国家自然科学基金(30371740)
- 作品数：3 被引量：27H指数：2
- 相关作者：叶和春李国凤王红李振秋刘彦更多>>
- 相关机构：中国科学院植物研究所中国科学院研究生院河北大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 滤纸对青蒿丛生芽诱导及遗传转化的影响被引量：1
- 2006年
- 研究了滤纸对青蒿丛生芽诱导及遗传转化的影响.结果表明,培养基上加铺一层滤纸能够明显促进青蒿丛生芽的诱导,丛生芽诱导率可达到97%.在高效丛生芽诱导体系的基础上,探讨了滤纸在根癌农杆菌介导的青蒿遗传转化中的应用.优化后的青蒿转化体系,抗性丛生芽诱导率可达到59.7%,其中,12.5%的抗性丛生芽能发育成抗性生根植株,生根植株PCR检测均为阳性.在部分PCR检测阳性植株中检测到了GUS的稳定表达.该优化的转化体系对青蒿素生物合成分子调控的研究具有重要意义.
- 宋玉刚李振秋王红刘本叶李国凤叶和春
- 关键词：青蒿滤纸丛生芽GUS
- 中药青蒿鲨烯合酶的大肠杆菌表达、纯化与功能鉴定被引量：9
- 2007年
- 利用PCR方法,将经RACE方法克隆到的中药青蒿鲨烯合酶cDNA(AF302464)开放阅读框的3′末端截短99bp,插入到原核表达载体pET30a(+)的NcoⅠ和BamHⅠ酶切位点之间,构建N端和C端均携带有HIS6表达标签的鲨烯合酶重组表达载体pETSSA.将pETSSA转入大肠杆菌BL21(DE3),0.5mmol/LIPTG(isopropyl-beta-D-thiogalactoside)28℃诱导重组鲨烯合酶的表达.表达产物经镍琼脂糖柱纯化.纯化蛋白加入酶促反应体系(含FPP和NADPH),GC-MS分析酶促反应体系的正己烷萃取物,结果显示重组鲨烯合酶可以催化FPP向鲨烯的转化.青蒿鲨烯合酶的功能鉴定为进一步利用反义或RNAi技术限制甾类生物合成,从而提高青蒿中的青蒿素含量提供了基础.
- 李振秋王花红王红李国凤叶和春
- 关键词：鲨烯合酶大肠杆菌表达青蒿
