江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目(06-B-070)
- 作品数：3 被引量：11H指数：1
- 相关作者：刘晓安王水王凤良凌立君沈恩超更多>>
- 相关机构：江苏省人民医院更多>>
- 发文基金：江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目江苏省博士后科研资助计划项目江苏省卫生厅重点人才基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 血清Tracp5b诊断乳腺癌骨转移及评价双膦酸盐治疗疗效的临床意义被引量：9
- 2007年
- 目的:比较乳腺癌患者血清抗酒石酸酸性膦酸酶(Tracp5b)、糖类抗原-153(CA-153)及癌胚抗原(CEA)在诊断乳腺癌骨转移及评价双膦酸盐治疗效果中的临床意义。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)及电化学发光法检测18名健康女性、26例无骨转移乳腺癌患者及32例乳腺癌骨转移患者的血清Tracp5b、CA-153及CEA水平;检测其中19例乳腺癌骨转移患者口服双膦酸盐骨膦(氯膦酸二钠)治疗3个月后血清Tracp5b、CA-153和CEA水平。结果:乳腺癌骨转移组血清Tracp5b的水平较无骨转移组及健康对照组明显升高,差异有统计学意义,P<0.05;血清Tracp5b诊断乳腺癌骨转移的敏感性为78.13%,特异性为86.36%;CA-153敏感性为37.50%,特异性为77.27%;CEA敏感性为21.88%,特异性为84.09%;Tracp5b的敏感性较CA-153、CEA高,差异有统计学意义,P<0.05。骨转移组19例患者经双膦酸盐治疗3个月后Tracp5b水平明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),而CA-153及CEA下降不明显,差异无统计学意义,P>0.05。结论:Tracp5b在诊断乳腺癌骨转移中的敏感性较CA-153、CEA为高,可作为诊断乳腺癌骨转移和评价双膦酸盐治疗疗效血清标志之一。
- 王凤良王水凌立君沈恩超刘晓安
- 关键词：酸性磷酸酶二膦酸盐类肿瘤相关
- 慢病毒转染绿色荧光蛋白对乳腺癌细胞系肿瘤干细胞相关亚群的影响被引量：1
- 2008年
- 背景:研究发现通过流式分选的SP肿瘤干细胞具有干细胞功能,提示可用于检测表面标志未知的肿瘤干细胞。目的:观察慢病毒转染绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)对乳腺癌细胞系MCF-7中SP肿瘤干细胞生物学特性及亚群分布的影响。设计、时间及地点:细胞学基因检测水平体外观察,于2007-06/2008-07在南京医科大学第一附属医院普外科实验室完成。材料:MCF-7细胞株由上海细胞生物学研究所馈赠,GFP-MCF-7细胞株由江苏省人民医院普外实验室保存。方法:取MCF-7与GFP-MCF-7细胞株,加入含10%小牛血清的高糖DMEM培养液,在37℃、体积分数为0.05的CO2饱和湿度恒温箱中培养,生长至80%～90%融合时消化传代,取处于对数生长期的两种细胞进行实验。主要观察指标:利用流式细胞技术检测转染前后细胞中SP肿瘤干细胞的比例,运用Percoll不连续密度梯度法分离转染前后富集SP肿瘤干细胞的亚群,平板克隆实验测定各亚群的克隆形成率,观察比较转染前后细胞生长曲线、骨桥蛋白的表达水平。结果:MCF-7与GFP-MCF-7细胞中SP肿瘤干细胞比例分别为2.79%和2.73%,转染前后差异无显著性意义(t=2.184,P>0.05)。经Percoll分选,MCF-7与GFP-MCF-7细胞均分为5层,其中GFP-MCF-7第4亚群中明显富集SP肿瘤干细胞,且克隆形成率最高(t=3.415,P<0.01)。转染前后细胞生长曲线无明显变化,且骨桥蛋白的表达水平基本相似(t=2.562,P>0.05)。结论:慢病毒转染绿色荧光蛋白对MCF-7中的SP肿瘤干细胞比例、亚群分布、细胞生物学特性无明显影响,且Percoll不连续密度梯度法富集效果显著。GFP-MCF-7细胞株可用于乳腺癌肿瘤干细胞转移动物模型的构建等实验。
- 刘学敏王水夏添松王珏刘晓安
- 关键词：慢病毒转染
- 巢式RT-PCR检测乳腺癌外周血循环肿瘤细胞的临床价值被引量：1
- 2010年
- 目的:联合采用细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)及乳腺上皮黏蛋白(small breast epithelial mucin,SBEM)指标,探讨通过巢式RT-PCR(nested RT-PCR)方法检测乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTC)的临床价值。方法:采用MCF-7RNA与健康志愿者外周血单核细胞(peripheral mononuclear cell,PMNC)RNA进行梯度混合后的反转录产物,检测优化后巢式RT-PCR体系的敏感性,再选择10例健康志愿者以及20例乳腺良性疾病患者外周血检测其特异性后,对56例乳腺癌患者外周血中CK19 mRNA及SBEM mRNA表达情况进行检测。结果:优化后的检测体系能够在3ml外周血PMNCs中检测到1个MCF-7细胞,10例健康志愿者以及20例乳腺良性疾病患者外周血中未检测到CK19 mRNA与SBEM mRNA的表达;两者的表达与原发肿瘤大小,腋窝淋巴结状况及TNM分期相关(P<0.05),而与原发肿瘤病理类型,激素受体以及C-erbB-2的表达无明显相关性(P>0.05)。结论:经过优化的巢式RT-PCR体系联合检测乳腺癌患者外周血CK19 mRNA及SBEM mRNA的表达敏感性和特异性较高,能用于检测外周血CTC,对进一步精确评估预后及指导治疗可能有较高的临床价值。
- 傅卫王水杜青肇毅查小明刘晓安
- 关键词：乳腺癌循环肿瘤细胞细胞角蛋白19
