国家杰出青年科学基金(30625034)
- 作品数：9 被引量：30H指数：4
- 相关作者：房静远张燕捷孙丹凤沈冠凤王霞更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属仁济医院上海交通大学医学院附属第三人民医院上海消化疾病研究所更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 介导抑癌蛋白泛素化的新分子被引量：2
- 2007年
- 抑癌蛋白泛素化机制在肿瘤发生发展过程中扮演重要角色。其中,NEDD4-1介导的PTEN泛素化与Cowden综合征密切相关,Livin介导的Smac/DIABLO泛素化,以及癌性锚蛋白重复序列、转录因子E4F1等介导的P53泛素化均在肿瘤发生过程中扮演重要角色。近期研究表明,这些介导抑癌蛋白泛素化的新分子有望成为肿瘤治疗的靶点。
- 张燕捷房静远
- 抑制mTOR信号通路可增强5-aza-dC对胃癌细胞生长的抑制作用被引量：9
- 2008年
- 本实验主要研究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路与DNA甲基化在人胃癌细胞生存活力、细胞周期、相关基因及蛋白表达方面的相互作用.分别单独或联合DNA甲基化酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-aza-dC)、mTOR抑制剂雷帕霉素(rapamycin,RAPA)和PI3K抑制剂LY294002干预人胃癌MKN45和SGC7901细胞,以MTT检测细胞生存活力,流式细胞术检测细胞周期,real-timePCR检测PTEN,p27Kip1基因表达情况,亚硫酸氢盐修饰后测序检测DNA甲基化改变,蛋白免疫印迹检测相关蛋白表达情况.结果发现单独应用5-aza-dC对胃癌细胞的抑制作用不明显,当其联合mTOR信号通路抑制剂时则显著抑制胃癌细胞生长(P<0.01);抑制mTOR信号通路可增强5-aza-dC使细胞阻滞在G2期的作用;联合用药还能提高抑癌基因PTEN,p27Kip1的表达,但不影响DNA甲基化状态;LY294002及RAPA使Akt,p70S6K及4E-BP1磷酸化表达显著下降(P<0.01),但5-aza-dC并不增强这一效应.以上研究提示mTOR信号通路抑制剂可间接促进DNA甲基化酶抑制剂对胃癌细胞的抑制作用,为肿瘤的治疗提供新思路.
- 孙丹凤田筱青张燕捷陈萦晅陆嵘王霞房静远
- 关键词：哺乳动物雷帕霉素靶蛋白雷帕霉素DNA甲基化
- DNA甲基化酶抑制剂与雷帕霉素对人结直肠癌细胞周期及mTOR信号转导通路的联合作用被引量：5
- 2007年
- 目的探讨5-氮脱氧胞苷(5-aza-dC)与雷帕霉素(RPM)对人结直肠癌细胞的联合作用及机制。方法应用 MTY 比色法检测5-aza-dC 与 RPM 对3种人结直肠癌细胞株的生长抑制作用;应用流式细胞术检测两者对细胞周期的调控;应用免疫印迹法检测两者对于 mTOR 信号转导通路相关蛋白的影响。结果 5-aza-dC 与 RPM 对人结直肠癌细胞株 SW480、HT29和 HCT116均有生长抑制作用,在相同作用条件下,5-aza-dC 与 RPM 的联合抑制效果明显优于两者单独用药。5-aza-dC 与 RPM单独或联合用药对3种细胞的生长周期均具有调控作用(P<0.05),但作用位点不尽相同。5-aza-dC与 RPM 可下调 mTOR、p70s6K、4E-BP1蛋白的磷酸化水平,对蛋白的总体水平无明显影响,以两者的联合作用最为显著。结论 5-aza-dC 与 RPM 可联合抑制人结直肠癌细胞株 SW480、HT29和 HCT116的生长,并阻滞其细胞周期进程。其作用机制可能与影响 mTOR 信号转导通路蛋白磷酸化水平有关。
- 张燕捷房静远矫强赵树靓孙丹凤沈冠凤郭竹英
- 关键词：雷帕霉素结直肠癌信号转导
- 胃肠癌发生和预防中表观遗传修饰与信号通路的相关研究被引量：5
- 2014年
- 仁济消化学科胃肠肿瘤研究团队是教育部"创新团队",长期从事消化系肿瘤发生机制和防治研究.在胃癌发生和预防中的表观遗传学与信号通路相关研究中作了一定工作.初步明确了我国胃癌癌前疾病慢性萎缩性胃炎的转归情况;建立并验证了预测慢性萎缩性胃炎发生与转归的数学模型.分析了我国症状人群中大肠癌癌前疾病大肠腺瘤患病情况及变迁状况,腺瘤内镜下摘除后再发情况.进一步明确了胃肠癌发生中包括DNA甲基化、组蛋白修饰和非编码RNA(miRNA和天然反义转录本)的作用;阐明了与细胞增殖相关的JAK/STAT信号通路的作用意义;并初步证实了上述表观遗传修饰和信号通路的相互关系.证明了大肠腺瘤患者血浆叶酸和粪便短链脂肪酸及产短链脂肪酸的肠道菌群情况,为有效得干预预防奠定基础.多中心随机对照研究证明,叶酸可有效预防超过50岁人群的大肠腺瘤的发生,且作用与干预前后叶酸含量上升情况有关.并以第一完成单位和第一完成人获2005年上海市科技进步一等奖("表观遗传修饰及其在胃癌发生和预防中的应用")、2007年中华医学科技一等奖和2008年国家科技进步二等奖("叶酸和丁酸盐在胃肠癌发生和预防中的作用")及2014年教育部高等学校科学研究优秀成果(科技进步)一等奖.
