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河北省卫生厅科研基金(20090125)

作品数：3 被引量：3H指数：1
相关作者：宋秀君卢建民王会芳李小磊连玲艳更多>>
相关机构：河北医科大学第三医院大连医科大学附属第一医院更多>>
发文基金：河北省卫生厅科研基金河北省科技支撑计划项目更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 3篇医药卫生

主题

  • 3篇细胞
  • 3篇角膜
  • 2篇树突
  • 2篇树突状
  • 2篇树突状细胞
  • 2篇小鼠
  • 2篇小鼠角膜
  • 2篇基质
  • 2篇基质细胞
  • 1篇移植免疫
  • 1篇移植免疫排斥...
  • 1篇增殖
  • 1篇生长因子Β
  • 1篇生物学
  • 1篇生物学特性
  • 1篇培养法
  • 1篇前列腺
  • 1篇前列腺素
  • 1篇前列腺素E2
  • 1篇转化生长因子

机构

  • 3篇河北医科大学...
  • 1篇大连医科大学...

作者

  • 3篇卢建民
  • 3篇宋秀君
  • 2篇李小磊
  • 2篇王会芳
  • 1篇连玲艳

传媒

  • 1篇眼科新进展
  • 1篇中华眼视光学...
  • 1篇中华实验眼科...

年份

  • 1篇2012
  • 2篇2011
共 3 条 记 录，以下是 1-3
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排序方式：
小鼠角膜基质细胞的KSFM培养基培养法
2012年
目的研究使用KSFM培养基能否获取具有增殖能力且保持生物学特性不变的小鼠角膜基质细胞（CSCs）。方法实验研究。将中央区角膜置于EDTA液（20mmol／L）内孵育45min后，用手术显微镊小心剥离角膜上皮层以及内皮层，并将获取的角膜基质置于含300U／mlⅠ型胶原酶的溶液中消化4h。离心后采用DMEM基础培养基、DMEM完全培养基（含10％FBS）以及KSFM培养基重悬细胞常规培养，并以含1U／m1分散酶的EDTA液消化传代细胞。同时，观察细胞并绘制细胞生长曲线；采用逆转录聚合酶链式反应（RT．PCR）检测细胞角膜蛋白多糖（keratocan）mRNA和乙醛脱氢酶（ALDH）mRNA表达情况；采用细胞免疫荧光染色以及蛋白质印迹方法检测细胞keratocan蛋白的表达情况。采用独立样本≠检验对数据进行统计学分析。结果通过胶原酶消化的方法可以从每只小鼠的角膜基质获取约l×l04个单个细胞。RT-PCR结果显示，原代细胞表达CSCs标记物keratocan和ALDH；免疫荧光染色和蛋白质印迹结果显示：原代细胞表达keratocan蛋白。培养于DMEM基础培养基内的原代CSCs无法增殖。培养于DMEM完全培养基内的CSCs可增殖，但第3代细胞不表达keratocan mRNA和ALDH mRNA以及keratocan蛋白。培养于KSFM培养基内的CSCs也可增殖，第3代细胞仍表达keratocan mRNA和ALDH mRNA以及keratocan蛋白，且与原代细胞相比，表达强度差异无统计学意义。结论KSFM培养基不仅能维持小鼠CSCs的生物学特性不变，还能有效促进细胞增殖。
卢建民李小磊王会芳宋秀君
关键词：基质细胞角膜细胞增殖生物学特性小鼠
角膜内树突状细胞及其在角膜移植免疫排斥反应中的作用被引量：2
2011年
树突状细胞是目前已知的体内功能最强的抗原呈递细胞。成熟树突状细胞可引发机体免疫反应,而未成熟树突状细胞则会诱导机体免疫耐受。最近研究表明,角膜中央区内的树突状细胞完全处于未成熟状态,而角膜周边区内的树突状细胞则大多处于成熟状态;树突状细胞在角膜移植免疫排斥反应中发挥着重要作用。本文就角膜内的树突状细胞以及其在角膜移植免疫排斥反应中的作用作一综述。
卢建民宋秀君
关键词：树突状细胞角膜角膜移植免疫排斥反应
小鼠角膜基质细胞分泌的转化生长因子β2及前列腺素E2对树突状细胞成熟过程的抑制作用被引量：1
2011年
背景研究表明，位于角膜中央区的树突状细胞（DCs）完全处于未成熟状态，而位于角膜周边区的DCs则大多处于成熟状态。角膜内的DCs广泛参与多种角膜相关疾病以及角膜移植免疫排斥反应，研究角膜内DEs的成熟状态具有重要意义。目的探讨小鼠角膜基质细胞（CSCs）是否通过分泌转化生长因子β2（TGF—β2）以及前列腺素E：（PGE2）抑制DCs的成熟。方法获取DCs、T细胞以及CSCs培养上清液。通过酶联免疫吸附实验（ELISA）测定CSCs培养上清液以及新鲜RPMI1640培养基内PGE2和TGF—β2的质量浓度。在DCs成熟过程中，应用TGF—β2中和抗体以及PGE：受体阻滞剂AH6809，并按照处理方式的不同分为对照组、CSCs培养上清液组、AH6809组、TGF—β2中和抗体组、AH6809＋TGF—β2中和抗体组。采用流式细胞技术检测DCs细胞表型CDllc、CD80、CD86和MHC-Ⅱ的表达情况，通过葡聚糖内吞实验检测抗原吞噬功能，并通过混合淋巴细胞反应检测刺激T细胞增生的能力。结果ELISA检测结果显示，与新鲜RPMI1640培养基相比，CSCs培养上清液内含有较高质量浓度的TGF—β2和PGE2。与CSCs培养上清液组比较，TGF—β2中和抗体组DCsCD80、CD86和MHC-Ⅱ的表达均升高，差异均有统计学意义（P〈0．05），葡聚糖的表达降低（P〈0．05），刺激指数（SI）增大（P〈0．05）；AH6809组CD86和MHC-Ⅱ的表达均升高，葡聚糖的表达降低，SI增大，差异均有统计学意义（P〈0．05）；TGF—β2中和抗体＋AH6809组DCsMHC-Ⅱ的表达和SI提高，差异均有统计学意义（P〈0．05）。与对照组比较，TGF—β2中和抗体＋AH6809组DCsCD80、CD86的表达和SI均较低，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论体外培养的小鼠CSCs可以通过分泌TGF—β2及PGE2抑制DCs成熟，且这两种细胞因子可发挥叠加效应。
卢建民王会芳李小磊连玲艳宋秀君
关键词：角膜基质细胞转化生长因子Β2前列腺素E2
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