素水平与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);T2DM组HOMA-IR为0.83(0.42,1.10),与IGR组、对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);而HOMA-β为(3.61±0.72),与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);各组空腹胰高血糖素与HOMA-IR水平呈正相关(P<0.05),与HOMA-β呈负相关(P<0.05);T2DM组和IGR组空腹胰高血糖素与游离脂肪酸呈正相关(P<0.05);口服葡萄糖耐量试验30、60、90和120 min时T2DM组胰岛素水平与IGR组、对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),IGR组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);口服葡萄糖耐量试验30、60、90和120 min时T2DM组胰高血糖素水平与IGR组、对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),IGR组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 T2DM和IGR患者胰岛α、β细胞分泌异常,其中胰高血糖素和游离脂肪酸水平升高,且与HOMA-IR和HOMA-β水平有相关性。
- 王小娟关秀军邓斌高凌
- 关键词：2型糖尿病糖调节异常胰高血糖素游离脂肪酸
- NOX1在糖化终末产物诱导主动脉内皮细胞氧化应激中的作用
- 2013年
- 目的 探讨非吞噬细胞氧化酶1（NOX1）的激活是否是糖化终末产物（AGEs）诱导主动脉内皮细胞（BAECs）氧化应激的始动因素.方法 将BAECs分为3组：对照组（5.6 mmol/L葡萄糖）,AGE组（200 mg/L AGEs）和NOX1沉默干预组（200 mg/L AGEs＋ NOX1 RNAi）.用2＇,7 ＇二氯双氢荧光素二乙酸酯（H2DCFDA）检测各组氧自由基的水平;同时免疫杂交法检测NOX1、NOX2和调节eNOS耦联状态的关键酶二氢叶酸还原酶（DHFR）的蛋白表达.结果 AGEs培养2天后,NOX1和NOX2均表达上调,而DHFR的表达下降,同时伴有氧自由基水平的升高.NOX1 RNAi转染后,NOX2的表达不受影响,DHFR的表达和氧自由基的产生则均恢复到正常对照水平.结论 AGEs对BAECs氧化应激的诱导是通过激活NOX1起始的,NOX1的激活也通过抑制DHFR的表达来促进内皮一氧化氮合成酶（eNOS）的解耦联而加重氧化应激.
- 高凌李竞
- 关键词：糖化终末产物内皮细胞氧化应激二氢叶酸还原酶
- 一氧化氮合成酶耦联状态与糖化终末产物诱导的视网膜内皮细胞的氧化应激与凋亡的关系被引量：1
- 2013年
- 目的 探讨二氢叶酸还原酶（DHFR）是否参与了糖化终末产物（AGE）对牛视网膜毛细血管内皮细胞（BREC）氧化应激和凋亡的诱导.方法 用锥蓝排斥法观察AGE（200 mg/L）培养对BREC增殖的影响,膜联蛋白Ⅴ染色检测细胞的凋亡;免疫荧光染色法检测氧自由基和过氧化硝基;同时免疫杂交法检测DHFR.结果 AGE培养2天后,DHFR的表达明显受抑（P＜0.01）,而氧自由基和过氧化硝基合成增加,同时凋亡和死亡细胞也明显增加.但过表达DHFR后,氧自由基和过氧化硝基均回复正常而凋亡细胞则显著减少.结论 AGE对视网膜内皮细胞增殖的抑制或者促凋亡作用,至少一部分是通过抑制DHFR表达并诱导一氧化氮合成酶（eNOS）解耦联和之后的氧化应激来实现的.