- 房静远
- 关键词：表观遗传修饰信号通路
- 雷帕霉素与5-氮脱氧胞苷对小鼠大肠癌的联合抑制及机制被引量：1
- 2008年
- 目的探讨雷帕霉素（RPM）与5-氮脱氧胞苷（5-aza-dC）对小鼠大肠癌的联合抑制作用及机制。方法应用二甲基肼（DMH）颈后皮下注射20周建立小鼠大肠癌模型。从第16周起给予RPM、5-aza-dC以及RPM＋5-aza-dC腹腔注射，共8周；至试验24周处死实验动物，测算肿瘤体积，以HE染色判断肿瘤发生率；应用免疫组织化学法（IHC）检测肿瘤组织mTOR、p70s6K、4E-BPI蛋白的磷酸化水平。结果RPM、5-aza-dC及RPM＋5-aza-dC干预组小鼠大肠癌发生率显著低于模型组；RPM及RPM＋5-aza—dC干预组肿瘤体积明显小于模型组；5-aza-dC干预组肿瘤组织的mTOR磷酸化水平，以及RPM干预组mTOR、p70s6K,4E-BPI蛋白磷酸化水平显著低于模型组。在降低肿瘤发生率、减小肿瘤体积以及抑制mTOR信号通路活性方面，RPM＋5-aza-dC作用组的效果显著优于RPM及5-aza-dC单独作用组。结论RPM与5-aza-dC可联合抑制小鼠大肠癌的发生和生长，其作用机制可能涉及对mTOR信号转导通路相关蛋白磷酸化水平的调控。
- 张燕捷房静远徐芒华徐旨梅杜光烨陆嵘王霞
- 关键词：小鼠结肠癌雷帕霉素
- 雷帕霉素与PD98059联合抑制小鼠结直肠癌雷帕霉素靶蛋白信号转导通路
- 2009年
- 目的探讨雷帕霉素靶蛋白（mTOR）抑制剂雷帕霉素（rapamycin）与丝裂原激活蛋白激酶／细胞外信号调节激酶的激酶（MEK）抑制剂PD98059对小鼠结直肠癌的联合作用及机制。方法将二甲基肼注射于小鼠颈后20周，建立小鼠结直肠癌模型。从第16周起给予雷帕霉素、PD98059和雷帕霉素＋PD98059腹腔注射，共8周；至24周处死实验动物，测算肿瘤体积，以HE染色判断肿瘤发生率；应用免疫组化法检测肿瘤组织mTOR、p70s6K、4E-BP1蛋白的磷酸化水平。结果雷帕霉素、PD98059及雷帕霉素＋PD98059干预组小鼠结直肠癌发生率显著低于模型组（44．44％、38．89％、6．67％比77．78％，P均〈0．05）；肿瘤体积显著小于模型组[分别为（6．153±2．192）、（8．85±3．983）、（2．917±0．191）比（16．136±6．855）mm^3，P值均〈0．05]；蛋白磷酸化水平显著低于模型组，mTOR蛋白磷酸化水平分别为69．584％±3．600％、72．381％±8．561％、14．430％±2．413％比91．689％±1．994％；p70s6K分别为84．315％±3．132％、81．183％±3．980％、12．135％±2．382％比91．451％±2．160％；4E-BP1分别为65．288％±4．259％、66．641％±4．296％、19．119％±6．297％比75．999％±4．417％（P均〈0．05）。且在降低肿瘤发生率、缩小肿瘤体积以及抑制mTOR信号通路活性方面，雷帕霉素＋PD98059干预组的效果显著优于雷帕霉素及PD98059单独用药，差异有统计学意义（P均〈0．05）。结论雷帕霉素与PD98059可联合抑制小鼠结直肠癌的发生和生长，其作用机制可能涉及对mTOR信号转导通路相关蛋白磷酸化水平的抑制。
- 张燕捷田筱青李小强杜光烨陆玲娟董君波房静远
- 关键词：西罗莫司小鼠
- 丝裂原活化蛋白激酶特异性小干扰RNA表达载体对结肠癌细胞周期和DNA甲基化的影响被引量：1
- 2007年
