广东省自然科学基金(06300772)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 相关作者：孙良忠岳智慧陈述枚李易娟莫樱更多>>
- 相关机构：中山大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 环孢素A对肾小管上皮细胞MMP-2和MMP-9表达和活性的影响被引量：2
- 2010年
- 【目的】观察环孢素A(CSA)对近端肾小管上皮细胞基质金属蛋白酶-2和-9(MMP-2和MMP-9)表达和活性的影响。【方法】体外培养大鼠近端肾小管上皮细胞株NRK52E细胞至完全融合时,分别给予不同浓度的CSA0,0.42,0.84,4.2,8.4μmoL/L,实验观察48h和72h。收集培养液,用明胶酶谱法检测MMP-2和MMP-9活性。提取总RNA,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测MMP-2和MMP-9的mRNA水平。【结果】CSA刺激NRK52E细胞呈剂量依赖性抑制MMP-2活性和mRNA表达。与对照组(CSA0μmoL/L)比较,CSA0.42,0.84,4.2,8.4μmoL/L的MMP-2活性分别下降为27%,24%,11%,9%;差异均有统计学意义,P<0.05。CSA刺激NRK52E细胞增加MMP-9活性和mRNA表达。与对照组比较,CSA4.2μmoL/L刺激48hMMP-9活性上调为438%,72h上调为237%,差异均有统计学意义,P<0.05。【结论】CSA对肾小管上皮细胞MMP-2表达和活性呈剂量依赖性抑制,以及对MMP-9表达和活性的诱导作用可能与CSA所致肾小管间质损害相关。
- 岳智慧孙良忠李易娟莫樱蒋小云陈述枚
- 关键词：环孢素A基质金属蛋白酶肾小管上皮细胞
- 白蛋白超载诱导近端肾小管上皮细胞表达α-平滑肌肌动蛋白被引量：5
- 2008年
- 目的:探讨白蛋白超载是否可以诱导近端肾小管上皮细胞(PTCs)向成肌纤维细胞转化(EMT)。方法:大鼠近端肾小管上皮细胞株NRK52E培养至70%融合或完全融合时,用不同浓度(0-30g/L)去脂牛血清白蛋白(dBSA)超载144h。NRK52E形态和结构改变用光镜和电镜观测。上皮细胞标记抗原E-钙黏蛋白和β-连环蛋白,以及成肌纤维细胞标记抗原α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达用免疫荧光和Western印迹法检测。结果:dBSA超载可诱导未完全融合NRK52E表达α-SMA,少数细胞变为长梭形,但α-SMA的表达不呈剂量依赖性。dBSA超载处理不能诱导完全融合的NRK52E表达α-SMA,细胞形态也无改变。dBSA超载完全或未完全融合NRK52E均不能抑制E-钙黏蛋白和β-连环蛋白表达,电镜显示这些细胞仍保持上皮细胞结构,包括微绒毛和紧密连接。结论:白蛋白超载可以诱导PTCs表达α-SMA,促进EMT,但不能诱导PTCs完全转化为成肌纤维细胞,细胞完全融合可抑制白蛋白超载诱导PTCs表达α-SMA。
- 孙良忠岳智慧陈述枚
- 关键词：白蛋白类肾小管上皮细胞Α-平滑肌肌动蛋白
- 白蛋白对近端肾小管上皮细胞增殖与凋亡的影响被引量：2
- 2007年
- 【目的】探讨白蛋白对近端肾小管上皮细胞(PTCs)增殖与凋亡的影响。【方法】用不同剂量(0.1,0.5,1,5,10,30mg/mL)去脂牛血清白蛋白(dBSA)超载体外培养的NRK52E,dBSA0mg/mL作为对照。细胞增殖活性用MTS比色法检测和显微镜观察。细胞凋亡检测:荧光染料DAPI染核,DNA梯带实验,原位末端标记(TUNEL)实验和苔盼蓝染色计数。【结果】高剂量dBSA超载未完全融合NRK52E细胞144h后细胞变得更密集。MTS比色结果发现,高剂量dBSA(5、10、30mg/mL)超载可明显诱导NRK52E细胞增殖,增殖活性分别为(0.700±0.045)A、(1.021±0.029)A和(1.273±0.173)A,较对照细胞(0.441±0.020)A显著升高,P均<0.05。高剂量dBSA超载的NRK52E细胞,有较多出现核碎裂和核固缩,有较强DNA梯带和原位末端标记信号。苔盼蓝染色计数发现,高剂量dBSA(5、10、30mg/mL)超载NRK52E细胞72h的死亡细胞数[(680000±28618)/mL,(970000±52915)/mL和(1132500±88954)/mL较对照的死亡细胞数[(312500±28395)/mL]显著升高,P均<0.05;而且死亡细胞数呈剂量依赖性。【结论】白蛋白超载NRK52E细胞既可诱导细胞增殖,又可诱导细胞凋亡。
- 孙良忠岳智慧陈述枚
- 关键词：白蛋白肾小管上皮细胞细胞增殖细胞凋亡
