浙江省自然科学基金(Y4080023)
- 作品数：11 被引量：101H指数：5
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- 基于纳米金组合电极的HIV p24微流控安培免疫传感芯片研究被引量：3
- 2009年
- 研制了以聚碳酸酯(PC)为基底,以表面修饰了人免疫缺陷病毒(HIV)核心抗原p24单克隆一级抗体(Rp24I)的纳米金组合电极(GNEE)为工作电极的微流控安培免疫传感芯片,并应用于p24抗原(简称p24)实时分析。检测原理是基于夹心免疫分析法,在电压驱动和流动条件下,一次性加入p24样品和纳米金胶标记的p24二级抗体(Rp24Ⅱ-Au,金胶直径为50～100nm)溶液,利用不同物质因受电场影响而在微管道中的迁移速率不同,使得p24抗原和Rp24Ⅱ-Au依次到达GNEE电极,与其表面的Rp24I生成三明治型免疫复合物(Rp24I/p24/Rp24Ⅱ-Au)。接着以方波溶出伏安法(SWSV)将复合物上的金胶粒子溶出,由于溶出电流大小与被测定p24呈正比关系,从而获得p24的测定校正曲线。在pH6.2的磷酸缓冲液(PBS)中p24检测时间小于2min,线性范围为1～500ng/L(R2=0.9975),检测限为0.25ng/L。该芯片集成了加样、分离和检测系统,简化了分析步骤,缩短了检测时间,灵敏度达1μA.ng-1.mL,明显高于传统酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,对艾滋病的早期诊断和大范围筛查具有应用价值。
- 陈亚东李榕生干宁杨欣李天华
- 关键词：方波溶出伏安法微流控
- 铜铁试剂萃取流动注射-氢化物发生原子吸收光谱法测定纯铜中微量锡被引量：2
- 2008年
- 建立了铜铁试剂萃取流动注射-氢化物发生原子吸收光谱法测定纯铜中微量锡的方法。利用铜铁试剂萃取实现了铜与锡的有效分离，样品液中锡与NaBH4生成氢化物，而后经由密闭的流动系统传送至原子化器中，采用原子吸收光谱法加以检测。试验了铜铁试剂的最佳萃取条件，选择锡的测定波长为286．3nm。该方法的检出限为0．25ng／mL，测定锡的线性范围为1．0～13．0ng／mL。方法应用于铜有证参考样品中锡的测定，结果与认定值基本相符，加标回收率为90．0％～97．0％，相对标准偏差为3．2％。
- 干宁杨欣王峰李天华徐伟民
- 关键词：铜铁试剂
- 采用抗体包被金磁纳米微粒修饰电极的HIV p24/gp36安培联检芯片被引量：5
- 2009年
- 研制了以聚碳酸酯为基底的双通道安培检测微流控免疫芯片,在其中分别集成了修饰有HIV核心抗原p24/gp36的单克隆一级抗体的纳米金修饰电极,并应用于人血清中p24和gp36抗原的同时分析.检测原理是：基于夹心免疫分析法,在电压驱动下,一次性加入含有p24和gp36样品及HRP酶标记的p24和gp36二级抗体溶液,与电极表面的一级抗体生成夹心免疫复合物;接着在体系中加入H2O2,以方波溶出伏安法检测免疫复合物上HRP催化H2O2的还原电流.在pH为6.2的磷酸缓冲液中,对HIV p24和gp36的检测时间均少于2 min,线性范围为0.5-400μg/L,检测限为0.25μg/L.该芯片集成了加样、分离和检测系统,检测时间短,灵敏度明显高于传统的酶联免疫吸附分析法,可应用于对艾滋病的早期诊断和大范围筛查.
