浙江省科技厅基金(2003C33005)
- 作品数：6 被引量：21H指数：3
- 相关作者：李红董凤芹陶君张哲蔡卫民更多>>
- 相关机构：浙江大学医学院附属第一医院浙江大学医学院附属邵逸夫医院浙江大学更多>>
- 发文基金：浙江省科技厅基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠蛋白聚糖Ⅱ重组腺病毒载体的构建及生物学功能的鉴定被引量：1
- 2006年
- 目的:构建大鼠蛋白聚糖Ⅱ(DCN)重组腺病毒载体(A d-DCN),鉴定其生物学活性。方法:用RT-PCR技术从大鼠肾脏组织mRNA中扩增获得全长DCN基因;将DCN基因克隆至腺病毒穿梭载体,与腺病毒骨架质粒在B J5183-AD-1细菌中同源重组,并转染至A d293细胞,扩增病毒后,用病毒空斑形成实验检测病毒滴度,并用MTT、RT-PCR、W estern b lot对其活性及表达情况进行鉴定。结果:本实验构建的A d-DCN滴度可达1×109pfu.m-l 1,能在CHO细胞中高效表达具有生物学活性的DCN蛋白;表达产物能拮抗TGFβ1对CCL-64细胞增殖的抑制作用,TGFβ1+表达产物DCN处理组细胞增殖率明显高于TGFβ1单独处理组和TGFβ1+A d-lacz处理组[(0.5252±0.04 vs 0.2826±0.02、0.2918±0.02)OD,P<0.05],但TGFβ1+表达产物DCN处理组细胞增殖率仍低于未处理组[(0.9332±0.08)OD,P<0.05]。结论:本实验构建的DCN重组腺病毒能高效表达具有生物学活性的DCN蛋白。
- 吴芳姚航平董凤芹李红
- Podocin与糖尿病肾病被引量：5
- 2005年
- Podocin是新近发现的肾小球裂隙隔膜上的一个蛋白,参与肾小球滤过屏障的形成并维持其正常功能。在糖尿病肾病(DN)患者中存在其编码基因nphs2的异常和podocin蛋白的表达下降。Podocin蛋白表达下降可使nephrin诱导的肾小球足细胞内信号转导功能障碍,肾小球足细胞减少,肾脏裂隙隔膜结构与屏障功能的完整性破坏,肾小球蛋白滤过增加。Podocin在DN的发生、发展中可能起关键作用。对podocin的进一步研究可能对DN的诊治有重要的指导意义。
- 李霖李红
- 关键词：肾小球滤过屏障DN糖尿病肾病足细胞N蛋白
- 糖尿病大鼠肾小球基质金属蛋白酶2和9的表达被引量：8
- 2004年
- 目的 :对糖尿病大鼠模型的肾组织中的基质金属蛋白酶 2 ( MMP- 2 )、基质金属蛋白酶 9( MMP- 9)、 型胶原 ( C- )和转化生长因子 β1( TGF- β1)的表达进行定量和定位研究 ,探讨糖尿病肾病的发病机理。方法 :SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素 ( 70 mg/ kg)诱发糖尿病 ,肾标本行常规病理检查 ,用 MMP- 2、MMP- 9、C- 单克隆抗体及TGF- β1多克隆抗体标记进行免疫组织化学染色、图象分析仪分析。结果 :正常大鼠 MMP- 2、MMP- 9主要表达在肾小球系膜细胞、内皮细胞、包曼氏囊壁层上皮细胞、肾小管上皮细胞 ,偶见浸润的巨噬细胞和中性粒细胞表达。造模后 2、4、8周时糖尿病组大鼠肾小球 MMP- 2较对照组明显下降 ( P<0 .0 5 ) ,而 TGF- β1和 C- 则均较对照组明显上升 ( P<0 .0 5 ) ,且 MMP- 2与 TGF- β1、C- 均呈负相关 ( r=- 0 .4 5、- 0 .6 9,P<0 .0 5 )。肾小球 MMP- 9在三组各时点均未显示显著性差异 ,糖尿病组肾小球 MMP- 9较正常对照组似有升高趋势 ,但无统计学差异 ( P>0 .0 5 )。结论 :糖尿病时伴有肾小球 MMP- 2表达水平的下降可能与 TGF- β1水平的升高有关 ,MMP- 2的减少导致 C- 降解减少 ,可能是引起细胞外基质积聚的原因之一。
