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国家自然科学基金(31172236)
国家自然科学基金(31172236) 作品数:7 被引量:23 H指数:2 相关作者: 丁武 王妍稳 李璠 张莉丽 王佳奕 更多>> 相关机构: 西北农林科技大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中央高校基本科研业务费专项资金 陕西省社会发展科技攻关项目 更多>> 相关领域: 生物学 轻工技术与工程 更多>>
电子鼻对羊奶中三种抗生素残留的快速检测 2013年 目的实现羊奶中常用抗生素残留的快速检测。方法以电子鼻作为快速无损的检测仪器,将含有不同浓度的青霉素G、硫酸庆大霉素、硫酸链霉素的羊奶作为研究对象,利用线性判别分析(linear discrimin antanalysis,LDA)和多层感知器神经网络(multilayer perceptro nneura lnetwork,MLPN)等方法进行数据处理。结果 LDA的判别结果总体上能够将不同浓度的抗生素区分开来,效果良好;MLPN的训练集和预测集的正确率也都在94.9%以上,取得了很好的预测效果。结论 LDA判定分组和MLPN预测模型可以用于羊奶中不同浓度青霉素G、硫酸庆大霉素、硫酸链霉素的快速检测。 王妍稳 张瑶 丁武关键词:电子鼻 羊奶 抗生素 青海弧菌荧光素酶基因LuxAB的原核表达 被引量:2 2015年 为研究青海弧菌的发光机制,参考霍乱弧菌的发光基因,设计了青海弧菌Lux AB基因的扩增引物,经PCR反应得到相应的片段,并建立了与其他常见荧光素酶的系统发育关系;同时对青海弧菌的16S r DNA进行克隆和测序,并基于16S r DNA建立青海弧菌与其他相近细菌之间的亲缘关系;随后,成功将Lux AB克隆到表达载体PHSG396中,转化大肠杆菌Top10,成功实现重组质粒在大肠杆菌中的表达。 王妍稳 丁武 李璠 张莉丽 魏新元关键词:青海弧菌 克隆 原核表达 Lux基因重组铜绿假单胞菌的发光特性、抑菌评估和生物膜形成机理探究 发光细菌能够通过自身携带的luxCDABE基因簇编码合成荧光素酶及其相应的发光底物而产生独特的光信号。LuxCDABE基因由于其自发荧光背景低、非破坏、易于检测等优点,已被作为报告基因用于食品和环境中各种微生物的模型研究... 王綪关键词:铜绿假单胞菌 发光特性 数学模型 抑菌性 生物膜 文献传递 电子鼻结合化学计量法对羊奶中蛋白质掺假的识别 被引量:12 2017年 利用电子鼻结合化学计量法对羊奶中的蛋白质掺假进行定性和定量的研究。用电子鼻检测掺入了不同蛋白质物质的羊奶,采用主成分分析、线性判别分析对电子鼻响应值进行定性分析,采用线性回归分析、Fisher判别分析以及K-最邻近值分析对电子鼻响应值进行定量分析。结果表明:主成分分析和线性判别分析都能够区分不同类别的掺假样品。线性回归分析的决定系数为84.5%,表明回归方程估测可靠程度较高。Fisher判别分析的原始分类的正确率达到100.0%,交叉验证的正确率为98.2%,说明其预测结果较好。K-最邻近值分析对训练集的分类正确率达到95.1%,对验证集的分类正确率为97.1%,说明模型的预测结果良好。说明应用电子鼻技术检测羊奶中的蛋白质掺假具有一定的可行性。 贾茹 张娟 王佳奕 丁武关键词:羊奶 电子鼻 青海弧菌lux基因在大肠杆菌中的异源表达 被引量:1 2014年 研究淡水发光菌青海弧菌Vibrio qinghaiensis Q67的lux CDABE发光基因在大肠杆菌中的表达,并测定其对相关因素的耐受性,为其应用条件的筛选提供有利依据.