国家教育部博士点基金(20100061120076)
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- 来源于Alcaligenes A-6的D-氨基酰化酶基因的合成与融合表达
- 2014年
- 将来源于Alcaligenes A-6的D-氨基酰化酶基因用大肠杆菌中的丰沛密码子替换,利用化学和基于聚合酶链反应(PCR)技术的酶促方法进行基因全合成,利用pET-32a构建重组表达载体pET-dan,转化进E.coil BL21(DE3)中进行融合表达.经SDS-PAGE电泳、Western-blot检测和活性测定发现,D-ANase可在大肠杆菌中高效表达,目的蛋白可达到菌体总蛋白的69.2%,密码子优化后基因构建的工程菌发酵活性为96 U/mL,重组蛋白经超声细胞破碎及Ni2+柱亲和层析纯化,比活可达1692.3 U/mg,纯度可达95%以上.
- 侯欣彤董媛林瑞东于梁任媛媛李剑光高朝辉滕利荣
- 关键词：基因合成
- 一族带有3个参数的三阶收敛迭代方法
- 2012年
- 提出一种求解非线性方程f(x)=0近似解问题的一族带有3个参数的迭代方法,通过选取不同的参数值,可以得到不同的迭代方法.该方法不用计算函数的二阶导数即可达到三阶收敛.收敛性分析和数值实验表明,该方法与其他同阶收敛性质方法相比具有一定的有效性.
- 刘天宝王彩玲马明娟左平
- 关键词：迭代方法收敛阶