- 干宁李榕生陈亚东杨欣李天华
- 关键词：方波溶出伏安法
- 小麦粉中黄曲霉毒素B1现场检测用纳米修饰传感器被引量：4
- 2009年
- 在印刷电极表面涂覆一层壳聚糖（Chit）膜,在膜上同时固定四羧基酞菁铁（Ⅲ）（FePc）和HRP酶标黄曲霉毒素B1抗体（HRP-Ab-AFB1）包被纳米金,制备了可用于小麦粉中黄曲霉素B1（AFB1）快速检测的新型安培免疫传感器（SPCE｜Chit/FePc/Au/HRP-Ab-AFB1）。FePc对H2O2的还原具有催化作用,可作为HRP酶与电极之间电子传递媒介体。当该传感器在含AFB1样品的30℃溶液中温育8 min后,AFB1与Ab-AFB1的免疫结合导致HRP的活性中心与FePc之间的电子传递被部分阻碍,使HRP对H2O2电催化氧化电流Io降低。ΔIo与AFB1浓度在1.0-200μg/L成线性关系,标准样品的组内和组间变异系数〈3.5%;回收率97%-104%,检测限为0.3μg/L。该传感器检测AFB1温育时间短,一步测定免分离,为小麦粉中的AFB1现场分析提供了新技术。
- 干宁谢东华李榕生李天华闻伟刚
- 关键词：黄曲霉毒素B1小麦粉
- 基于复合纳米微粒修饰和磁性分离富集的一次性有机磷农药酶传感器被引量：18
- 2009年
- 在Fe3O4／Au微粒上固定乙酰胆碱酯酶（AChE），制得磁性复合粒子Fe3O4／Au／AChE。通过磁力将其吸附于涂覆了碳纳米管（CNTs）／纳米ZrO2／普鲁士蓝（PB）／Nation（Nf）复合膜的丝网印刷碳电极（SPCEs）表面，制得一次性有机磷农药（OPs）酶传感器。采用扫描电镜（SEM）、X射线荧光光谱（XRFS）表征传感器的制备过程，采用循环伏安法（CV）和示差脉冲伏安法（DPV）研究了传感器的电化学性质。利用OPs对AChE的抑制作用，以硫代乙酰胆碱（ATCh）为底物，对乐果进行了检测。在pH=7．5的0．1mol／L硝酸钾溶液中，乐果浓度的对数与酶电极的抑制率（A）在1．0×10^-6～1．0×10^-2mg／L间呈良好的线性关系，检测限为5．6×10～mg／L，用于实际样品白菜检测时的添加回收率在88％～105％之间，与气相色谱法（GC）所得结果一致。该传感器采用复合纳米粒子修饰电极表面，具有较高的比表面活性，响应迅速，检测限低；ZrO2可特异性地富集样品中的OPs，磁性纳米颗粒包被AChE可实现磁场分离和电极表面更新，且具有高灵敏度、低样品量、一次使用可抛弃、便携式等特点，可用于蔬菜等农产品中痕量OPs的快速、简便、准确检测。
- 杨欣巫远招谢东华闻伟刚干宁
- 关键词：碳纳米管纳米ZRO2乙酰胆碱酯酶有机磷农药
- 牛奶中痕量氯霉素快速检测的纳米修饰一次性安培免疫传感器研究被引量：6
- 2009年
- 目的：构建挂于Nafion／纳米金（AuNPs）包被牛血清蛋白-氯霉素载体抗原（CAP—BSA）丝网印刷碳电极（SPCEs）的一次性安培免疫传感器（SPCEsJNafion／AuNPs／CAP—BSA），并用于牛奶中氯霉素（CAP）含量测定。方法：采用循环伏安法（CV）和示差脉冲伏安法（DPV）研究CAP在该免疫传感器上的电化学行为，并通过竞争性免疫分析法测定CAP含量。结果：该免疫传感器在含1mmol·L^-1铁氰化钾和100μg·L^-1CAP抗体（anti—CAP）的25μLpH=6．0磷酸盐缓冲溶液（PBS）中加入不同浓度的CAP，并在25℃下温育6min，DPV还原峰电流上升百分比（Cl，％）与CAP浓度分别在0．2～10．0μg·L^-1（R2=0．9946）和10．0～100μg·L^-1（R2=0．9647）范围内呈线性关系，检测限为0．11μg·L^-1（3σ法）。应用于牛奶中CAP检测并与传统的高效液相色谱法（HPLC）比较，结果一致，其添加回收率在88％～102％之间。结论：该免疫传感器灵敏快速（10min）、制备容易（碳浆印刷）、样品用量少（2μL）、可抛弃，有单用于食品中痕量CAP快速筛测。