- 董凤芹李红蔡卫民陶君郑芬萍张哲
- 关键词：基质金属蛋白酶2基质金属蛋白酶9转化生长因子Β1
- 糖尿病大鼠肾皮质细胞表型转化的探讨被引量：7
- 2007年
- 目的:探讨糖尿病大鼠肾皮质中波形蛋白(vimentin)、结蛋白(desmin)和转化生长因子β1(TGF-β1)表达的变化规律及其相互关系。方法:建立STZ诱导的SD大鼠糖尿病模型;用RT-PCR法检测造模成功后第3、7、14、30、60和90 d糖尿病大鼠肾皮质中vimentin、desmin和TGF-β1mRNA的表达水平。结果:①糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1和vimentin mRNA的表达分别从模型建立后第7 d和第14 d起逐渐增多,desmin mRNA的表达从第14 d起逐渐减少,糖尿病大鼠和对照组大鼠相比差异显著(P<0.05,P<0.01)。②糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1和vimentin的mRNA表达呈显著正相关,TGF-β1和desmin的mRNA表达却呈显著负相关,desmin和vimentin的mRNA表达也呈显著负相关。结论:糖尿病大鼠TGF-β1在肾皮质局部表达增多可能促进肾小管上皮细胞向成纤维细胞转化。
- 叶迅李红张晋红赵晓霞
- 关键词：表型转化生长因子Β波形蛋白结蛋白
- 活性氧簇与糖尿病肾病
- 2005年
- 活性氧簇(ROS)是高血糖引起肾脏病变的重要介导因素。还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶途径和线粒体途径及晚期糖基化终末产物均参与高血糖状态下ROS的产生。ROS可激活蛋白激酶C(PKC),而PKC通过活化蛋白激酶K,转录因子如核因子κB、活化蛋白-1来达到对糖尿病时肾脏的损伤。抗氧化剂可能对糖尿病肾病的防治有作用。
- 寿成珉李红
- 关键词：活性氧簇糖尿病肾病抗氧化剂活化蛋白-1核因子-ΚB
- Decorin基因转染抑制高糖培养的大鼠肾系膜细胞细胞外基质mRNA表达被引量：1
- 2007年
- 目的:观察核心蛋白聚糖Ⅱ(DCN)基因转染对高糖培养的大鼠肾系膜细胞(RMCs)细胞外基质(ECM)mRNA表达的影响。方法:用已构建的AD-DCN腺病毒感染高糖环境培养的大鼠肾系膜细胞,采用半定量RT-PCR测定decorin、转化生长因子β1(TGF-β1)、纤维粘连蛋白(fibronectin)和IV型胶原(collagen IV)mR-NA水平。结果:高糖培养的RMCs感染AD-DCN后,DCN mRNA水平显著增高,24h至第7d,该组DCN mRNA水平始终显著高于高糖组及AD-LacZ感染组(P<0.05),decorin mRNA水平增高后表现出对TGF-β1mRNA水平的抑制作用,在mRNA水平,AD-DCN感染的RMCs细胞外基质fibronectin和collagen IV随TGF-β1mRNA水平下降而下降。结论:DCN重组腺病毒感染大鼠肾系膜细胞后能高效表达目的基因decorin并拮抗TGF-β1的生物活性,其下调ECM成分mRNA水平的作用与使用TGF-β抗体的效果相似。
- 朱锋李红吴芳羊正纲
- 关键词：蛋白聚糖细胞外基质基因转染
