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甘肃省科技重大专项计划(1102NKDN058)
甘肃省科技重大专项计划(1102NKDN058)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：邵威平杨富民颜丽更多>>
- 相关机构：甘肃农业大学更多>>
- 发文基金：甘肃省科技重大专项计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 重组枯草芽孢杆菌发酵产青霉素G酰化酶的条件优化
- 2016年
- 【目的】研究提高PGA酶活力及稳定性.【方法】以重组枯草芽孢杆菌10397(pMA5-PGA)产PGA酶活力为研究对象,在单因素试验基础上,采用响应面设计,对重组菌发酵产PGA的培养基及发酵条件进行了研究.【结果】以葡萄糖20.39g/L、胰蛋白胨15.48g/L、糊精6.1g/L为培养基,在三角瓶装液量16.23%、接种量4.32%、温度35.43℃、时间48.34h、摇床转速220r/min的条件下,所产PGA的酶活力为14.167U/mL,比初始发酵条件下发酵重组菌产PGA的酶活提高了1.14倍.【结论】通过条件优化,可提高重组枯草芽孢杆菌PGA的酶活力,并为工业化生产PGA提供科学依据.
- 吴卓颖邵威平张永玲杨富民田常庆
- 关键词：发酵青霉素G酰化酶
- 巨大芽孢杆菌发酵产青霉素G酰化酶的条件优化被引量：2
- 2013年
- 以牦牛乳酸水解酪蛋白为氮源,在单因素试验的基础上,采用响应面设计,对巨大芽孢杆菌产青霉素G酰化酶培养基及发酵条件进行了研究.结果表明:以葡萄糖4.28g/L、牦牛乳酸水解酪蛋白10g/L、苯乙酸18.43g/L、MgCl2·6H2O 0.5g/L、FeCl3·6H2O 0.002g/L为培养基,在三角瓶装液量19.3%、接种量5.6%、温度28℃、时间48h、摇床转速220r/min的条件下,所产青霉素G酰化酶活力为232.05U/L,与未添加牦牛乳酸水解酪蛋白对照组相比提高了42.25%.
- 颜丽张永玲杨富民邵威平
- 关键词：巨大芽孢杆菌发酵青霉素G酰化酶
- 产青霉素G酰化酶工程菌的构建被引量：1
- 2016年
- 【目的】构建表达巨大芽孢杆菌青霉素G酰化酶(PGA)的枯草芽孢杆菌工程菌.【方法】首先采用PCR从巨大芽孢杆菌基因组DNA中扩增出长度为2 409bp的PGA编码基因,经琼脂糖凝胶电泳检测及DNA测序验证后,再将其与枯草芽孢杆菌穿梭表达载体PMA5(7.5kb)连接后导入到枯草芽孢杆菌10397中表达,并通过聚丙烯酰胺琼脂糖凝胶电泳(SDS-PAGE)检验其能否表达.【结果】构建了9.9kb大小的PMA5-PGA重组质粒,经SDS-PAGE验证,青霉素酶基因在枯草芽孢杆菌10 397中作出表达.基因工程菌在37℃、220r/min培养36h发酵条件下,所产PGA的酶活可达到12.426U/mL,比巨大芽孢杆菌发酵产PGA酶提高了5.26倍.【结论】所构建的枯草芽孢杆菌是青霉素G酰化酶的高产工程菌.
- 邵威平吴卓颖张永玲杨富民田常庆
- 关键词：青霉素G酰化酶PCR基因工程菌