- 杨欣谢东华闻伟刚罗乃兴干宁
- 关键词：纳米金NATION氯霉素牛奶
- 采用纳米修饰双酶电极生物传感器检测有机膦与氨基甲酸酯类农药被引量：28
- 2008年
- 同时固定乙酸胆碱酯酶（AChE）及胆碱氧化酶（ChOx）于组装在丝网印刷电极表面的Fe3O4／Au纳米复合微粒上，构建了一类新颖的快速测定有机磷和氨基甲酸酯类农药的双酶传感器（AChE-ChOx／Fe3O4／AuSPCEs）。该双酶传感器电流响应在乙酸胆碱浓度为0．5～12．5mmol／L之间呈良好线性关系（R^2=0．998）。其对克百威（氨基甲酸酯类农药）和敌敌畏（有机磷类农药）的检测范围在0．05～1．00μg/mL 之间均呈良好线性关系（R^2=0．977），检测下限均可达0．01μg／mL。应用于实际样品白菜的添加回收率在95％～110％之间，与传统的生化法相比具有良好相关性。此外该传感器成本低、制备容易、可抛弃，有望用于氨基甲酸酯和有机磷类农药的现场大规模筛测。
- 干宁王峰杨欣李天华王军
- 关键词：纳米氨基甲酸酯
- 铁皮石斛根茎中菲类化学成分分析被引量：26
- 2009年
- 目的:研究铁皮石斛根茎的菲类化学成分。方法:运用各种柱色谱方法进行化学成分的分离纯化,并根据其理化性质、波谱解析、对照品比较以及文献报道对比鉴定化合物结构。结果:从其乙醇提取物中经反复纯化得到6个化合物,分别鉴定为2,3,4,7-四甲氧基菲(Ⅰ)、1,5-二羧基-1,2,3,4-四甲氧基菲(Ⅱ)、2,5-二羟基-3,4-二甲氧基菲(Ⅲ)、2,7-二羧基-3,4,8-三甲氧基菲(Ⅳ)、2,5-二羧基-3,4-二甲氧基菲(Ⅴ)、3,5-二羧基-2,4-二甲氧基菲(Ⅵ)。结论:其中化合物Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ为首次从石斛属植物中分离得到。
- 李榕生杨欣何平干宁
- 关键词：铁皮石斛
- 小麦粉中过氧化苯甲酰现场测定的肌红蛋白凝胶膜生物传感器研究被引量：5
- 2009年
- 基于肌红蛋白-硅酸铝（Mb-AlSiO4）凝胶膜修饰电极，制备了一种非媒介体型的过氧化苯甲酰（BPO）生物传感器，并用于小麦粉中BPO的直接快速检测。用扫描电子显微镜（SEM）、X-光电子能谱（XPS）和原子力显微镜（AFM）对AlSiO4凝胶修饰电极进行了表征。电极表面的Mb-AlSiO4凝胶膜有均匀的多孔结构，能长时间保持肌红蛋白活性。该传感器对BPO的电化学还原表现出良好的催化活性，BOP还原峰电流与其浓度在1×10^-6～4×10^-4mol／L的范围内有良好的线性关系，相关系数为0．997，检测限是5×10^-7mol／L。具有灵敏、稳定、易于制备的优点，适合于样品的现场快速测定，此技术平台可推广到粮油食品中其它添加剂的检测。
- 李榕生王峰干宁
- 关键词：肌红蛋白过氧化苯甲酰生物传感器
- ATP代谢物安培酶生物传感器的研制及在鱼肉鲜度测定中的应用被引量：5
- 2008年
- 目的:研制一种通过测定鱼组织中三磷酸腺苷(ATP)降解产物次黄嘌呤(HX)、肌苷(INO)、肌苷酸(IMP)代谢物来定量检测鱼肉鲜度的生物传感器系统。方法:用K1或H表示鲜度,K1或H取决于鱼肉中ATP降解产物的量。降解产物通过安培法检测,利用3种以二茂铁甲酸(FCA)为媒介体的导电聚吡咯酶电极,分别固定黄嘌呤氧化酶(XO)、核苷磷酸化酶(NP)和核苷酸酶(NT),定量检测HX、INO和IMP。结果:该传感系统可以快速测定HX、INO、IMP含量。同时发现即使鱼肉被储存于-12℃,7d后也会迅速分解。结论:该传感器简单、快速、使用方便,用来检测淡水鱼的鲜度,效果令人满意。
- 干宁王鲁雁李天华陈晓东徐伟民
- 关键词：安培生物传感器酶电极次黄嘌呤肌苷肌苷酸