对构建好的重组菌进行酶切验证筛选出发光重组菌,将其在含氯霉素的液体LB培养基中以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)为诱导剂,对发光特性的表达条件进行研究,考察重组菌生长与发光的对应关系,癸醛、p H、温度和IPTG对发光的影响,以及重组菌在室温下的稳定性测定.结果显示,重组菌发光强度随菌体生长先升后降,在对数生长后期发光强度达到最大;当癸醛浓度(0.1-3.0μL/m L)、p H(3.0-11.0)、温度(25-43℃)和IPTG(0.05-0.35 mg/m L)从小到大变化时,重组菌的光强均呈现先增后减趋势;各影响因素分别为癸醛浓度1.0μL/m L,p H 6.0,温度37℃,IPTG浓度0.10 mg/m L时,重组菌发光最强;发光在10min内达到最大值后迅速下降,后来平缓波动趋于稳定,3 h内光强仍在测量范围内.本研究表明,青海弧菌lux CDABE基因在大肠杆菌中能很好表达并维持发光,重组菌对环境的耐受性为lux基因作为发光标记基因提供了应用范围参考. 张莉丽 丁武 王妍稳 李璠关键词:青海弧菌 重组菌 发光 异源表达 壳聚糖黄原胶鼠李糖乳杆菌微胶囊的制备及其特性的研究 被引量:8 2017年 本研究利用壳聚糖和黄原胶作为壁材,用乳化法包埋鼠李糖乳杆菌,以包埋率为指标,探究其最佳的制备工艺,发现当壳聚糖浓度为0.8%,黄原胶浓度为1.0%,转速为900 r/min时效果最佳,最佳包埋率为88.9%。制备的微胶囊粒径在300μm左右,分布较为均匀。在模拟胃液和模拟胆液中静置2 h后仍分别有3.56 lg CFU/m L和3.4 lg CFU/m L活菌体,表明其对菌体有较强的保护作用。 王远一飞 丁武 宋莹莹 黄亚萍关键词:壳聚糖 黄原胶 鼠李糖乳杆菌 微胶囊 包埋 青海弧菌荧光素酶的异源表达条件的优化 被引量:1 2018年 生物发光标记以其可视化,便捷,快速,灵敏,可用于活体研究等诸多优点越来越多地应用于科学研究中。本研究通过Ca Cl2方法将实验室构建的带有青海弧菌荧光素酶基因lux AB的重组质粒导入大肠杆菌Top10中,利用酶切和核酸电泳检测荧光素酶基因的存在,利用SDS-PAGE检测荧光素酶表达的情况,然后对其表达条件进行优化。单因素试验结果表明:在培养基初始pH值6.0,癸醛体积分数1.25‰,接种量1%,IPTG浓度0.1 mmol/L,装液量50 m L/150 m L,温度37℃条件下,重组菌的发光度最大,即表达量最高。正交试验结果表明:当pH 6,IPTG浓度0.08 mmol/L,接种量1.2%,温度36℃时重组大肠杆菌表达情况最好,发光度达1 262.7。本研究中的重组大肠杆菌为在益生菌等食品微生物中的应用提供技术依据。 李璠 丁武 彭国霞 王妍稳 张莉丽关键词:青海弧菌 荧光素酶 生物发光 青海弧菌luxCDABE基因在大肠杆菌中克隆与表达 2017年 为探究荧光素酶编码基因表达产物发光特性,以青海弧菌基因组为模版扩增得到luxCDABE基因,构建表达载体pHSG396-luxCDABE。将载体导入大肠杆菌Top10,成功获得表达菌株Top10/pHSG396-luxCDABE(T-pluxCDABE),测定重组菌株的表达活性,与实验室构建的菌株Top10/pHSG 396-luxAB(T-pluxAB)发光情况进行比较。 李璠 丁武 王妍稳关键词:青海弧菌 LUXCDABE 克隆