吉林省科技发展计划基金(20110221)
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 相关作者：高云航徐凤宇王全凯么乃全王巍更多>>
- 相关机构：吉林农业大学吉林正方农牧股份有限公司军事医学科学院更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金国家现代农业产业技术体系建设项目吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鸭疫里默氏菌OmpA与鸭IL-2融合基因的克隆与原核表达被引量：2
- 2014年
- 以鸭疫里默氏菌吉林分离株JL-RA1OmpA基因(登录号HQ707077)和鸭DuIL-2成熟片段基因(登录号AY193713)为模板,分别设计带有linker的特异性引物,PCR扩增出序列大小为1182bp的OmpA-linker基因和序列大小为381bp的linkerDuIL-2成熟蛋白基因。利用SOE-PCR技术,成功构建OmpA-DuIL-2融合基因,片段大小为1551bp。将其转入大肠杆菌表达载体pET-28a中,构建pET-OmpA-DuIL-2融合表达载体,转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)中,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE分析得到分子量大小约为61 kDa的融合蛋白,经Western-blot分析该融合基因同时具OmpA和DuIL-2的反应原性。
- 高云航刘佳丽王巍李秋菊张福君马红霞
- 关键词：鸭疫里默氏菌原核表达
- 鸭疫里氏杆菌外膜微孔蛋白基因的克隆和序列分析及PCR检测方法的建立被引量：5
- 2013年
- 根据GenBank中的鸭疫里氏杆菌(RA)外膜磷酸盐选择性微孔蛋白(Porin)基因序列设计特异性引物,以血清1、2、6、10、11、13、14和17型RA菌株的基因组DNA为模板均扩增出大小为1 212bp的目的片段,序列比对显示该基因在8种血清型菌株间同源性均大于99.6%。针对保守性最高的357bp片段设计特异性引物,建立了PCR检测方法,对鸭致病性大肠杆菌、鼠伤寒沙门菌、鸭巴氏杆菌及鸭肝炎病毒均未扩增出目的条带,表明该方法具有较高的特异性;敏感性试验显示最小检出量为73.96pg的基因组。应用建立的PCR方法对分离自吉林、河北及北京的8个菌株进行扩增,均在357bp处扩增出清晰的目的条带,与细菌分离鉴定的符合率达100%。本研究为RA的鉴定提供了新方法,为RA外膜微孔蛋白的后续研究提供了理论依据。
- 么乃全王全凯姜秀云徐凤宇于丹孟轲音高云航
- 关键词：鸭疫里氏杆菌聚合酶链式反应
- 鸭疫里氏杆菌吉林分离株16S rRNA系统分析及其OmpA基因克隆被引量：1
- 2013年
- 为研究鸭疫里氏杆菌(RA)16S rRNA变异与OmpA基因之间的关系,提取了RA吉林分离株JL-RA1和JL-RA3总DNA,并设计特异性引物扩增两株RA保护性抗原OmpA全基因序列。结果显示,扩增出的16S rRNA序列大小均为1478 bp,OmpA片段序列大小均为1164 bp,与预期结果一致。扩增的16S rRNA与GenBank中已知的RA 16S rRNA序列同源性高达99.0%～99.9%,扩增的OmpA序列与GenBank中已知的RA OmpA序列同源性达93.3%～100%,编码蛋白质的氨基酸序列同源性为96%～100%。
- 高云航刘佳丽王巍徐凤宇张福君马红霞
- 关键词：鸭疫里氏杆菌16SRRNA基因系统进化分析
- 鸭疫里氏杆菌病诊断方法研究进展被引量：1
- 2012年
- 鸭疫里氏杆菌病是鸭的常发传染病,给养鸭业造成了巨大经济损失,利用实验室方法进行快速准确诊断是治疗和控制该病的重要前提。对鸭疫里氏杆菌病诊断方法的研究进展及其优缺点作了简要综述,以期为该病的防控及诊断方法研究提供参考。
- 么乃全高云航徐凤宇张敏王全凯
- 关键词：鸭疫里氏杆菌病
