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国家科技重大专项(2009ZX10004-312)
作品数:
2
被引量:7
H指数:2
相关作者:
朱海珍
方晓红
徐丽
赵子龙
张振
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相关机构:
湖南大学
中国科学院
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发文基金:
国家科技重大专项
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作者
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朱海珍
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基于核酸适体的丙肝病毒核心蛋白检测新方法
被引量:5
2011年
丙型病毒性肝炎是由丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)引起的一种传染性疾病.发展对HCV抗原具有高亲和力高特异性的识别分子和检测方法对丙肝进行早期诊断具有非常重要的意义.我们通过SELEX筛选得到了能特异性识别HCV核心蛋白(core蛋白)的DNA核酸适体,建立了可对HCV core蛋白进行高灵敏检测的核酸适体-酶联免疫新方法,并成功应用于丙肝病人血清中HCV core蛋白的检测,有望发展成为简便、灵敏、低成本的HCV早期诊断和血清筛查新方法.
张振
赵子龙
徐丽
吴新姣
朱海珍
谭蔚泓
方晓红
关键词:
丙肝
核心蛋白
核酸适体
SELEX
酶联免疫法
人膜蛋白CD81的原核表达与纯化
被引量:2
2012年
以高效原核表达载体pCold TF为载体骨架,应用PCR、限制性酶切、连接等分子生物学方法,将pCold TF中的六聚组氨酸(His-Tag)序列替换为限制性酶切位点SpeⅠ序列ACTAGT,构建不含His-Tag序列的新载体pL118.以此载体表达蛋白时,通过PCR引物在目的基因3′端添加His-Tag以利于融合蛋白的纯化以及融合蛋白中的Trigger Fac-tor(TF)助溶蛋白的去除.应用pL118对人膜蛋白CD81进行原核表达与纯化,并使用Fac-tor Xa蛋白酶去除CD81融合蛋白中的TF助溶蛋白,获得3′端含有His-Tag的CD81蛋白.人膜蛋白CD81的表达纯化,为CD81靶向药物筛选、抗体制备及深入研究CD81的功能奠定了基础.pL118载体的构建以及CD81蛋白的表达纯化为表达困难的基因实现原核表达提供了一种新的思路和方法.
朱海珍
雷少华
刘春艳
焦宇
于晓妍
高益敏
关键词:
蛋白表达
纯化
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