- 高凌李竞
- 关键词：糖化终末产物凋亡二氢叶酸还原酶
- 丝裂原活化蛋白激酶活化在17β-雌二醇诱导血管内皮细胞一氧化氮释放中的作用
- 2013年
- 目的:利用小牛胸主动脉内皮细胞(BAECs)作为模型,研究17β-雌二醇(E2)促进血管内皮细胞快速激活一氧化氮(NO)的机制。方法:使用电子旋转共振法测定NO和蛋白免疫杂交法检测内皮一氧化氮合成酶(eNOS)的表达及其磷酸化、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK42/44)磷酸化水平。结果:研究结果显示,雌二醇(E2)增加NO的合成,同时伴有MAPK42/44的活化。而MAPK42/44的抑制剂(U0126)不仅阻断了17β-雌二醇(E2)对该激酶的激活和eNOS磷酸化,还降低NO的水平。结论:17β-雌二醇促进一氧化氮(NO)的释放是通过丝裂原活化蛋白激酶介导的eNOS磷酸化实现的。
- 高凌
- 关键词：丝裂原活化蛋白激酶雌二醇一氧化氮一氧化氮合成酶
- 高脂饮食诱导胰岛素抵抗小鼠胰岛IRc/IRS-1低表达被引量：1
- 2015年
- 目的:观察高脂饮食诱导的胰岛素抵抗模型小鼠胰岛上胰岛素受体(IRc)/胰岛素受体底物-1(IRS-1)表达的变化。方法:20只雄性昆明小鼠随机分为高脂饲料模型组和普通饲料对照组,每组各10只。喂养20周后,观察两组小鼠大体情况,称量体重(BW),酶法测空腹血糖(FBG),酶联免疫法测空腹胰岛素(FIns)浓度,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);HE染色观察胰岛组织学变化;免疫组织化学染色分析胰岛IRc/IRS-1的表达。比较两组各检测指标的统计学差异。结果:模型组FBG、HOMA-IR明显高于对照组(P均<0.01);胰岛边界欠完整,内部结构紊乱,伴炎性细胞浸润;IRc/IRS-1的表达较对照组明显降低(P均<0.05)。结论:高脂饮食可成功诱导小鼠外周胰岛素抵抗,且胰岛上IRc/IRS-1的表达降低。
- 谢敏李竞高凌徐晓艺李铮
- 关键词：高脂饮食胰岛素抵抗胰岛素受体胰岛素受体底物-1
- 二甲双胍对糖尿病合并乙型肝炎患者的影响被引量：2
- 2015年
- 目的探讨二甲双胍对2型糖尿病合并乙型病毒性肝炎（简称乙肝）患者病毒复制和肝功能的影响。方法将82例有乙肝病史的新诊断2型糖尿病患者随机分为二甲双胍组（40例）和非二甲双胍治疗组（42例）进行降血糖治疗；在开始降血糖治疗前和治疗3个月后检测患者血压、身高、体重、腰围、肝功能、血脂、血糖、胰岛素、乙肝DNA、乙肝血清学等一般临床资料和生化指标并进行分析比较。结果二甲双胍组和非二甲双胍组均可明显改善患者血糖和B细胞功能（P〈0．05）。二甲双胍组在改善腰围、甘油三酯、BMI和胰岛素敏感指数方面优于非二甲双胍组（P〈0．05）。同时二甲双胍对肝功能和乙肝病毒复制无明显作用，与非二甲双胍组差异尢统计学意义。结论二甲双胍用于无严重并发症的2型糖尿病合并乙肝患者较为安全有效。
- 高凌叶惠凤
- 关键词：二甲双胍2型糖尿病乙型肝炎肝功能
- 二氢叶酸还原酶介导层流体切力中对内皮细胞的保护作用
- 2014年
- 目的 初步探讨层流对血管内皮的保护机制.方法 将牛主动脉内皮细胞在特殊材料的装片上培养并置于特殊的容器内,由计算机发出的信号分别传给泵/控制板和容器,用于控制来自装瓶溶液的流速/流动方向.内皮细胞被机械力作用后,再收集细胞进行检测.结果 二氢叶酸还原酶（DHFR）在层流（15 dyns/cm^2）作用下表达上调,同时伴有氧自由基的下调和一氧化氮的合成增加,细胞间黏附因子（ICAM-1）的表达下降.转染DHFR RNA干扰后,上述变化消失.结论 DHFR的上调可能介导了层流对内皮细胞功能的保护作用.
- 高凌
- 关键词：二氢叶酸还原酶细胞间黏附分子-1层流