- 目的构建丝裂原活化蛋白激酶(MEK)基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体,观察其静默效应及对结肠癌细胞SW1116生长周期和DNA甲基化的影响。方法选择MEK不同靶点寡核苷酸片段.克隆到pGCsilencer真核表达载体中。脂质体转染SW1116细胞,荧光显微镜评估转染效率,G418筛选稳定表达siRNA的细胞。Western印迹法检测siRNA对MEK蛋白表达的静默效果。应用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法检测细胞生长活力,流式细胞术分析细胞周期,甲基化特异性PCR和DNA测序检测p16^(INK4A)基因启动子甲基化状态。结果构建2个靶点的MEK重组质粒,分别转染和联合转染SW1116细胞,转染效率约为72.1%,G418筛选培养2周得到稳定表达MEK siRNA的细胞,MEK蛋白抑制率分别为74.2%和69.1%和90.2%.下游分子ERK蛋白磷酸化水平随之降低;细胞增殖活力下降2～4倍和细胞周期阻滞于G1期,细胞周期负调控因子p16^(INK4A)启动子区呈低甲基化状态。结论MEK特异性siRNA表达载体对结肠癌细胞MEK蛋白表达有一定的静默效果,多靶点联合效果更好.阻滞细胞周期于G1期,促进p16^(INK4A)基因去甲基化。
- 王霞陈萦晅房静远陆嵘孙丹凤朱红音李恩灵沈冠凤
- 关键词：结肠肿瘤DNA甲基化小分子干扰丝裂原激活蛋白激酶类
- 肿瘤中自噬的表观遗传学研究进展被引量：1
- 2011年
- 自噬是指真核细胞生物在代谢压力下,细胞自身胞质成分被双层膜结构的自噬小泡包裹后运送至溶酶体融合降解的过程。越来越多的研究证据表明,自噬在肿瘤的发生、发展中发挥着重要作用。本研究就肿瘤中自噬的发生、发展亦存在的多种表观遗传学研究进展作一综述。
- 任琳琳房静远
- 关键词：自噬肿瘤表观遗传学DNA甲基化
- 雷帕霉素与PD98059联合调控人结直肠癌细胞周期和mTOR信号转导通路被引量：8
- 2007年
- 目的探讨雷帕霉素(RPM)与PD98059对人结直肠癌细胞的联合作用及机制。方法应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测RPM和PD98059对人结直肠癌细胞的生长抑制作用,应用流式细胞术检测RPM和PD98059对细胞周期的影响,应用免疫印迹法检测RPM和PD98059对于哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号转导通路相关蛋白的调控。结果RPM与PD98059对人结直肠癌细胞株SW480、HCT116、HT29均有生长抑制作用,PD98059的作用具有一定的时间-浓度依赖性。在相同作用条件下,RPM与PD98059的联合抑制效果明显优于PD98059单独用药。RPM与PD98059单独或联合用药对人结直肠癌细胞株SW480、HCT116、H129的生长周期均有调控作用(P<0.01),但作用位点不同。RPM与PD98059可下调mTOR、p70s6K、4E-BP1蛋白的磷酸化水平,对SW480和HCT116细胞的总体4E-BP1蛋白水平也具有调控作用,以二者的联合作用最为显著。RPM与PD98059对SW480、HCT116、HT29细胞的mTOR和p70s6K总体水平无明显影响。结论RPM与PD98059可协同抑制人结直肠癌细胞株SW480、HCT116、HT29的生长,并阻滞其细胞周期。其作用机制可能涉及对mTOR信号转导通路相关蛋白磷酸化水平的调控。
- 张燕捷房静远孙丹凤赵树靓沈冠凤郑青朱红音
- 关键词：雷帕霉素MTOR结直肠肿瘤PD98059信号转导
