国家自然科学基金(30860368)
- 作品数：15 被引量：60H指数：4
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- 相关机构：海南大学海南省农业科学院更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生自然科学总论化学工程更多>>
- α3β4乙酰胆碱受体在非洲爪蟾卵母细胞上的表达被引量：2
- 2011年
- 建立以哺乳动物α3β4乙酰胆碱受体(nAChR)为分子靶标的药物筛选模型。将大鼠乙酰胆碱受体的α3与β4亚基基因分别进行体外转录,获得α3与β4亚基基因的cRNA,按1∶1的比例将适量α3与β4的cRNA混合后,显微注射到新鲜分离的非洲爪蟾卵母细胞中,在ND96溶液中、17℃下培养24 h后,通过双电极电压钳技术(TEVC)检测受体α3β4 nAChR的乙酰胆碱(Ach)门控电流。同时注入α3、β4 cRNA的非洲爪蟾卵母细胞孵育24h后,可记录到明显的Ach门控内向电流,未注射或只注射ddH2O的对照组细胞则没有任何电流产生。α3β4乙酰胆碱受体在非洲爪蟾卵母细胞膜上成功表达,以此为药物作用靶点,可用于大量生物毒素等物质的活性筛选实验模型。
- 李宝珠陈心朱晓鹏胡远艳于海鹏邴晖长孙东亭罗素兰
- 关键词：非洲爪蟾卵母细胞药物筛选模型
- 天然芋螺毒素肽的化学合成被引量：1
- 2010年
- 芋螺毒素是由热带海洋肉食性软体动物芋螺分泌的、富含二硫键的一类结构多样的小分子多肽。芋螺毒素的化学合成已成为获得毒素肽的主要手段。现总结化学合成芋螺毒素线性肽及其氧化折叠形成二硫键的多种方法 ,并对现阶段化学合成芋螺毒素肽的新进展加以综述。
- 安婷婷吴勇长孙东亭罗素兰
- 关键词：芋螺毒素保护基团化学合成
- 多种芋螺PDI酶基因的克隆
- 实验目的与意义:芋螺毒素是一类产自于芋螺的生物活性多肽,富含半胱氨酸,能高选择性地作用于多种离子通道及其亚型和神经递质受体,具有极高的研究和药用价值。化学合成或变性的芋螺毒素需要在芋螺PDI酶的作用下,才能高效地构成正确...
- 彭超唐天乐陈心高炳淼吴勇朱晓鹏郑晓冬邴辉罗素兰
- 关键词：芋螺芋螺毒素克隆
- 文献传递
- 海洋生物毒素研究新进展被引量：16
- 2011年
- 海洋生物毒素以其毒性强,结构新颖,药理作用特殊,易合成等特点成为药理学和神经科学的有力工具和新药开发的新来源.本文根据海洋生物毒素的化学结构特征将其大致分为3类:即多肽类毒素,聚醚类毒素,生物碱类毒素等,并对其进行了综述,同时对海洋生物毒素的应用前景进行了展望.
- 邴晖高炳淼于海鹏胡远艳朱晓鹏长孙东亭罗素兰
- 关键词：芋螺毒素河豚毒素
- 水母毒素的研究现状
- ＜正＞水母（学名）是无脊椎动物,在分类学上隶属于腔肠动物门、钵水母纲。水母主要组成部分是水份,体内含有95%的水分,2%是蛋白质。大部分水母都有三个主要部份组成:圆伞状或是钟状的
- 陈琴陈心王蕊于海鹏长孙东亭罗素兰
- 关键词：水母毒素活性
- 文献传递
- 毕赤酵母高效电转化条件的研究被引量：12
- 2010年
- 目的建立毕赤酵母的高效电转化方法,为利用毕赤酵母重组表达海洋药物功能基因提供方法基础。方法采用电穿孔的方法把外源DNA转化进毕赤酵母基因组中。通过对毕赤酵母生长状态,电击条件等影响因素进行探索。结果当采用对数生长中期的菌体制备感受态细胞、电压为1.5kV、质粒浓度为0.15g.L-1和0.2cm电转化杯时,转化效率达到最大值,为每微克质粒DNA 36个转化子。经抽样PCR鉴定所得到的转化子均为阳性克隆。结论通过对电转化各种条件的优化,获得了高效电转化技术方法。
- 高炳淼高炳淼长孙东亭唐天乐
- 关键词：毕赤酵母电转化转化率
- 桶形芋螺毒管蛋白质组双向电泳条件优化被引量：3
- 2010年
- 目的:优化双向电泳的条件,建立适用于桶形芋螺毒管蛋白质组分析的双向电泳方法。方法:对毒管蛋白的提取、上样量及SDS-PAGE凝胶浓度等影响因素进行优化。结果:乙酸提取法适宜于毒管蛋白的提取,对于pH3～10、17cm的IPG胶条,当上样量为0.75mg,聚焦70000Vhr,SDS-PAGE凝胶浓度为15%时,可提高双向电泳的分离效果,所得蛋白点清晰、数目达到1003个。结论:采用优化的条件进行双向电泳,能得到分辨率高、重现性好、完整的双向电泳图谱,为后续桶形芋螺毒管蛋白质组学研究打下基础。
- 张容鹄冯建成彭超罗素兰
- 关键词：蛋白质组双向电泳
- 高质量毕赤酵母基因组DNA提取方法比较被引量：15
- 2010年
- 旨在比较5种毕赤酵母基因组DNA的提取法,以便获得简便高效的提取高质量酵母基因组DNA的优化方法。分别使用蜗牛酶破壁法,超声波破碎法,液氮研磨法,Lyticase破壁法,试剂盒法提取毕赤酵母基因组DNA,然后进行DNA电泳检测以及紫外分光光度计测定DNA浓度和纯度。结果显示,5种方法均能提取出酵母基因组DNA,而酶法所提取的酵母基因组DNA质量最好。由此证实,蜗牛酶法成本低、效果好,是理想的提取高质量酵母基因组DNA的方法,完全满足后续试验要求。
- 唐天乐高炳淼长孙东亭罗素兰
- 关键词：毕赤酵母
- PCR技术在海洋生物多肽毒素研究中的应用被引量：2
- 2011年
- 随着PCR反应技术的不断改进和完善,它们在现代科学研究、生产和生活检测中的应用也越来越广,并且极大程度上促进了基因工程和蛋白质工程的快速发展。就PCR技术在芋螺毒素、海蛇毒素、海葵毒素及水母毒素等海洋生物多肽毒素基因克隆研究中的应用作简要介绍。
- 郑晓冬李宝珠彭超高炳淼朱晓鹏陈心长孙东亭罗素兰
- 关键词：PCR技术芋螺毒素
- 新型α-芋螺毒素基因的克隆
- 实验目的与意义:本研究旨在从我国海南产的芋螺种类中,通过分子生物学方法,获取新型α-芋螺毒素,为发现和研究新的α-芋螺毒素的结构与功能奠定基础。
- 郑晓冬朱晓鹏陈心唐天乐李宝珠罗素兰
- 关键词：总DNAPCR扩增克隆
- 文献传递
